商品介紹：
測定意義: H2O2是生物體內(nèi)最常見的活性氧分子，主要由SOD和XOD等催化產(chǎn)生，由CAT和POD等催化降解。H2O2不僅是重要的活性氧之一，也是活性氧相互轉(zhuǎn)化的樞紐。一方面，H2O2可以直接或間接地氧化細胞內(nèi)核酸，蛋白質(zhì)等生物大分子，并使細胞膜遭受損害，從而加速細胞的衰老和解體；另一方面H2O2也是許多氧化應急反應中的關(guān)鍵調(diào)節(jié)因子。 測定原理： H2O2與硫酸鈦生成黃色的過氧化鈦復合物，在415nm有特征吸收。 需自備的儀器和用品： 可見分光光度計/酶標儀、臺式離心機、可調(diào)式移液器、1 mL玻璃比色皿/96孔板、丙酮60mL、濃鹽酸10mL、研缽和冰。 |
提取液：液體 100 mL×1 瓶，4℃保存。
試劑一：液體 5 mL×1 瓶，4℃避光保存。
試劑二：液體 15 mL×1 瓶，4℃保存。
試劑三：液體 3 mL×1 瓶，4℃保存。
試劑四：液體 3 mL×1 瓶，4℃保存。
本試劑盒僅供研究使用公司實驗室提供免費代測,7個工作日出結(jié)果,提供原始數(shù)據(jù)!
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 檢測方法 | 貨號 |
過氧化氫（H2O2）測試盒可見分光光度法 | 50管/48樣 | 可見分光光度法 | BK-01S6409 |
實驗結(jié)果判斷我有妙招：
1、定量測定結(jié)果根據(jù)標準曲線計算樣品中待測物的含量。
2、以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2～3SD，作為陽性結(jié)果的閾值。
3、以P／N值(陽性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽性，P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑，P／N小于1．5為陰性。
4、ELISA試劑盒目測定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應后，肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照，與陰性對照的顏色接近者，判定為陰性。
與您分享常用不穩(wěn)定試劑的分類及要求：
① 易揮發(fā)、低燃點的試劑要密封，放于陰涼、通風、遠離火源處保存。
② 與水蒸氣，水發(fā)生反應的物質(zhì)要密封，并遠離水源保存。
③ 易與氧氣作用的試劑，應將其固體或晶體密封保存，不宜長期存放其水溶液，亞硫酸，氫硫酸溶液要密封存放，鉀，鈉，白磷更要采用液封形式。
④ 與二氧化碳反應的物質(zhì)要密封保存，其相應的溶液較固體更易反應，所以更要注意密封保存。
⑤ 易揮發(fā)或自身分解的試劑要密封，放于陰涼通風處保存。
操作步驟：
1. 樣品的準備：
a. 細胞樣品的準備：收集細胞，用4 ℃或冰浴預冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預冷組織細胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心，取上清作為待測樣品。
b. 組織樣品的準備：動物用生理鹽水(0.9% NaCl ，含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細胞裂解液比例， 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心，取上清作為待測樣品。
d. 使用BCA蛋白濃度測定試劑盒（P1511）測定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個活力單位左右(不同細胞和組織的差異會比較大，該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準備20-100 ug蛋白量通常已經(jīng)足夠用于后續(xù)檢測。
e. 根據(jù)蛋白濃度和預計的蛋白使用量，用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液適當稀釋樣品。例如，小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準備好的樣品如果當天測定，可以冰浴保存；如果當天不能完成測定，可以-70 ℃凍存，但建議盡量當天完成測定。
2. 試劑盒的準備工作：
a. WST-8酶工作液的配制： 參照下表，根據(jù)待檢測樣品(包括標準品) 數(shù)量，配制適量WST-8酶工作液，配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存，可當天使用，但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。
注意：由于酶溶液的用量較少且易沉降，必須注意在使用前先輕輕離心一下，然后適當混勻后再使用。
b. 反應啟動工作液配制：將試劑盒提供的反應啟動液 (40X) 溶解后混勻，按1μl 反應啟動液(40X) 加入39μl SOD 檢測緩沖液的比例進行稀釋，即為反應啟動工作液。4℃或冰浴保存，可當天使用，但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。
c. (可選做) SOD 標準品準備：需自備SOD標準品，用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標準品稀釋至如下系列濃度：20U/ml，10U/ml ，5U/ml，2.5U/ml，1.25U/ml，0.625U/ml。在隨后的檢測中可以各取20微升，參考樣品進行檢測。說明：為避免稀釋后SOD酶活性的下降， SOD標準品宜現(xiàn)稀釋現(xiàn)使用；本試劑盒對于SOD的檢測并不需要SOD作為標準品，但可以使用SOD標準品作為陽性對照或作為對SOD活性定量的參考。
MLCB寒天培地 MLCB Agar 250g
1g 姬姆色素染料 Giemsa Stain 室溫保存
50T 01和0139CR檢測試劑盒 低溫運輸，-20℃保存
300µL 山羊抗小鼠IgG(H+L)，辣根過氧化物標記 Goat Anti-Mouse IgG(H+L),HRP Conjugate -20℃保存
2 ug pBlueScriptR PPP2R1B pBlueScriptR PPP2R1B 低溫運輸，-20℃保存
20只/袋 口腔拭子（醫(yī)用簡裝）
2 ug pFastBac pFastBac 低溫運輸，-20℃保存
100µL 小鼠抗GFP標簽單抗 Anti GFP-Tag Mouse MAb -20℃保存
1瓶 C127細胞株 C127 低溫運輸和保存
顯色培養(yǎng)基
500U E.coli DNA聚合 Ι E.coli DNA Polymerase I -20℃保存
過氧化氫（H2O2）測試盒可見分光光度法C9orf86 9號染色體開放閱讀框86抗體 規(guī)格: 0.2mlD.Aspartic acid D型天冬抗體 規(guī)格: 0.1ml
CCDC147 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白147抗體 規(guī)格: 0.2mlMLX 轉(zhuǎn)化因子樣蛋白4抗體 規(guī)格: 0.2ml
H Cadherin/CDH13 心臟鈣粘蛋白抗體 規(guī)格: 0.2mlMouse Anti-Guinea pig IgG/PE-Cy7 PE-Cy7標記的小鼠抗豚鼠IgG 規(guī)格: 0.1ml
C11orf21 11號染色體開放閱讀框21抗體 規(guī)格: 0.2mlRabbit anti-mouse Kappa light chain/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555標記的兔抗小鼠k鏈 規(guī)格: 0.1ml
phospho-PTPN6(Ser591) 磷酸化蛋白酪磷酸1C抗體 規(guī)格: 0.1mlVEGF 管內(nèi)皮生因子抗體 規(guī)格: 0.1ml
Rabbit anti-Dog IgG whole serum 兔抗狗IgG抗清 規(guī)格: 1mlGADD45 gamma 生抑制DNA損傷基因45γ抗體 GADD45γ 規(guī)格: 0.2ml
phospho-Androgen Receptor(Ser660) 磷酸化雄激素受體抗體 規(guī)格: 0.1mlNFAT4 核因子活化T細胞胞漿蛋白3抗體 0.2ml
SARM1 SARM1蛋白抗體 規(guī)格: 0.2mlTFEB T淋巴細胞轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子TFEB抗體 規(guī)格: 0.1ml
PLCG 2/PLC gamma 2 磷酯Cγ2抗體 規(guī)格: 0.2mlSM-MHC 心肌肌球蛋白抗體（α-myosin） 規(guī)格: 0.1ml
VWCE VWCE抗體 規(guī)格: 0.2mlGoat Anti-Guinea pig IgG/Gold 膠體金標記的羊抗豚鼠IgG 規(guī)格: 0.5ml
Rab3A+Rab3B+Rab3C+Rab3D ras基因家族Rab3A--Rab3D抗體 規(guī)格: 0.2mlMitochondrial Pyruvate dehydrogenase kinase 1 丙酮酸脫激1抗體 規(guī)格: 0.1ml
phospho-EGFR (Ser1190) 磷酸化表皮生因子受體抗體 規(guī)格: 0.1mlDbx2 大腦發(fā)育同源蛋白2抗體 規(guī)格: 0.2ml
