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上海金穗生物科技有限公司

光鏡免疫金銀組織化學(xué)原理

時(shí)間：2012-10-13閱讀：718
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  免疫金銀染色（immunogold silver staining；IGSS）的基本原理是通過(guò)免疫反應(yīng)沉積在抗原位置的膠體金顆粒起著一種催化劑作用，用對(duì)苯二酚還原劑將銀離子（Ag+）還原成銀原子（Ag），被還原的銀原子圍繞金顆粒形成一個(gè)“銀殼”，“銀殼”一旦形成本身亦具有催化作用，從而使更多銀離子還原并促使“銀殼”越長(zhǎng)越大，zui終使抗原位置得到清楚放大。

 
用銀增敏示意圖
 
    該方法只有在抗原存在的情況下，才有金顆粒并促使銀殼的形成。沒(méi)有抗原區(qū)域就沒(méi)有抗原—抗體反應(yīng)，也就不會(huì)有顆粒存在，銀離子與對(duì)苯二酚的反應(yīng)則很慢，這樣光鏡下就能看到抗原—抗體反應(yīng)部位呈黑色或黑褐色。IGSS方法可提高抗原—抗體反應(yīng)部位金顆粒的可見(jiàn)度，它是一種簡(jiǎn)便、特異而敏感的方法。
 
    IGSS可分直接法、間接法和搭橋法。
免疫金銀染色間接法                   免疫金銀染色搭橋法
Ag-抗原；Ab-特異抗體；Gab-金標(biāo)記抗體  Ag-抗原；Abl-特異性一抗；Ab2-橋聯(lián)抗體
         GP-金粒；SP-銀沉淀           Ab3-G-金標(biāo)抗體；GP-金顆粒；SP-銀沉淀

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