熒光素標(biāo)記腫瘤壞死因子α誘導(dǎo)蛋白1抗體IgG，Anti-TNFAIP1/FITC

切片邊緣著色 
切片邊緣著色也是一種常見(jiàn)的現(xiàn)象，這種現(xiàn)象稱為邊緣效應(yīng)。產(chǎn)生的原因：（1）、組織邊緣與玻片粘貼不牢，邊緣組織松脫漂浮在液體中，每次清洗不易將組織下面試劑洗盡所致。解決辦法：制備的膠片（APES或多聚賴氨酸），切出盡量薄的組織切片，不厚于4微米，組織的前期處理應(yīng)規(guī)范，盡量避免選用壞死較多的組織。（2）、切片上滴加的試劑未充分覆蓋組織，邊緣的試劑容易首先變干，濃度較中心組織高而致染色深。解決辦法：試劑要充分覆蓋組織，應(yīng)超出組織邊緣2 mm。用DAKO筆畫(huà)圈時(shí)，為了避免油劑的影響，畫(huà)圈應(yīng)距組織邊緣3-4 mm。 

“陰陽(yáng)臉”著色 
指組織一半著色一半無(wú)著色，形成交界清晰或不甚清晰的兩種染色結(jié)果。其成因是試劑僅覆蓋了部分組織而不是全部。如加試劑后未讓試劑流散開(kāi)而集中在部分組織上。通常應(yīng)該在加完試劑后，仔細(xì)看一遍，是否有的組織未被試劑*覆蓋，如有這種情況，建議用牙簽而不是用吸頭或試劑瓶口將試劑引流開(kāi)使之將組織全部覆蓋。另外，染片盒不平，切片傾斜，雖然開(kāi)始試劑已全部覆蓋了組織，但后來(lái)試劑流向一邊，部分組織未被試劑覆蓋。對(duì)于這種問(wèn)題，只要留心或想到了很容易發(fā)現(xiàn)，也很容易解決。有時(shí)，用DAKO（或PAP）筆在組織周圍畫(huà)圈時(shí)，劃線太靠近或畫(huà)到了組織上，由于筆油的力學(xué)原理，試劑不能達(dá)到靠近劃線附近的組織。還有氣泡也可引起陰陽(yáng)分明的著色，只是不著色區(qū)域是圓形，由于氣泡中含氣，試劑被推到周圍，因此，氣泡中心的組織不著色。解決辦法是滴加試劑時(shí)手法要輕，有氣泡時(shí)用牙簽捅破。

灶片狀著色 
切片中著色區(qū)東一塊西一塊，呈灶片狀分布，出現(xiàn)這種問(wèn)題的原因有：（1）、裱片時(shí)水未排盡，在局部形成氣泡使組織突起，染色時(shí)試劑滲入后不易洗盡，顯色過(guò)深所致。解決辦法是，漂片盒里的氣泡應(yīng)去盡，晾片熱臺(tái)不能平放，應(yīng)有45度左右的斜度，利于水流走和蒸發(fā)。（2）、壞死組織灶，組織壞死后細(xì)胞破壞、酶的釋放、蛋白游離、分解，復(fù)雜的肽鏈殘段（如Fc段）可能與一抗或/和二抗結(jié)合導(dǎo)致zui終著色。解決辦法是在選擇染色切片時(shí)應(yīng)避免選擇壞死組織較多的切片。（3）、制作APES膠片時(shí)，膠的濃度太高，干燥后在玻片上留下白色小點(diǎn)，顯色時(shí)白色小點(diǎn)著色。解決辦法是按照標(biāo)準(zhǔn)的制備方法進(jìn)行，即5%鹽酸酒精（5ml鹽酸+95%酒精95ml）浸泡玻片4小時(shí)、熱水沖洗玻片1小時(shí)、蒸餾水洗玻片1分鐘、丙酮浸泡玻片5秒鐘后空氣干燥（室溫）、2%APES（2 ml APES+98 ml丙酮）浸泡玻片5分鐘、玻片過(guò)一下丙酮（1-2秒鐘）、玻片過(guò)一下蒸餾水（1-2秒鐘）、37°C過(guò)夜干燥、室溫儲(chǔ)存?zhèn)溆?。如果制片過(guò)程中，因丙酮逐漸揮發(fā)而膠變濃時(shí)可適當(dāng)加入一些丙酮。 
5、 間質(zhì)著色