原理
以醋酸纖維薄膜為支撐物，浸入pH8.6的緩沖液后吸去多余液體。將微量血清點(diǎn)于膜上，電泳后，將薄膜置染色液中使蛋白質(zhì)固定并染色，洗去多余染料。
操作
1. 準(zhǔn)備與點(diǎn)樣
（1）將薄膜切成2.5×8 cm 的小片。在薄膜無光澤面（正面）的一端約2 cm 處用鉛筆劃一線，以標(biāo)明點(diǎn)樣位置。
（2）將薄膜無光澤面向下，漂浮于*緩沖液面上（緩沖液盛于培養(yǎng)皿中），使膜條自然浸濕下沉。
（3）將充分浸透（膜上沒有白色斑痕）的膜條取出，用濾紙吸去多余的緩沖液，把膜條兩端各貼于兩塊玻片上使點(diǎn)樣線架空。
（4）用血色素吸管吸取新鮮血清3~5 ul，涂于載玻片末端處，或用載玻片在血清上蘸一下，使載玻片下端粘上一薄層血清，然后緊按在薄膜點(diǎn)樣線上，待血清全部透入膜內(nèi)，移開載玻片。
2. 電泳
將點(diǎn)樣后的膜條置于電泳槽架上，放置時(shí)，無光澤面（即點(diǎn)樣面）向下，點(diǎn)樣端置于陰極槽架上以四層濾紙作橋墊，膜條與濾紙需貼緊，待平衡5分鐘后通電，電壓為110 V，電流為0.4~0.6 mA/cm，通電1小時(shí)左右關(guān)閉電源。
3. 染色
通電完畢后用鑷子將薄膜取出，直接浸于盛有氨基黑10B的染色液中，染5分鐘取出，立即浸入盛有漂洗液的培養(yǎng)皿中，反復(fù)漂洗數(shù)次，直至背景漂凈為止。用濾紙吸干薄膜。
4. 定量
本實(shí)驗(yàn)不要求進(jìn)行定量分析，如有需要，可采用薄層掃描儀進(jìn)行掃描定量，或采用洗脫后再進(jìn)行比色的方法進(jìn)行定量。
5. 計(jì)算
光密度總和T=A+α1+α2+β+γ
各部分蛋白質(zhì)的百分?jǐn)?shù)為：
臨床意義
1. 正常值：白蛋白57~72%，α1球蛋白2~5%，α2球蛋白4~9%，β球蛋白6.5~12%，γ球蛋白12~20%。
2. 肝硬化時(shí)白蛋白顯著降低，γ球蛋白升高2~3倍；腎病綜合癥時(shí)白蛋白降低，α2和β球蛋白升高。
試劑與器材
1. 電泳儀：包括直流電源整流器和電泳槽兩個(gè)部分，電泳槽用有機(jī)玻璃或塑料等制成。它有兩個(gè)電極，用白金絲制成。
2. *緩沖液，pH8.6，離子強(qiáng)度0.06
*鈉12.76 g，*1.66g于蒸餾水中加熱溶解后再加水至1000ml。
3. 氨基黑10B染色液
氨基黑10B0.5 g，甲醇50 ml，冰醋酸10 ml，蒸餾水40 ml。
4. 漂洗液配法
95%乙醇45 ml，冰醋酸5 ml，蒸餾水50 ml 混勻。
注意事項(xiàng)
1. 醋酸纖維薄膜電泳分析血清蛋白的正常結(jié)果不同于紙上電泳，主要是白蛋白偏高，個(gè)別正常人白蛋白僅超過70%。α1，α2，和β，γ都偏低，個(gè)別正常人γ球蛋白可低到12%左右。上述正常值僅供參考。
2. 經(jīng)電泳，染色之干燥膜浸于冰醋酸：95%乙醇（2∶8）溶液中20分鐘，取出后將薄膜平貼于玻璃板上。干燥過程中，薄膜漸變透明。此透明薄膜可用掃描光密度計(jì)繪出電泳曲線，并可根據(jù)曲線的面積計(jì)算各組分的百分?jǐn)?shù)。目前國內(nèi)已有自動定量的光密度計(jì)生產(chǎn)。此透明薄膜可長期保存，供教學(xué)示教用。
附：遷移率是膠體顆粒的一個(gè)物理常數(shù)，可用來鑒定蛋白質(zhì)等物質(zhì)以及研究它們的某些理化性質(zhì)?，F(xiàn)將人血漿蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)，遷移率等列于下表，供分析參考。
