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大鼠腦膠質(zhì)瘤

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更新時(shí)間:2021-12-28 17:07:42瀏覽次數(shù):495次

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大鼠腦膠質(zhì)瘤培養(yǎng)細(xì)胞注意事項(xiàng):

實(shí)驗(yàn)進(jìn)行前,無(wú)菌室及無(wú)菌操作臺(tái)(laminarflow)以紫外燈照射30-60分鐘滅菌,以70%ethanol擦拭無(wú)菌操作抬面,并開(kāi)啟無(wú)菌操作臺(tái)風(fēng)扇運(yùn)轉(zhuǎn)0分鐘后,才開(kāi)始實(shí)驗(yàn)操作。每次操作只處理一株細(xì)胞株,且即使培養(yǎng)基相同亦不共享培養(yǎng)基,以避免失誤混淆或細(xì)胞間污染。實(shí)驗(yàn)完畢后,將實(shí)驗(yàn)物品帶出工作臺(tái),以70%ethanol擦拭無(wú)菌操作抬面。操作間隔應(yīng)讓無(wú)菌操作臺(tái)運(yùn)轉(zhuǎn)大鼠腦膠質(zhì)瘤無(wú)菌操作工作區(qū)域應(yīng)保持清潔及寬敞,必要物品,例如試管架、吸管吸取器或吸管盒等可以暫時(shí)放置,其它實(shí)驗(yàn)用品用完即應(yīng)移出,以利于氣流之流通。實(shí)驗(yàn)用品以70%ethanol擦拭后才帶入無(wú)菌操作臺(tái)內(nèi)。實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在抬面之無(wú)菌區(qū)域,勿在邊緣之非無(wú)菌區(qū)域操作。

小心取用無(wú)菌之實(shí)驗(yàn)物品,避免造成污染。勿碰觸吸管尖頭部或是容器瓶口,亦不要在打開(kāi)之容器正上方操作實(shí)驗(yàn)。容器打開(kāi)后,以手夾住瓶蓋并握住瓶身,傾斜約45°角取用,盡量勿將瓶蓋蓋口朝上放置桌面。

工作人員應(yīng)注意自身之安全,須穿戴實(shí)驗(yàn)衣及手套后才進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。對(duì)于來(lái)自人類或是病毒感染之細(xì)胞株應(yīng)特別小心操作,并選擇適當(dāng)?shù)燃?jí)之無(wú)菌操作臺(tái)(至少ClassⅡ)。操作過(guò)程中,應(yīng)避免引起aerosol之產(chǎn)生,小心毒性藥品,例如DMSOTPA等,并避免尖銳針頭之傷害等。

定期檢測(cè)下列項(xiàng)目:5.CO2鋼瓶之CO2壓力5.2CO2培養(yǎng)箱之CO2濃度、溫度、及水盤(pán)是否有污染(水盤(pán)的水用無(wú)菌水,每周更換)。5.3.無(wú)菌操作臺(tái)內(nèi)之airflow壓力,定期更換紫外線燈管及HEPA過(guò)濾膜,預(yù)濾網(wǎng)(300小時(shí)/預(yù)濾網(wǎng),3000小時(shí)/HEPA)。6.水槽可添加消毒劑(Zephrin:750),定期更換水槽的水

 粉末培養(yǎng)基配制好后(加了血清),一般在4度盡量不要超過(guò)個(gè)月,如在-20度存放時(shí)間可長(zhǎng)一些,但也不要超過(guò)3-4個(gè)月,可能對(duì)于永生化細(xì)胞株來(lái)說(shuō)要求不是太高,細(xì)胞嬌弱,放置時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)。

 開(kāi)紫外線照射臺(tái)的時(shí)候,就將培養(yǎng)基、酶、DHANKS液那到室外讓它自然升溫。這樣40分鐘后,溫度也升上來(lái)了。有很多人將他放到37度水浴鍋里加熱。一定要注意水浴鍋的衛(wèi)生,有的常年不清洗,里面很臟,容易在外面瓶身上吸附大量細(xì)菌。因此用它的也一定要勤換水。從水浴鍋拿出后,找個(gè)毛巾擦干上面的水。

細(xì)胞 停滯期Stagnate phase) 細(xì)胞數(shù)量達(dá)到飽和密度后,如不及時(shí)進(jìn)行傳代,細(xì)胞就會(huì)停止增殖,進(jìn)入停止期。此時(shí)細(xì)胞數(shù)持平,故也稱平臺(tái)期(Plateau phase)。停滯期細(xì)胞雖不增殖,但仍有代謝活動(dòng)。如不進(jìn)行分離傳代,細(xì)胞會(huì)因培養(yǎng)液中營(yíng)養(yǎng)耗盡、代謝產(chǎn)物積聚、pH 下降等因素中毒,出現(xiàn)形態(tài)改變,貼壁細(xì)胞會(huì)脫落,嚴(yán)重的會(huì)發(fā)生死亡,因此,應(yīng)及時(shí)傳代。
公司更多產(chǎn)品信息
曲霉素瓊脂基礎(chǔ)(AFPA) 50 用于曲霉菌分離培養(yǎng)
假單胞分離瓊脂 50 用于假單胞菌群的測(cè)定
Pseudomonas Isolation Agar
其它菌檢測(cè)培養(yǎng)基
假單胞分離肉湯 50 用于假單胞菌群增菌培養(yǎng)
Pseudomonas Isolation Broth
肌醇測(cè)定培養(yǎng)基 50 用于嬰幼兒配方食品和乳粉中肌醇測(cè)定
Inositol Assay Broth
溴甲酚紫葡萄糖肉湯 50 用于低酸性罐頭食品商業(yè)無(wú)菌檢驗(yàn)(GB標(biāo)準(zhǔn))
Bromcresol Purple Dextrose Broth
酸性肉湯 50 用于酸性缺罐頭食品商業(yè)無(wú)菌檢驗(yàn)(GB標(biāo)準(zhǔn))
Acid Broth
測(cè)定培養(yǎng)基 50 用于嬰兒食品和乳粉中和測(cè)定
Vitamin PP Assay Broth
測(cè)定培養(yǎng)基 50 用于嬰兒食品和乳粉中測(cè)定
多聚右旋賴氨suan",多聚-D-賴氨suan",聚-D-賴氨suan"氫溴suan"鹽,多聚賴氨suan"氫溴suan"鹽,Poly-D-lysine hydrobromide
L-甲硫氨suan",L-蛋氨suan",L-甲硫基丁氨suan",L--氨suan"-4-甲硫基丁suan",L-Methionine
D-甲硫氨suan",D-蛋氨suan",D--氨基-4-甲硫基丁suan",D-甲硫基丁氨suan",D-Methionine
DL-甲硫氨suan",DL-蛋氨suan",DL--氨基-4-甲硫基丁suan",DL-Methionine
L-ben"丙氨suan", L-α- 氨基-β-ben"丙suan",L--氨基-3-ben"基丙suan",L-α-氨基氫化肉

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