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螺旋平板法-接種方法

時間:2014-3-13閱讀:287
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1 一般要求

使用螺旋接種儀將樣品接種在平板上。樣品接種后,菌落即分布在螺旋軌跡上,隨半徑的增加分布得越來越稀。采用特殊的計數(shù)柵格,自平板外周向*對平皿上的菌落進行計數(shù),即可得到樣品中微生物的數(shù)量。

 

2 實驗步驟

取制備好的適宜稀釋度的樣品稀釋液,以選定的模式接種于實驗所用平板,每個稀釋度接種兩塊平板,接種每一個樣品前后均按儀器設(shè)定程序?qū)β菪臃N儀進行清洗消毒。

按相同接種模式接種懸浮液作為空白對照。

將平板按標準方法中規(guī)定的培養(yǎng)時間和溫度進行培養(yǎng)后,計數(shù)每個平板菌落數(shù),并記錄下來。

 

3 菌落總數(shù)的計算和記錄

平板上菌落數(shù)符合菌落計數(shù)儀規(guī)定計數(shù)范圍的為合適范圍。如果兩個稀釋度的四個平板菌落數(shù)均在合適范圍內(nèi),則將四個平板菌落數(shù)的平均值作為每克(毫升)樣品中的菌落數(shù);如果只有一個稀釋度的兩個平板菌落數(shù)在合適范圍內(nèi),則將這兩個平板菌落數(shù)的平均值作為每克(毫升)樣品中的菌落數(shù)。

當?shù)拖♂尪鹊膬蓚€平板菌落數(shù)都少于合適范圍的下*,計算這一稀釋度兩個平板菌落數(shù)的平均值作為每克(毫升)樣品中的菌落數(shù)。給這個數(shù)注上星號(*),表明該數(shù)是從菌落數(shù)在計數(shù)范圍之外的平板估計所得。當所有平板上的菌落數(shù)都超過合適范圍的上*,計算高稀釋度兩個平板菌落數(shù)的平均值作為每克(毫升)樣品中的菌落數(shù),給這個數(shù)注上星號(*)。如果所有稀釋度的平板都沒有菌落,則以小于1乘以稀釋倍數(shù)和接種體積作為每克(毫升)樣品中的菌落數(shù),給這個數(shù)注上星號(*)。

記錄時,只有在換算到每克(毫升)樣品中的菌落數(shù)時,才能定下兩位有效數(shù)字,第三位數(shù)字采用四舍五入的方法記錄。也可將樣品的菌落數(shù)記錄為10的指數(shù)形式。

 

4 結(jié)果的表述

根據(jù)F.3歸檔計算出每克(毫升)樣品的菌落數(shù),固體樣品以CFU/g為單位,液體樣品以CFU/mL為單位。

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