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Caspase細(xì)胞凋亡檢測試劑盒

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產(chǎn)品簡介

細(xì)胞凋亡是細(xì)胞的基本特征之一，在機(jī)體的胚胎發(fā)育、組織修復(fù)、內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定等方面都起到十分重要的作用。

詳細(xì)介紹

細(xì)胞凋亡是細(xì)胞的基本特征之一，在機(jī)體的胚胎發(fā)育、組織修復(fù)、內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定等方面都起到十分重要的作用。

Annexin V是一種分子量為35.8KD的Ca2+依賴性磷脂結(jié)合蛋白，能與細(xì)胞凋亡過程中翻轉(zhuǎn)到膜外的磷脂酰*（Phosphatidylserine, PS）高親和力特異結(jié)合。標(biāo)記熒光物質(zhì)的Annexin V結(jié)合到凋亡細(xì)胞后，通過熒光顏色可以區(qū)分出凋亡細(xì)胞與正常細(xì)胞。

Caspase家族在介導(dǎo)細(xì)胞凋亡的過程中起著非常重要的作用，其中caspase-3為關(guān)鍵的執(zhí)行分子，與DNA斷裂、染色質(zhì)凝聚和凋亡小體形成有關(guān)。Caspase-3在正常狀態(tài)下以酶原的形式存在于胞漿中，沒有活性；但在細(xì)胞發(fā)生凋亡階段，它被激活，活化的Caspase-3由兩個(gè)大亞基和兩個(gè)小亞基組成，裂解相應(yīng)的胞漿胞核底物，zui終導(dǎo)致細(xì)胞凋亡。Caspase-3熒光光度法檢測試劑盒就是根據(jù)這一特點(diǎn)，設(shè)計(jì)出熒光物質(zhì)偶聯(lián)的短肽（Ac-DEVD）2-R110，其中DEVD是一個(gè)四肽化合物，在共價(jià)偶聯(lián)時(shí)，R110不能被激發(fā)熒光，在連續(xù)兩個(gè)反應(yīng)步驟后，短肽被*水解后釋放出R110。水解的*步產(chǎn)生一個(gè)單肽中間體Ac-DEVD-R110，此物與吸收和發(fā)射波長與R110 （?_ex\?_em= 496/520 nm）相似，但是只有R110激發(fā)熒光的10％。水解的第二步釋放的自由的R110才能被激發(fā)發(fā)射熒光。根據(jù)釋放的R110熒光強(qiáng)度的大小，可以測定caspase-3的活性，從而反映Caspase-3被活化的程度。試劑盒中的Ac-DEVD-CHO, 是caspase-3的抑制劑，作為整個(gè)反應(yīng)的負(fù)調(diào)控物。試劑盒中的 R110 用來做標(biāo)準(zhǔn)曲線，用來定量caspase-3的活力。

CD95/Fas和TNF引發(fā)細(xì)胞凋亡過程中，一系列caspase級聯(lián)式地活化，其中caspase-8的活化是其*步反應(yīng)?？焖贆z測哺乳動(dòng)物細(xì)胞或者組織裂解液中caspase-8活性，常用的辦法將caspase-8序列特異性的多肽偶聯(lián)至發(fā)色基團(tuán)（Ac-IETD）₂-R110，當(dāng)該底物被caspase-8剪切后，R110即游離出來?？梢詼y定熒光的發(fā)射強(qiáng)度，也可通過酶標(biāo)儀或分光光度計(jì)（λ=405nm 或400nm）測定其吸光值，來考察caspase-8的活化程度。試劑盒中也有Ac-IETD-CHO，R110，Cell lysis buffer，Assay buffer。

貨號30008-2試劑盒內(nèi)容物：

100ml,Cell Lysis Buffer
4*1.25ml Assay Buffer
500ul 酶底物（Ac-DEVD）2-R110（1mM）
20ul 酶抑制劑Ac-DEVD-CHO（5mM）
1ml R110（80uM）

產(chǎn)品列表：

貨號	產(chǎn)品名稱	規(guī)格
30008-2	Caspase-3 DEVD-R110 Fluorometric & Colorimetric Assay Kit	100 次
30008-1	Caspase-3 DEVD-R110 Fluorometric & Colorimetric Assay Kit	25次
30009-1	Caspase-3 DEVD-R110 Fluorometric HTS Assay Kit	1 mL
30009-2	Caspase-3 DEVD-R110 Fluorometric HTS Assay Kit	10 mL
30009-3	Caspase-3 DEVD-R110 Fluorometric HTS Assay Kit	100 mL
30011-2	Caspase-8 IETD-R110 Fluorometric and Colorimetric Assay Kit	100次
30011-2	Caspase-8 IETD-R110 Fluorometric and Colorimetric Assay Kit	100 次
30011-1	Caspase-8 IETD-R110 Fluorometric and Colorimetric Assay Kit	25次
30012-2	Caspase-8 IETD-R110 Fluorometric HTS Assay Kit	10 mL
30012-3	Caspase-8 IETD-R110 Fluorometric HTS Assay Kit	100 mL
30014-1	Caspase-9 LEHD-R110 Fluorometric and Colorimetric Assay Kit	25次
30014-2	Caspase-9 LEHD-R110 Fluorometric and Colorimetric Assay Kit	100次
30015-1	Caspase-9 LEHD-R110 Fluorometric HTS Assay Kit	1 mL
30015-2	Caspase-9 LEHD-R110 Fluorometric HTS Assay Kit	10 mL
30015-3	Caspase-9 LEHD-R110 Fluorometric HTS Assay Kit	100 mL