Cell Navigator 細胞膜染色試劑盒是美國AAT Bioquest生產(chǎn)的用于染色細胞膜的試劑盒，Cell Navigator 細胞質(zhì)膜染色試劑盒可快速，均勻地標記質(zhì)膜，而沒有凝集素表現(xiàn)出的細胞類型差異。 它可以用作HCS（高含量篩選）的分割工具，以及對細胞質(zhì)膜進行染色以用于標準熒光顯微鏡檢查。 試劑盒中使用的綠色熒光染料可固定但不能通透，因此不適用于還涉及通過抗體探測內(nèi)部靶標的實驗。百螢生物是AAT Bioquest的中國代理商，為您提供的Cell Navigator 細胞膜染色試劑盒。
| 熒光顯微鏡 | |
| 激發(fā)： | FITC濾波片 |
| 發(fā)射： | FITC濾波片 |
| 推薦孔板： | 黑色透明孔板或載玻片 |
樣品實驗方案
簡要概述
1.在生長培養(yǎng)基中準備細胞
2.準備并向細胞添加Cellpaint Green工作溶液
3.在37℃下孵育5至20分鐘
4.使用FITC濾光片組讀取熒光強度
溶液配制
1.儲備溶液配制
所有未使用的儲備溶液應(yīng)分為一次性使用的等分試樣，并在制備后儲存在-20°C下。 避免重復凍融循環(huán)。
Cellpaint 綠色原液（500X）：
將100 uL DMSO（組分C）添加到Cellpaint Green（組分A）小瓶中，制成500X儲備溶液。 注意：20 µL Cellpaint Green 500X儲備溶液足以用于一個96孔板。 如果管密封嚴密，可以將未使用的Cellpaint Green 500X儲備溶液分裝并在≤-20oC下保存1個月。 避光并避免重復的凍融循環(huán)。
2.工作溶液配制
Cellpaint 綠色工作溶液（1X）：
將20 uL的500X儲備溶液添加到10 mL的測定緩沖液（組分B）中，并充分混合。 注意：我們建議在使用前使工作溶液新鮮。
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樣品示例及操作
2.除去每個孔中的工作溶液。 用生理緩沖液（例如HHBS，DPBS或您選擇的緩沖液）洗滌細胞3次，并替換為HHBS。
3.可選：染色后固定細胞。 用4％甲醛固定細胞15-30分鐘。 用生理緩沖液洗滌細胞三遍。
4.使用帶有FITC濾波片組的熒光顯微鏡觀察細胞中的熒光信號。
圖1.在玻片上，Cellpaint Green與Hoechst 33342共染色的HL-60細胞的熒光圖像。 使用熒光顯微鏡，使用帶有FITC濾鏡的60X油鏡對細胞成像。 由于來自細胞邊界上方和下方的膜的所有熒光信號均被不加選擇地捕獲，因此圖像顯得更加刺破和擴散。 與常規(guī)的落射熒光成像相比，共聚焦熒光成像比常規(guī)的落射熒光顯微鏡更靈敏，可以為您提供更多的控制。 如果可以使用共聚焦顯微鏡，則可能會獲得清晰的細胞膜成像。
