信號(hào)通路Wnt3a抗體相關(guān)信息，Anti-Wnt3a

免疫方法——免疫途徑 
*常有靜脈、腹腔、肌肉、皮下、皮內(nèi)、淋巴結(jié)、腳掌等注射。 
*一般采用多點(diǎn)注射方法 
-常在足、掌、腋窩淋巴結(jié)周?chē)⒈巢績(jī)蓚?cè)、頜下、耳后等處的皮內(nèi)或皮下。 
-皮內(nèi)易引起細(xì)胞免疫反應(yīng)，有利于提高抗體的效價(jià)。 
（3） 免疫方法——免疫途徑 （續(xù)） 
*幾點(diǎn)說(shuō)明： 
-大動(dòng)物一般不用腹腔注射 
-顆?？乖褪褂米魟r(shí)不能靜脈注射 
g抗原即可獲得較好的免疫效果。m-抗原寶貴可采用淋巴結(jié)內(nèi)微量注射法，只需10～100 
-皮內(nèi)注射較困難，特別是天冷時(shí)更難注入。 
（3） 免疫方法——次數(shù)及間隔時(shí)間 
*次數(shù)一般為2～3次（初次免疫和加強(qiáng)免疫） 
-注射后，10～15天再加強(qiáng)注射； 
-劑量同或?yàn)榈囊话?，用不全佐劑或不用佐劑?/span> 
*間隔時(shí)間，一般而言，動(dòng)物越大，間隔越長(zhǎng) 
-豚鼠、大鼠為7～8天，兔子為10～15天，羊?yàn)?/span>14～28天； 
-第三次注射的間隔時(shí)間更長(zhǎng)些，效果更好。 
舉例1：家兔的免疫 
*初次免疫  信號(hào)通路Wnt3a抗體相關(guān)信息，Anti-Wnt3a 
g Ag加入FCA，在背部皮下注射6～8點(diǎn)，每點(diǎn)0.1～0.2ml，也可肌肉內(nèi)或皮內(nèi)注射；m-用50～200 
*兩周后，加強(qiáng)免疫 
g Ag于PBS或FIA中，在肌肉、皮下、靜脈或腹腔內(nèi)注射；m-將50～200 
*抗體效價(jià)的檢測(cè)：加強(qiáng)免疫一周后，耳緣靜脈采血 
-抗體效價(jià)測(cè)定可用環(huán)狀沉淀試驗(yàn)、瓊脂雙向擴(kuò)散法等方法。前者抗體效價(jià)在1:4000以上，后者在1:16以上，即可采血，取血清進(jìn)一步提純。 
舉例2：微量抗原淋巴結(jié)內(nèi)注射免疫家兔 
*一般選擇2.5～3.0kg的新西蘭種公兔 
-先在其兩腳墊注射*福氏佐劑0.2ml（卡介苗每兔合5mg）； 
-10天后，見(jiàn)胭窩淋巴結(jié)腫大，然后將抗原注射至腫大的淋巴結(jié)內(nèi)，*次注射抗原用*福氏佐劑混合乳化； 
g；m-以后每隔20天用不*福氏佐劑乳化抗原，以同樣方法加強(qiáng)2次，各次注射的抗原均為25～50 
-末次注射兩周后兔耳放血測(cè)價(jià) （可達(dá)1:128）。 
舉例3：豚鼠和大鼠的免疫 
*初次免疫 
g Ag加入FCA，在背部皮內(nèi)注射4～6點(diǎn)，每點(diǎn) 0.lml，也可肌肉內(nèi)或皮下注射；m-用10～100 
*加強(qiáng)免疫 
g Ag于 PBS或FIA中。在肌肉、皮下或靜脈注射；m-每隔 7～8天，將10～50 
*抗體效價(jià)的檢測(cè) 
（4） 免疫劑量 
*抗原性強(qiáng)的抗原量應(yīng)小，過(guò)大反會(huì)引起免疫抑制； 
*免疫周期長(zhǎng)的動(dòng)物可少量多次注射，短的可大量少次。 
（4） 免疫劑量 （續(xù)） 
*各種動(dòng)物免疫抗原劑量和加強(qiáng)免疫的劑量 
（5） 抗體效價(jià)的檢測(cè)