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所 在 地上海市
更新時間:2021-12-28 17:07:42瀏覽次數(shù):351次
聯(lián)系我時,請告知來自 環(huán)保在線hFOB .9(SV40 轉(zhuǎn)染成骨細(xì)胞)具體操作
取出凍存管: 根據(jù)細(xì)胞凍存記錄按標(biāo)簽找到所需細(xì)胞的編號。
從液氮罐中取出細(xì)胞盒,取出所需的細(xì)胞,同時核對管外的編號。
初學(xué)者易犯錯誤:水浴鍋未預(yù)熱或者未預(yù)熱到37℃。
水浴鍋內(nèi)凍存管太多,導(dǎo)致傳熱不佳,使融化時間延長。
離心前忘記平衡,導(dǎo)致離心機(jī)損壞和細(xì)胞丟失。
一次復(fù)蘇細(xì)胞過多,忘記更換吸頭和吸管,導(dǎo)致細(xì)胞交叉污染。
實驗前準(zhǔn)備:將水浴鍋預(yù)熱至37℃
hFOB .9(SV40 轉(zhuǎn)染成骨細(xì)胞)用75%酒精擦拭紫外線照射30min的超凈工作臺臺面。
在超凈工作臺中按次序擺放好消過毒的離心管、吸管、培養(yǎng)瓶 等。
迅速解凍:
迅速將凍存管投入到已經(jīng)預(yù)熱的水浴鍋中迅速解凍,并要不斷的搖動,使管中的液體迅速融化。
.約-2min后
凍存管內(nèi)液體*溶解,取出用酒精棉球擦拭凍存管的外壁,再拿入超凈臺內(nèi)。
平衡離心:用架盤天平平衡后,放入離心機(jī)中3000r/min 離心3min
制備細(xì)胞懸液:吸棄上清液。
向離心管內(nèi)加入0ml培養(yǎng)液,吹打制成細(xì)胞懸液。
活化與細(xì)胞復(fù)蘇 收到細(xì)胞株包裹時, 請檢查細(xì)胞株冷凍管是否有解凍情形, 若有請立即通知。細(xì)胞株請盡速開始培養(yǎng), 或立即冷凍保存(置于–70 °C, 隔夜后, 移到liq N2)。
細(xì)胞復(fù)蘇的原則-快速融化:必須將凍存在-96℃液氮中的細(xì)胞快速融化至37℃,使細(xì)胞外凍存時的冰晶迅速融化,避免冰晶緩慢融化時進(jìn)入細(xì)胞形成再結(jié)晶,對細(xì)胞造成損害。
細(xì)胞計數(shù):細(xì)胞濃度以5×05/ml為宜。
培養(yǎng)細(xì)胞將復(fù)合細(xì)胞計數(shù)要求的細(xì)胞懸液分裝入培養(yǎng)瓶內(nèi),將培養(yǎng)瓶放入37℃和5%CO2的培養(yǎng)箱內(nèi)2-4小時(或者24-48小時)后換液繼續(xù)培養(yǎng)培養(yǎng),換液的時間由細(xì)胞情況而定。
公司其他銷量大產(chǎn)品信息:003 硝酸鹽還原試劑 0ml×4 支/盒 用于硝酸鹽還原試驗
03 酪蛋白胨瓊脂 50g/瓶 用于酪蛋白分解試驗
0604 緩沖葡萄糖蛋白胨水 ml×0 支/盒 用于MR 和VP 試驗
0605 甲基紅試劑 0ml× 支/盒 用于MR 試驗
053 V‐P 試劑 0ml×4 支/盒 用于VP 試驗
0803 豆粉瓊脂 50g/瓶 用于配制血瓊脂平板
5070 無菌裂解脫纖維綿羊血 50ml/瓶
0706 3% ml×0 支/盒 用于過氧化氫酶試驗
00 革蘭氏染色液 0ml×4 支/盒 用于細(xì)菌的革蘭氏染色
04 木糖‐明膠培養(yǎng)基 50g/瓶 用于明膠液化試驗
0 木糖‐明膠培養(yǎng)基 ml×0 支/盒 用于明膠液化試驗
0403 西蒙氏檸檬酸鹽瓊脂斜面 5ml×0 支/盒 用于細(xì)菌檸檬酸鹽利用試驗
03 葡萄糖發(fā)酵管 ml×0 支/盒
03 發(fā)酵管 ml×0 支/盒
0303 無菌液體石蠟 ml×0 支/盒
0 馬鈴薯‐葡萄糖‐瓊脂培養(yǎng)基(含) 50g/瓶 霉菌和酵母菌計數(shù)
0 孟加拉紅培養(yǎng)基 50g/瓶 霉菌和酵母菌計數(shù)
30 孟加拉紅培養(yǎng)基平板 90mm×0 個/包 霉菌和酵母菌計數(shù)
GB/T 4789.6—003 常見產(chǎn)毒霉菌的鑒定
03 察氏培養(yǎng)基 50g/瓶 青霉和曲霉的分離鑒別
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