羊抗-FITC抗體*,羊抗-FITC抗體用于免疫組化實驗，WB實驗，相應(yīng)的標(biāo)記抗體有HRP標(biāo)記抗體，F(xiàn)ITC標(biāo)記，BIO等。

【貯存條件】： 貯存于-20℃. 本品應(yīng)在低溫下保存，長時間在暴露在空氣中，含量會有所降低。

規(guī)格：0.5ml/ml

材料和方法

　　. 材料 人成骨肉瘤MG63細胞為本實驗室保存。重組質(zhì)粒MycSSHL(WT)、MycSSHL(S937A S978A/2SA)以及recombinant cofilinHis6由王巖教授惠贈。脂質(zhì)體 2000( Invitrogen公司)。高糖DMEM培養(yǎng)基(美國Gibco 公司)，胎牛血清(Hyclone公司)，和EDTA(Sigma 公司)。A2387，KN93，CaM，重組Ca2+/CaMK Ⅱ(Rat Brain，Calbiochem)。抗體：Myc (9E0;Roche)，HA (3F0;Roche)，Pcofilin，Cofilin(Santa Cruz)， CaMKⅡδδ4 (Trans Genic Inc.)，PCaMKⅡα/β(Thr286/287;Upstate)。免疫共沉淀(Protein Gagarose)試劑盒(邁晨科技有限公司)。

　　.2 蛋白印跡實驗 MG63細胞鋪于35 mmol/L培養(yǎng)皿中，待細胞密度達到60%～70%時，轉(zhuǎn)染MycSSHL，48 h后換無血清培養(yǎng)基培養(yǎng)3 h，分別加入濃度為0.5，，2.5，5 μmol/L的A2387孵育0 min后裂解細胞，離心取上清加入凝膠加樣緩沖液,沸水浴上加熱5 min，上樣、電泳、轉(zhuǎn)膜、雜交〔一抗分別為Pcofilin、Cofilin、PCaMK Ⅱ δ及CaMK Ⅱ δ(4)〕、ECL顯色。

　　.3 體外激酶測定 MycSSHL(WT)及其突變體MycSSHL(2 SA)分別轉(zhuǎn)染至MG63細胞，48 h后采用免疫共沉淀(Protein Gagarose)試劑盒的方法及抗cmyc抗體，對照組為抗IgG抗體?；厥誐ycSSHL，加入0.6 μg/ml重組活性CaMKⅡ(單獨或同時加入抑制劑KN93)以及00 μmol/L ATP、5 μCi〔γ32P〕ATP 于 20 μl 激酶反應(yīng)緩沖液中，30℃反應(yīng)40 min。反應(yīng)產(chǎn)物進行SDSPAGE電泳、轉(zhuǎn)膜，應(yīng)用放射自顯影技術(shù)檢測32P 標(biāo)記的SSHL水平。

　　.4 體外SSHL磷酸酶活性測定實驗 MycSSHL(WT)或MycSSHL (2 SA)轉(zhuǎn)染至MG63細胞，48 h后，采用免疫共沉淀(Protein Gagarose)試劑盒的方法及抗cmyc抗體，對照組為抗IgG抗體?；厥誐ycSSHL，加入0.6 μg/ml CaMKⅡ(單獨或同時加入抑制劑KN93)，20 μg/ml CaM，以及 6.3 μg/ml cofilinHis6 于 20 μl 反應(yīng)緩沖液(50 mol/L HEPES，pH 7.4，0. mol/L CaCl2，0.5 mol/L EDTA，3 mol/L MgCl2，00 mmol/L NaCl， mol/L dithiothreitol，0.5 mg/ml BSA， μg/ml leupeptin),中30℃反應(yīng)2 h。反應(yīng)產(chǎn)物進行SDSPAGE電泳、轉(zhuǎn)膜、雜交(一抗分別為Pcofilin，Cofilin， cmyc 抗體)、ECL顯色。

本公司更多產(chǎn)品優(yōu)惠:

大鼠蛋白激酶BPKB抗體    75    鼠抗人CD8（細胞毒/抑制T）單克隆抗體    CD8        5-羥色胺受體3抗體
大鼠蛋白磷酸酶PP抗體     76    鼠抗人CD8單克隆抗體    CD8        5-羥色胺受體4抗體
大鼠的牛血清白蛋白殘留檢測抗體    77    鼠抗人CD8 T細胞單克隆抗體    CD8 T Cell       5-脂氧合酶抗體
大鼠低密度脂蛋白LDL抗體     78    鼠抗人CD9單克隆抗體    CD9       8-羥基脫氧鳥苷抗體
大鼠低密度脂蛋白免疫復(fù)合物L(fēng)DL-IC抗體    79    鼠抗人CD95單克隆抗體    CD95/FAS        腺苷A2A受體抗體
大鼠低氧誘導(dǎo)因子αHIF-α抗體    80    鼠抗人CD99單克隆抗體    CD99      α-抗胰抗體
大鼠抵抗素Resistin抗體    8    鼠抗人CD99尤文氏肉瘤標(biāo)記單克隆抗體    CD99       AP2關(guān)聯(lián)激酶抗體
大鼠第八因子相關(guān)抗原FⅧAg抗體    82    鼠抗人Cdk單克隆抗體    Cdk      丙氨酰tRNA合成酶2抗體
大鼠凋亡相關(guān)因子FAS/CD95抗體    83    鼠抗人Cdk/p34cdc2單克隆抗體    Cdk/p34cdc2        丙氨酰tRNA合成酶2抗體
大鼠凋亡相關(guān)因子配體FASL 抗體     84    鼠抗人Cdk2單克隆抗體    Cdk2       α-抗抗體