人漿細(xì)胞白血病細(xì)胞 NCI-H929 齊一生物科技(上海)有限公司是一家專業(yè)生產(chǎn)和銷售各種生化試劑,細(xì)胞株、原代細(xì)胞、菌種、醫(yī)藥中間體,標(biāo)準(zhǔn)品和對(duì)照品的大型化學(xué)科技公司.齊一生物科技(上海)有限公司:.Web:www.qiyibio。。com
人漿細(xì)胞白血病細(xì)胞 NCI-H929細(xì)胞培養(yǎng)方法
1、收到細(xì)胞,請(qǐng)查看瓶子是否有破裂,培養(yǎng)基是否漏出,是否渾濁,如有請(qǐng)盡快。
2、收到細(xì)胞,如包裝完好,請(qǐng)?jiān)陲@微鏡下觀察細(xì)胞。,由于運(yùn)輸過(guò)程中的問(wèn)題,細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的貼壁細(xì)胞有可能從瓶壁中脫落下來(lái),顯微鏡下觀察會(huì)出現(xiàn)細(xì)胞懸浮的情況,出現(xiàn)此狀態(tài)時(shí),請(qǐng)不要打開(kāi)細(xì)胞培養(yǎng)瓶,應(yīng)立即將培養(yǎng)瓶置于細(xì)胞培養(yǎng)箱里靜止3-5小時(shí)左右,讓細(xì)胞先穩(wěn)定下,再于顯微鏡下觀察,此時(shí)多數(shù)細(xì)胞會(huì)重新貼附于瓶壁。如細(xì)胞仍不能貼壁,請(qǐng)用臺(tái)盼藍(lán)染色法鑒定細(xì)胞活力,如臺(tái)盼藍(lán)染色證實(shí)細(xì)胞活力正常請(qǐng)按懸浮細(xì)胞的方法處理
3. 收到細(xì)胞時(shí)如無(wú)異常情況 ,請(qǐng)?jiān)陲@微鏡下觀察細(xì)胞密度,如為貼壁細(xì)胞,未超過(guò)80%匯合度時(shí),將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)基吸出,留下 5-10ML培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng):超過(guò)80%匯合度時(shí),請(qǐng)按細(xì)胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細(xì)胞,吸出培養(yǎng)液,1000轉(zhuǎn)/分鐘離心3分鐘,吸出上清,管底細(xì)胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細(xì)胞后移回培養(yǎng)瓶。
4,將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng),蓋子微微擰松。吸出的培養(yǎng)基可以保存在滅菌過(guò)的瓶子里,存放于4℃冰箱,以備不時(shí)之需。
5 、24小時(shí)后,細(xì)胞形態(tài)已恢復(fù)并貼滿瓶壁,就可以傳代了。(貼壁細(xì)胞)將培養(yǎng)瓶里的培養(yǎng)基倒去,加3-5ml(以能覆蓋細(xì)胞生長(zhǎng)面為準(zhǔn))PBS或Hanks’液洗滌后棄去。加0.5-1ml 0.25%含EDTA的胰酶消化,消化時(shí)間以具體細(xì)胞為準(zhǔn),一般1-3分鐘,不超過(guò)5分鐘。可以放入37℃培養(yǎng)箱消化。輕輕晃動(dòng)瓶壁,見(jiàn)細(xì)胞脫落下來(lái),加入3-5ml培養(yǎng)基終止消化。用移液管輕輕吹打瓶壁上的細(xì)胞,使之*脫落,然后將溶液吸入離心管內(nèi)離心,1000rpm/5min。棄上清,視細(xì)胞數(shù)量決定分瓶數(shù),一般一傳二,如細(xì)胞量多可一傳三,有些細(xì)胞不易傳得過(guò)稀,有些生長(zhǎng)較快的細(xì)胞則可以多傳幾瓶,以具體細(xì)胞和經(jīng)驗(yàn)為準(zhǔn)。(懸浮細(xì)胞)用移液管輕輕吹打瓶壁,直接將溶液吸入離心管離心即可。
6,貼壁細(xì)胞 ,懸浮細(xì)胞。嚴(yán)格無(wú)菌操作。換液時(shí),換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和換新鮮的培養(yǎng)液,37度 5%CO2 培養(yǎng)
7. 收到細(xì)胞后,請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞,用恰當(dāng)方式處理細(xì)胞。若懸浮的細(xì)胞較多,請(qǐng)離心收集細(xì)胞,接種到一個(gè)新的培養(yǎng)瓶中。棄掉原液,使用新鮮配制的培養(yǎng)基,使用進(jìn)口胎牛血清. 剛接到細(xì)胞,若細(xì)胞不多時(shí) 血清濃度可以加到15%去培養(yǎng)。若細(xì)胞迏到80%左右 ,血清濃度還是在10%。
培養(yǎng)基參考
500ml基礎(chǔ)培養(yǎng)基(含:必需與非必需氨基酸、維他命、有機(jī)與無(wú)機(jī)成分、激素、生長(zhǎng)因子與微量元素)、細(xì)胞生長(zhǎng)添加劑、抗生素/抗菌素溶液或青霉素/鏈霉素(P/S)溶液、FBS,適合在飽和濕度為5%CO2與95%空氣的培養(yǎng)箱中使用
NDSB-201
NDSB-201
NDSB-211
NDSB-211
ND221
ND221
n-Octyl-b-D-maltoside
n-Octyl-b-D-maltoside
Proteomics Protein Controls-for yeast基因組學(xué)標(biāo)準(zhǔn)蛋白
Proteomics Protein Controls -for animal proteins基因組學(xué)標(biāo)準(zhǔn)蛋白
EZ-Buffers M 1x BLOK BSA in PBS緩沖液
EZ-Buffers N 1x BLOK BSA in TBS緩沖液
EZ-Buffers O 5x BLOK Casein in PBS緩沖液
Proteomics Protein Controls -for E. coli Proteins基因組學(xué)標(biāo)準(zhǔn)蛋白
Proteomics Protein Controls -for plant cell proteins基因組學(xué)標(biāo)準(zhǔn)蛋白
Proteomics Protein Control Set基因組學(xué)標(biāo)準(zhǔn)蛋白
Mammalian Cell Total Protein Lysis Buffer動(dòng)物細(xì)胞蛋白裂解液
Yeast Total Protein Lysis Buffer酵母細(xì)胞蛋白裂解液
Bacterial Lysis Buffer細(xì)菌細(xì)胞蛋白裂解液
Inclusion body Solublization Buffer包涵體溶解液
RIPA Lysis Buffer IRIPA裂解液I
RIPA Lysis Buffer IIRIPA裂解液II
RIPA Lysis Buffer IIIRIPA裂解液III
RIPA Lysis Buffer IVRIPA裂解液IV
動(dòng)物細(xì)胞用蛋白酶抑制劑復(fù)合物I,100X
動(dòng)物細(xì)胞用蛋白酶抑制劑復(fù)合物II,10X
Plant Total Protein Lysis Buffer植物蛋白裂解液
Red Cell Lysis Buffer紅細(xì)胞裂解液
Nondenature Lysis Buffer非變性裂解液
Denature Lysis Buffer變性裂解液
White cell lysis buffer白細(xì)胞裂解液
磷酸酶抑制劑復(fù)合物 I 100X
磷酸酶抑制劑復(fù)合物 II 10X
10%AEBSF溶液
EZ-Buffers A 10XRunning buffer solution緩沖液
EZ-Buffers F (5x)Ponceau S staining solution緩沖液
EZ-Buffers G (5x)India ink staining solution緩沖液
5x一抗/二抗清除液
大鼠白介素3(IL-3)ELISA 試劑盒
大鼠白介素5(IL-5)ELISA 試劑盒
大鼠苗條素受體(LR/Ob-R)ELISA 試劑盒
大鼠瘦素(LEP)ELISA 試劑盒
大鼠白血病抑制因子(LIF)ELISA 試劑盒
大鼠L選擇素(L-Selectin/CD62L)ELISA 試劑盒
大鼠單核細(xì)胞趨化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)ELISA 試劑盒
大鼠單核細(xì)胞趨化蛋白2(MCP-2/CCL8)ELISA 試劑盒
大鼠單核細(xì)胞趨化蛋白3(MCP-3/CCL7)ELISA 試劑盒
大鼠巨噬細(xì)胞集落刺激因子(M-CSF)ELISA 試劑盒
大鼠巨噬細(xì)胞來(lái)源的趨化因子(MDC/CCL22)ELISA 試劑盒
大鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白2(MIP-2)ELISA 試劑盒
大鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白3β(MIP-3β/ELC/CCL19)ELISA 試劑盒
大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶1(MMP-1)ELISA 試劑盒
大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶10(MMP-10)ELISA 試劑盒
大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶13(MMP-13)ELISA 試劑盒
大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶2/明膠酶A(MMP-2/Gelatinase A)ELISA 試劑盒
大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶3(MMP-3)ELISA 試劑盒
大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶7(MMP-7)ELISA 試劑盒
大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶8/中性粒細(xì)胞膠原酶(MMP-8)ELISA 試劑盒
大鼠5核苷酸酶(5-NT)ELISA 試劑盒
大鼠骨保護(hù)素(OPG)ELISA 試劑盒
大鼠B因子(BF)ELISA 試劑盒
大鼠抑瘤素M(OSM)ELISA 試劑盒
大鼠胎盤(pán)生長(zhǎng)因子(PLGF)ELISA 試劑盒
大鼠正常T細(xì)胞表達(dá)和分泌因子(RANTES/CCL5)ELISA 試劑盒
大鼠L苯解氨酶(PAL)ELISA 試劑盒
大鼠可溶性CD30配體(sCD30L)ELISA 試劑盒
大鼠可溶性CD40配體(sCD40L)ELISA 試劑盒
大鼠干細(xì)胞因子受體(SCFR)ELISA 試劑盒
大鼠基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)ELISA 試劑盒
大鼠血管生成素受體Tie1(ANG-R-Tie1)ELISA 試劑盒
大鼠含免疫球蛋白樣環(huán)和上皮生長(zhǎng)因子樣域酪氨酸激酶2(Tie-2)ELISA 試劑盒
大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子2(TIMP-2)ELISA 試劑盒
大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子3(TIMP-3)ELISA 試劑盒
大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子4(TIMP-4)ELISA 試劑盒
大鼠腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅰ(TNFsR-Ⅰ)ELISA 試劑盒
大鼠腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅱ(TNFsR-Ⅱ)ELISA 試劑盒
大鼠腫瘤壞死因子β(TNF-β)ELISA 試劑盒
小鼠L選擇素(L-Selectin/CD62L)ELISA 試劑盒
大鼠腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體1(TRAIL-R1)ELISA 試劑盒
大鼠腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體3(TRAIL-R3)ELISA 試劑盒
大鼠腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體4(TRAIL-R4)ELISA 試劑盒
大鼠可溶性腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體(sTRAIL)ELISA 試劑盒
大鼠尿激酶型纖溶酶原激活物(uPA)ELISA 試劑盒
大鼠尿激酶型纖溶酶原激活物受體(PLAUR/uPAR)ELISA 試劑盒