合成培養(yǎng)基的主要成分有：氨基酸、碳水化合物、無(wú)機(jī)鹽、維生素及其它輔助物質(zhì)。

         氨基酸

　　氨基酸是組成蛋白質(zhì)的基本單位。不同種類(lèi)的細(xì)胞對(duì)氨基酸的要求各異，但有幾種氨基酸細(xì)胞自身不能合成，必須依靠培養(yǎng)液提供，這幾種氨 基酸稱(chēng)為必需氨基酸。其中*是細(xì)胞合成核酸和蛋白質(zhì)必需的氨基酸，在缺少*時(shí)，細(xì)胞生長(zhǎng)不良而死亡。因此，各種培養(yǎng)液中都有 較大量的*。但是，由于*在溶液中很不穩(wěn)定，應(yīng)置于-20℃冰箱中保存，在使用前加入培養(yǎng)液內(nèi)。已含*的培養(yǎng)液在  4℃冰 箱中儲(chǔ)存 2 周以上時(shí)，還應(yīng)重新加入原來(lái)量的*。

         碳水化合物

碳水化合物是細(xì)胞生長(zhǎng)主要能量來(lái)源，其中有的是合成蛋白質(zhì)和核酸的成分。主要有葡萄糖、核糖、脫氧核糖、丙酮酸鈉和醋酸等。

          無(wú)機(jī)鹽

　　培養(yǎng)液中無(wú)機(jī)鹽的主要功能是幫助細(xì)胞維持滲透壓平衡。此外，通過(guò)提供鈉，鉀和鈣離子，幫助細(xì)胞調(diào)節(jié)細(xì)胞膜功能。培養(yǎng)液的滲透壓是一個(gè) 非常重要的因素,  細(xì)胞通?？赡褪?260 mOsm/kg~320 mOsm/kg。標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)液的滲透壓在此范圍內(nèi)波動(dòng)。特別注意：向培養(yǎng)液中加入其它物質(zhì) 有可能會(huì)明顯改變培養(yǎng)液的滲透壓，特別是溶于強(qiáng)酸或強(qiáng)堿中的物質(zhì)。向培養(yǎng)液中添加 HEPES 時(shí)需按以下方法調(diào)節(jié)鈉離子濃度。

       緩沖系統(tǒng)

　　大多數(shù)細(xì)胞所需pH在 7.2-7.4。但是，細(xì)胞培養(yǎng)zui適pH值隨培養(yǎng)的細(xì)胞種類(lèi)不同而不同。成纖維細(xì)胞喜歡較高pH （7.4-7.7），而傳代轉(zhuǎn)化細(xì)胞 系則需要偏酸pH（7.0-7.4）。由于多數(shù)培養(yǎng)液靠*（NaHCO3）與CO2體系進(jìn)行緩沖，因此，氣相中的CO2濃度應(yīng)與培養(yǎng)液中*濃度相 平衡。如果氣相或培養(yǎng)箱空氣中CO2濃度設(shè)定在 5％，培養(yǎng)液中NaHCO3的加入量為 1.97  g/L；如果CO2濃度維持在 10％，培養(yǎng)液中NaHCO3的 加入量為 3.95 g/L。細(xì)胞培養(yǎng)瓶蓋不應(yīng)擰得太緊，以保證氣體交換。

        HEPES 是一種非離子緩沖液，在 pH  7.2-7.4  范圍內(nèi)具有較好的緩沖能力，但是非常昂貴，在高濃度時(shí)對(duì)一些細(xì)胞可能有毒。HEPES 緩沖液 可與低水平的碳酸鈉（0.34  g/L）共用，以抵消因額外加入 HEPES 引起的滲透壓增加。在這種培養(yǎng)條件下，細(xì)胞培養(yǎng)瓶的蓋子應(yīng)擰緊，以防止培 養(yǎng)液中所需的少量碳酸鹽散入空氣中。大多數(shù)培養(yǎng)液中含有酚紅作為 pH 指示劑，酸性培養(yǎng)液呈橙黃色，堿性培養(yǎng)液呈深紅色。

         維生素

         在細(xì)胞培養(yǎng)中，盡管血清是維生素重要來(lái)源， 但是許多培養(yǎng)基中添加了各種維生素以適合更多的細(xì)胞系生長(zhǎng)。

其它成分

           在一些較為復(fù)雜的培養(yǎng)液中還包括其它一些成分。如在雜交瘤技術(shù)中常用的DMEM培養(yǎng)液，使用時(shí)還需要補(bǔ)加丙酮酸鈉（2-Mercaptoethanol，2-Me）。2-Me對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)有很重要的作用。有人認(rèn)為它相當(dāng)于胎牛血清，有直接刺激細(xì)胞增殖作用。2-Me的活性部分 是硫氫基，其中一個(gè)重要作用是使血清中含硫的化合物還原成*，能誘導(dǎo)細(xì)胞的增殖，為非特異性的激活作用。同時(shí)避免過(guò)氧化物對(duì)培養(yǎng)細(xì) 胞的損害。另一個(gè)重要作用是促進(jìn)分裂原的反應(yīng)和DNA合成，增加植物凝集素（PHA）對(duì)淋巴細(xì)胞的轉(zhuǎn)化作用，已廣泛應(yīng)用于雜交瘤技術(shù)，另外，也 開(kāi)始用于一些難以培養(yǎng)的細(xì)胞。2-Me是一種小分子還原劑，極易氧化。分子量為  78.13，純的  2-Me是一種無(wú)色有刺激味的液體，比重為1.110-1.120（Do20），常用終濃度為 5×10-5M。常配制成 0.1M的儲(chǔ)存液，用時(shí)每升培養(yǎng)液加 0.5ml。