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兔肺成纖維細(xì)胞

參  考  價:1 - 3600 /瓶
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更新時間:2025-03-21 14:12:20瀏覽次數(shù):533次

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同類優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品更多>
貨號 GOY-01X0718 組織來源 肺組織
生長特性 貼壁 規(guī)格 5×105
用途 僅供科研實驗
兔肺成纖維細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H292-LUC-EGFP人肺癌細(xì)胞大鼠原代腸道干細(xì)胞人原代胰腺成纖維細(xì)胞小鼠原代卵泡膜細(xì)胞大鼠原代腎集合管上皮細(xì)胞小鼠原代胰腺腺泡細(xì)胞山羊原代卵巢顆粒細(xì)胞小鼠原代脊髓神經(jīng)元細(xì)胞小鼠原代結(jié)腸成纖維細(xì)胞人原代食管成纖維細(xì)胞

兔肺成纖維細(xì)胞

兔肺成纖維細(xì)胞

規(guī)格

5×10?

貨號

GOY-01X0718

包裝

T25培養(yǎng)瓶

分類

兔原代細(xì)胞

生長特性

貼壁

組織來源

肺組織


兔肺成纖維細(xì)胞

培養(yǎng)基 FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣

傳代特性 可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)

消化液 0.25%yi蛋白酶

培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%


兔肺成纖維細(xì)胞

兔肺成纖維細(xì)胞

兔肺成纖維分離自肺組織;肺是機體的呼吸器官,位于胸腔,左右各一,覆蓋于心之上。肺有分葉,左二右三,共五葉。肺經(jīng)肺系(指氣管、支氣管等)與喉、鼻相連,故稱喉為肺之門戶,鼻為肺之外竅。成纖維細(xì)胞(Fibroblast)是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分,由胚胎時期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來;成纖維細(xì)胞較大,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu),其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形,核仁大而明顯。成纖維細(xì)胞功能活動旺盛,細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性,具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動,在一定條件下,它可以實現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化;成纖維細(xì)胞對不同程度的細(xì)胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的肺成纖維細(xì)胞呈圓形、折光性良好,懸浮于培養(yǎng)基中。30min細(xì)胞貼壁,其中部分開始伸出偽足,表現(xiàn)為小的突起;6h后細(xì)胞基本貼壁wan全,伸展成梭形,胞核清晰,分布較均勻,散在生長,不聚集成團;細(xì)胞生長迅速,5-7天即呈融合狀態(tài),細(xì)胞排列緊密,有的交叉重疊生長,平坦、胞體較大,細(xì)胞質(zhì)透明,細(xì)胞核較大,呈橢圓形,顏色淡。細(xì)胞融合,并彼此連接成網(wǎng)狀;細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。肺成纖維細(xì)胞在生理條件下的主要功能包括:構(gòu)造和維持肺器官的正常形態(tài),合成和釋放細(xì)胞外基質(zhì)以及組織損傷后及時大量聚集修復(fù)損傷組織。
方法簡介:

公司實驗室分離的兔肺成纖維采用yi蛋白酶-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:

公司實驗室分離的兔肺成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

 

兔肺成纖維細(xì)胞

一、細(xì)胞培養(yǎng)

1取材 在無菌環(huán)境下從機體取出某種組織細(xì)胞(視實驗?zāi)康亩ǎ?,?jīng)過一定的處理(如消化分散細(xì)胞、分離等)后接入培養(yǎng)器血中,這一過程稱為取材。如是細(xì)胞株的擴大培養(yǎng)則無取材這一過程。機體取出的組織細(xì)胞的培養(yǎng)稱為原代培養(yǎng)。2培養(yǎng) 將取得的組織細(xì)胞接入培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)板中的過程稱為培養(yǎng)。3凍存及復(fù)蘇(可參閱后面有關(guān)章節(jié))為了保存細(xì)胞,特別是不易獲得的突變型細(xì)胞或細(xì)胞株,要將細(xì)胞凍存。凍存的溫度一般用液氮的溫度-196℃,將細(xì)胞收集至凍存管中加入含保護(hù)劑(一般為二甲亞砜或甘油)的培養(yǎng)基,以一定的冷卻速度凍存,最終保存于液氮中。在極低的溫度下,細(xì)胞保存的時間幾乎是無限的。復(fù)蘇一般采用快融方法,即從液氮中取出凍存管后,立即放入37℃水中,使之在一分鐘內(nèi)迅速融解。然后將細(xì)胞轉(zhuǎn)入培養(yǎng)器皿中進(jìn)行培養(yǎng)。

二、原代細(xì)胞分離

凡是來源于胚胎、組織器官及外周血,經(jīng)特殊分離方法制備而來的原初培養(yǎng)的細(xì)胞稱之為原代細(xì)胞。1懸浮細(xì)胞的分離方法組織材料若來自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料,的方法是采用1000r/min的低速離心10分鐘。經(jīng)離心后由于各種細(xì)胞的比重不同可在分層液中形成不同層,這樣可根據(jù)需要收獲目的細(xì)胞。2實體組織材料的分離方法對于實體組織材料,由于細(xì)胞間結(jié)合緊密,為了使組織中的細(xì)胞充分分散,形成細(xì)胞懸液,可采用機械分散法(物理裂解)和消化分離法。

三、細(xì)胞增殖檢測技術(shù)

目前主要有兩種用于檢測細(xì)胞增殖能力的方法。一種是直接的方法,通過直接測定進(jìn)行分裂

的細(xì)胞數(shù)來評價細(xì)胞的增殖能力。另一種是間接的方法,即細(xì)胞活力(cell viability)檢測方法,通過檢測樣品中健康細(xì)胞的數(shù)目來評價細(xì)胞的增殖能力。顯然,細(xì)胞活力檢測法并不能最終證明檢測樣品中的細(xì)胞是否在增殖。如細(xì)胞在某一培養(yǎng)條件下會自發(fā)啟動凋亡程序,但藥物的干擾可抑制凋亡的發(fā)生;這時若采用細(xì)胞活力檢測法,顯然可以區(qū)分兩種條件下的細(xì)胞數(shù)量,但我們并不能從藥物干擾組細(xì)胞數(shù)大于對照組的事實說明藥物可促進(jìn)細(xì)胞增殖的結(jié)論。所以最直接的證據(jù)應(yīng)該采用方法一。

兔肺成纖維細(xì)胞

兔肺成纖維細(xì)胞

取材:首先,用培養(yǎng)液濕潤所取的組織材料,并用鋒利的眼科剪去除附在其上的脂肪和結(jié)締組織。接著用平衡液(如PBS或Hanks液)漂洗,再用眼科彎剪將組織塊剪成小塊。多次用PBS或Hanks液漂洗,直到液體清亮、無油滴為止。

接種:用濕潤的吸管吸取切碎的組織塊,輕輕吹到培養(yǎng)瓶皿中,并按一定間距均勻放在培養(yǎng)瓶底壁上。注意不要過多,確保組織塊切面貼在培養(yǎng)瓶底壁上。

培養(yǎng):將培養(yǎng)瓶翻轉(zhuǎn),使瓶底朝上,在種植了組織塊一側(cè)的對側(cè)面加足培養(yǎng)液,避免組織塊與培養(yǎng)液接觸,然后塞緊瓶塞。將種植了組織塊的一側(cè)朝上,靜置于37℃培養(yǎng)箱中。待組織塊貼壁1到3小時后翻瓶,使貼壁的組織塊浸沒在培養(yǎng)液中,繼續(xù)靜置。換液:每隔2到3天更換一次培養(yǎng)液,或者根據(jù)培養(yǎng)瓶種顏色的變化確定換液時間。

一、原代細(xì)胞計數(shù)

將血球計數(shù)板及蓋片用擦試干凈,并將蓋片蓋在計數(shù)板上。

將細(xì)胞懸液吸出少許,滴加在蓋片邊緣,使懸液充滿蓋片和計數(shù)板之間。

靜置3分鐘。

鏡下觀察,計算計數(shù)板四大格細(xì)胞總數(shù),壓線細(xì)胞只計左側(cè)和上方的。然后按下式計算:

細(xì)胞數(shù)/ml=4大格細(xì)胞總數(shù)/ 4×10000

注意:鏡下偶見由兩個以上細(xì)胞組成的細(xì)胞團,應(yīng)按單個細(xì)胞計算,若細(xì)胞團占10%以上,說明分散不好,需重新制備細(xì)胞懸液。

二、原代細(xì)胞活力

將細(xì)胞懸液以0.5ml加入試管中。

加入0.5ml 0.4%臺盼蘭染液,染色2一3分鐘。

吸取少許懸液涂于載玻片上,加上蓋片。

鏡下取幾個任意視野分別計死細(xì)胞和活細(xì)胞數(shù),計細(xì)胞活力。

死細(xì)胞能被臺盼蘭染上色,鏡下可見深蘭色的細(xì)胞,活細(xì)胞不被染色,鏡下呈無色透明狀。

活力測定可以和細(xì)胞計數(shù)合起來進(jìn)行,但要考慮到染液對原細(xì)胞懸液的加倍稀釋作用。

兔肺成纖維細(xì)胞


小鼠前胃癌細(xì)胞MFC(種屬鑒定)

血管內(nèi)皮細(xì)胞ECV-304(STR鑒定正確)

大鼠滑膜成纖維細(xì)胞

溶血磷脂酰乙醇胺

低轉(zhuǎn)移人肝癌細(xì)胞MHCC97-L(STR鑒定正確)

溶血磷脂酰

人肺腺鱗癌細(xì)胞NCI-H596(STR鑒定正確)

山崳甲酯

人肝癌細(xì)胞帶綠色熒光 SMMC7721/GFP(STR鑒定正確)

二十碳烯甲酯

人胃癌耐藥株 AGS/DDP(STR鑒定正確)

芥甲酯

人視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤WERI-Rb-1(STR鑒定正確)

12-羥基硬脂甲酯

小鼠肉瘤細(xì)胞;CCRFS-180

12-氧硬脂甲酯

小鼠胚胎成纖維細(xì)胞紅色熒光NIH/3T3/RFP

鞘磷脂

小鼠胚胎成纖維細(xì)胞3T3-Swiss albino(種屬鑒定)

三丙二醇

小鼠乳腺癌細(xì)胞帶熒光 4T1+LUC(種屬鑒定)

一縮二丙二醇

人胃腺癌細(xì)胞AGS(STR鑒定正確)

N-乙烯-2-吡咯烷酮

大鼠胰腺外分泌腺腫瘤細(xì)胞AR42J(種屬鑒定)

兔肺成纖維細(xì)胞三棕櫚甘油酯(甘油三酯)

小鼠黑色瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)染OVA B16+OVA(種屬鑒定)

大豆磷酰

TRANSWELL-96系統(tǒng) 8.0uM孔徑,PET(聚酯)膜,TC表面,接受盤,帶蓋,袋裝

2-氨基-5-氯二苯酮(氯氮雜質(zhì)I)

 


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