注意事項：
1、試劑二為酶，不可冷凍，使用時在冰上放置。
2、對照管只需要做一管。
3、若對照管吸光值大于2，建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用（10μl試劑二原液+60μl蒸餾水）。
4、SOD為什么有的樣本測定管大于對照管，對照管數(shù)值在什么范圍？
對照管的范圍是0.8-2。對照管吸光值過低可能是（1）試劑二或試劑四沒有現(xiàn)配現(xiàn)用；（2)沒有按順序加試劑；（3）反應(yīng)時間不夠，可以延長反應(yīng)時間（反應(yīng)時間30min可以延長到40min）。對照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應(yīng)倍數(shù)。
若出現(xiàn)測定管大于對照管，可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大，為了降低雜質(zhì)的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測，通?？梢允箿y定正常。計算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)。
特別提醒：本產(chǎn)品僅供科研研究使用，不得用于人體臨床直接檢測。
產(chǎn)品名稱：二胺氧化酶(DAO)測試盒可見分光光度法
產(chǎn)品規(guī)格：50管/24樣
檢測方法：可見分光光度法
產(chǎn)品貨號：BK-01S6430
產(chǎn)品分類：氧化與抗氧化系列
商品介紹：
測定意義: DAO(EC1.4.3.6)廣泛存在于動物（腸粘膜、肺、肝臟、腎臟等）、植物和微生物中。催化多胺氧化為醛，其活性與核酸和蛋白合成密切相關(guān)，能夠反映腸道機械屏障的完整性和受損傷程度。 測定原理： DAO催化尸胺產(chǎn)生醛和過氧化氫，外源添加過量的辣根過氧化物酶，催化過氧化氫氧化鄰聯(lián)茴香胺生成有色物質(zhì)，在460nm處有特征吸收峰，通過測定該波長吸光度增加速率，計算DAO活性。 自備實驗用品及儀器： 天平、低溫離心機、可見分光光度計/酶標儀、1 mL玻璃比色皿/96孔板、蒸餾水。 |
所需的儀器和用品：
可見分光光度計、1mL 玻璃比色皿（光徑 1cm）、低溫離心機、移液器、研缽、冰和蒸餾水
四、超氧化物歧化酶（SOD）的測定：
建議正式實驗前選取 2 個樣本做預(yù)測定，了解本批樣品情況，熟悉實驗流程，避免實驗
樣本和試劑浪費！
1、樣本制備
① 組織樣本： 取約 0.1g 組織（水分充足的樣本可取 0.25g），加入 1mL 提取液，在 4oC 或冰浴進行 勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min，取上清作為待測液。 【注】：若增加樣本量，可按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為 1：5~10 的比例進行提取
| ② 細菌/細胞樣本： 先收集細菌或細胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；取約 500 萬細菌或細胞加入 1mL 提取液，超聲波破碎細菌或細胞（冰浴，功率 200W，超聲 3s，間隔 10s，重復(fù) 30 次）； 12000rpm 4℃離心 10min，取上清，置冰上待測。 【注】：若增加樣本量，可按照細菌/細胞數(shù)量（10 4）：提取液（mL）為 500~1000：1 的比例進行提取。 ③ 液體樣本：直接檢測；若渾濁，離心后取上清檢測。 |
實驗方法學(xué)：
一、肝素的配制：
市售肝素凍干粉140單位/mg，1克瓶裝，每瓶140，000單位，稱取0.1克肝素凍干粉，加生理鹽水5ml，配成2800單位/ml。取50～100μl濕潤管壁，可抗凝人血3～5ml，血液不會凝固。老鼠血易凝固，所以最好更濃一些?？梢匀?.1克肝素凍干粉，加3ml生理鹽水溶解后，取50～100μl,可抗凝鼠血2～4ml。
肝素抗凝管的制備：取0.1克肝素凍干粉，加2.5ml生理鹽水。取100μl～150μl滴入塑料或玻璃管中，濕潤管壁，低于80℃小烤箱中（可以用烤面包的小烤箱），橫向轉(zhuǎn)動，每隔5～10分鐘轉(zhuǎn)動一次，直至干燥后放入4℃保存，可使2～5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集：
全血根據(jù)收集的條件，分成不抗凝和抗凝兩種。同時，不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清；抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1～2小時，直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血，輕輕顛倒充分抗凝后，可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征，選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及。
選擇抗凝的注意點：
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致，同時所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒，充分抗凝，防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多（1ml抗凝全血能分離出0.4～0.5ml血漿）;
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后，解凍時可能會出現(xiàn)絮狀渾濁，如有則需要離心去掉渾濁后
用于測定。
100mL Bicine Buffer，0.5M,pH7.4 Bicine Buffer，0.5M,pH7.4 常溫保存
革蘭氏陰性菌增菌液 Gram Negative Bacteria Enrichment Broth 250g
5g 雙 (2- ) 亞氨基三 ( 羥甲基 ) 甲烷 Bis-Tris 室溫干燥保存
500mL Tris-HCl Buffer,2.0M,pH7.5 Tris-HCl Buffer,2.0M,pH7.5 常溫保存
1mL 植物蛋白抑制劑 Protease Inhibitor for Plant -20℃保存
2 ug pTT5 pTT5 低溫運輸，-20℃保存
30次 凝固血液DNAout Blood Clot DNAOUT 常溫
2 ug pEF6/myc-His C pEF6/myc-His C 低溫運輸，-20℃保存
M17瓊脂 M17 Agar 250g
250mg 噻唑蘭 Thiazolyl Blue Tetrazolium Bromide(MTT) 4℃避光保存
96支 10 μL RNase-free白吸頭（盒裝已滅菌長尖） 常溫
二胺氧化酶(DAO)測試盒可見分光光度法Jun D 活化蛋白激D抗體 規(guī)格: 0.1mlRabbit Anti-Mink IgG/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555標記的兔抗水貂IgG 規(guī)格: 0.1ml
Donkey Anti-Guinea pig IgG/Cy5.5 Cy5.5標記的驢抗豚鼠IgG 規(guī)格: 0.1mlFMDV Polyprotein (VP1 protein) 口蹄疫毒A型抗體 規(guī)格: 1ml
Rabbit Anti-human IgG F(ab')2 兔抗人IgG F(ab')2 規(guī)格: 1mgSOX10 轉(zhuǎn)錄因子SOX10抗體 規(guī)格: 0.2ml
AIF 調(diào)亡誘導(dǎo)因子抗體 規(guī)格: 0.1mlMAGEA2 黑色素瘤相關(guān)抗原2抗體 規(guī)格: 0.2ml
GATA6 GATA結(jié)合蛋白6抗體 規(guī)格: 0.1mlR Cadherin R Cadherin/CDH4 規(guī)格: 0.2ml
RND3/RHOE Rho家族GTP3抗體 規(guī)格: 0.1mlCDCA7 細胞分裂周期相關(guān)蛋白 規(guī)格: 0.2ml
eIF4G 真核翻譯起始因子4G抗體 規(guī)格: 0.1mlNIK/MAPKKK14 NFkB誘導(dǎo)激抗體 規(guī)格: 0.1ml
CT-1/CTF1 心肌營養(yǎng)素1抗體 規(guī)格: 0.1mlNRH2 死亡結(jié)構(gòu)域蛋白NRH2抗體 規(guī)格: 0.2ml
Rabbit Anti-Goat IgG/PE-CY5 PE-CY5標記的兔抗羊IgG 規(guī)格: 0.1mlInsulin Receptor R 胰島素受體相關(guān)受體抗體 規(guī)格: 0.2ml
RP1/DCDC4A 視網(wǎng)膜色素變性蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2mlPCSK9/NARC1 神經(jīng)細胞凋亡調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)化蛋白1抗體（前蛋白轉(zhuǎn)化枯草溶菌素9） 規(guī)格: 0.1ml
StAR/StARD1 促黃體激素誘導(dǎo)蛋白抗體 規(guī)格: 0.2mlCNOT6 細胞表面趨化因子受體4相關(guān)蛋白6抗體 規(guī)格: 0.2ml
BCAS3 相關(guān)蛋白3抗體 規(guī)格: 0.1mlPAFAH1B3/PAFAHG 小板衍化生因子γ抗體 規(guī)格: 0.2ml
