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當前位置:上海谷研實業(yè)有限公司>>PCR檢測試劑盒>>熒光-PCR法>> 犬細小病毒(CPV)核酸檢測試劑盒價格
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所 在 地上海市
更新時間:2024-01-03 11:16:28瀏覽次數(shù):4885次
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規(guī)格:48T/盒
類別:熒光-PCR法
運輸:低溫、避光、快遞免費送貨上門。
用途:生化實驗,合成實驗等試驗。
運輸及保存:低溫運輸,-20℃保存, 保存期限為 6 個月。
自備試劑:樣品 RNA。
性能指標:點擊了解更多熒光-PCR法。
.試劑盒檢測特異性為00%
2. 檢測試劑盒重現(xiàn)性為00%
3. 靈敏度可達到03/ml
4. 有效期為6個月
使用方法:
一、樣品 RNA 的制備
、用自選方法抽提病毒樣品 RNA。注意:可以選用本公司的一管式病毒 RNAout
2、或柱式病毒 RNAout。
二:RT(逆轉錄)反應合成 cDNA
. 按下表配制 RT 反應體系(20 μL 體系)
2. 70℃保溫 5 分鐘變性模板后立即冰浴。
3. 嚴格按順序加入 6μL RT Buffer(含 dNTP)和 2μL MMLV 逆轉錄酶(含 RI),
反應終體積為 20μL。
4. 42℃保溫 60 分鐘。此步為 RT 反應。
5. 70℃保溫 0 分鐘以終止反應,然后放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以直接作為 PCR 模板使用,丌需要純化。
注意事項:
①加入試劑的順序應*,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
反應五要素:
參加PCR反應的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 5-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至0kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.~umol或0~00pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。4,5-二氯噠-3(2H)-酮 瓶 C98 低溫運輸和保存
2-氟-5-基甲 瓶 Ca Ski [CaSki] 低溫運輸和保存
2-甲氧苯乙 瓶 Ca759 低溫運輸和保存
(R)-N-叔丁氧羰基-3-代丙氨酯 瓶 Ca76 低溫運輸和保存
2-氨基-4,6-二氯-S-三 瓶 Ca763 低溫運輸和保存
7-羥基豆素 瓶 Caco-2 低溫運輸和保存
2-氨苯并咪唑 瓶 CaEs-7 低溫運輸和保存
2-羥苯并噻唑 瓶 Caki- 低溫運輸和保存
6-基-2-啶甲 瓶 Calu- 低溫運輸和保存
,4-二乙炔苯 瓶 Calu-3 低溫運輸和保存
-丙醇 瓶 Calu-6 低溫運輸和保存
甲酯 瓶 CBRH-799 低溫運輸和保存
-基-5-硝基-2-羥基咪唑 瓶 CCC-Ca76-03 低溫運輸和保存
5-溴-2-氟苯甲 瓶 CCC-ESF- 低溫運輸和保存
4-苯基啶 瓶 CCC-HB-2 低溫運輸和保存
犬細小病毒(CPV)核酸檢測試劑盒價格Mouse D-Lactate Dehydrogenase,D-LDH 小鼠D-乳脫氫酶 進口/國產(chǎn)常溫,避光 規(guī)格:00mg
F+2 (Rabbit prothrombin fragment +2) 兔原片段F+2 進口/國產(chǎn)常溫,避光 規(guī)格:00mg
ADM (Rabbit soluble endothelial protein C receptor) 兔子腎上腺髓質(zhì)素 進口/國產(chǎn)常溫,避光 規(guī)格:30mg
D-LDH 大鼠D-乳脫氫酶 進口/國產(chǎn)常溫,避光 規(guī)格:30mg
VEGFR-2/sFLK-(soluble vascular endothelial growth factor receptor-2) 人可溶性血管內(nèi)皮生長因子受體2 進口/國產(chǎn)常溫,避光 規(guī)格:00mg
Pisum sativum agglutinin,PSA 豌豆凝集素 進口/國產(chǎn)常溫,避光 規(guī)格:50mg
Rat Progesterone receptor,PROGR 小鼠孕酮受體 進口/國產(chǎn)常溫,避光 規(guī)格:50mg
Dolichos bifows agglutinin,DBA 雙花扁豆凝集素 進口/國產(chǎn)常溫,避光 規(guī)格:50mg
TSLP(thymic stromal lymphopoietin) 人胸腺基質(zhì)淋巴細胞生成素 進口/國產(chǎn)常溫,避光 規(guī)格:00mg
TARC/CCL7 大鼠胸腺活化調(diào)節(jié)趨化因子 進口/國產(chǎn)常溫,避光 規(guī)格:50mg
sEPCR (Rabbit soluble endothelial protein C receptor) 兔子可溶性血管內(nèi)皮細胞蛋白C受體 進口/國產(chǎn)2-8℃,避光 規(guī)格:00mg
Mouse Insulin-like growth factor binding protein 6,IGFBP-6 小鼠胰島素樣生長因子結合蛋白6 進口/國產(chǎn)常溫,避光 規(guī)格:00mg
CH 大鼠 進口/國產(chǎn)常溫,避光 規(guī)格:50mg
Lp- Alpha (Rabbit lipoprotein Alpha) 兔脂蛋白α 進口/國產(chǎn)常溫,避光 規(guī)格:00mg
PF/PFP(Perforin/Pore-forming protein) 人穿孔素/成孔蛋白 進口/國產(chǎn)常溫,避光 規(guī)格:30mg
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