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線狀DNA清除劑

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DNA純化產(chǎn)品

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上海聯(lián)邁生物工程有限公司

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產(chǎn)品簡介

線狀DNA清除劑分離純化環(huán)狀DNA（質(zhì)粒DNA、線粒體DNA、葉綠體DNA和某些病毒DNA）的時(shí)候經(jīng)常需要去除其中的基因組DNA污染，否則會(huì)對后續(xù)的PCR、WGA和測序等反應(yīng)產(chǎn)生干擾。而基因組DNA一般都十分巨大，無論是線狀（如真核細(xì)菌基因組DNA）還是環(huán)狀（如細(xì)菌DNA），經(jīng)過常規(guī)的DNA純化過程都會(huì)變成20-50 Kb大小的線狀DNA，而上述環(huán)狀DNA一般還能保持環(huán)狀構(gòu)型。根據(jù)這一特點(diǎn)，本公司

詳細(xì)介紹

線狀DNA清除劑

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線狀DNA清除劑	30次	詢價(jià)

分離純化環(huán)狀DNA（質(zhì)粒DNA、線粒體DNA、葉綠體DNA和某些病毒DNA）的時(shí)候經(jīng)常需要去除其中的基因組DNA污染，否則會(huì)對后續(xù)的PCR、WGA和測序等反應(yīng)產(chǎn)生干擾。而基因組DNA一般都十分巨大，無論是線狀（如真核細(xì)菌基因組DNA）還是環(huán)狀(如細(xì)菌DNA)，經(jīng)過常規(guī)的DNA純化過程都會(huì)變成20-50 Kb大小的線狀DNA，而上述環(huán)狀DNA一般還能保持環(huán)狀構(gòu)型。根據(jù)這一特點(diǎn)，本公司開發(fā)了專門用于去除線狀DNA的本產(chǎn)品，它有如下優(yōu)點(diǎn)：
1．即開即用，不需用戶花費(fèi)大量時(shí)間去摸索各種條件。
2．酶法去除線性DNA，使線狀DNA污染降級幾個(gè)數(shù)量級，不會(huì)干擾后續(xù)試驗(yàn)。
3．柱式法純化回收環(huán)狀DNA，能快速高效清除殘留酶，得到的DNA可直接使用。
4．酶法處理不依賴于DNA序列，適于于任何線狀DNA。而內(nèi)切酶去除線狀DNA則需要預(yù)先確知其在環(huán)狀DNA上沒有酶切位點(diǎn)。
5．適用的環(huán)狀DNA包括質(zhì)粒DNA、線粒體DNA、葉綠體DNA、環(huán)狀病毒DNA等。
6．得到的環(huán)狀DNA可用于多種后續(xù)試驗(yàn)，尤其是WGA、PCR和測序等對污染敏感的試驗(yàn)。
RNA提取法：試劑中的主要成分為異硫氰酸胍和苯酚，其中異硫氰酸胍可裂解細(xì)胞，促使核蛋白體的解離，使RNA與蛋白質(zhì)分離，并將RNA釋放到溶液中。當(dāng)加入氯時(shí)，它可抽提酸性的苯酚，而酸性苯酚可促使RNA進(jìn)入水相，離心后可形成水相層和有機(jī)層，這樣RNA與仍留在有機(jī)相中的蛋白質(zhì)和DNA分離開。水相層(無色)主要為RNA，有機(jī)層(黃色)主要為DNA和蛋白質(zhì)。
實(shí)驗(yàn)步驟：
1、RNA的提取;
2、反轉(zhuǎn)錄合成cDNA;
3、PCR擴(kuò)增;
4、產(chǎn)物的電泳和結(jié)果的測定。
RT-PCR是將RNA的反轉(zhuǎn)錄(RT)和cDNA的聚合酶鏈?zhǔn)綌U(kuò)增(PCR)相結(jié)合的技術(shù)。首先經(jīng)反轉(zhuǎn)錄酶的作用從RNA合成 cDNA，再以cDNA為模板，擴(kuò)增合成目的片段。RT-PCR可以一步法或兩步法的形式進(jìn)行。在兩步法RT-PCR中，每一步都在zui條件下進(jìn)行。
堿變性提取質(zhì)粒DNA是基于染色體DNA與質(zhì)粒DNA的變性與復(fù)性的差異而達(dá)到分離目的。在pH高達(dá)12.6的堿性條件下，染色體DNA的氫鍵斷裂，雙螺旋結(jié)構(gòu)解開而變性。質(zhì)粒DNA的大部分氫鍵也斷裂，但超螺旋共價(jià)閉合環(huán)狀的兩條互補(bǔ)鏈不會(huì)*分離，當(dāng)以pH4.8的NaAc高鹽緩沖液去調(diào)節(jié)其pH至中性時(shí)，變性的質(zhì)粒DNA又恢復(fù)原來的構(gòu)型，保存在溶液中，而染色體DNA不能復(fù)性而形成纏連的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，通過離心，染色體DNA與不穩(wěn)定的大分子RNA、蛋白質(zhì)-SDS復(fù)合物等一起沉淀下來而被除去。
相關(guān)產(chǎn)品列表：
Hygromycin B Solution
IEF Anode Buffer,50X
IEF Cathode Buffer,10X
IEF Sample Buffer,2X,pH 3-10
IEF Sample Buffer，4X,pH 3-7
Imidazole Buffer（咪唑緩沖液）,0.5M,pH6.0
Imidazole Buffer（咪唑緩沖液）,0.5M,pH6.5
Imidazole Buffer（咪唑緩沖液）,0.5M,pH7.0
Imidazole Buffer（咪唑緩沖液）,0.5M,pH7.4
Imidazole Buffered Saline（咪唑緩沖鹽水）,5X,pH7.0