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Anti-TGF-βR 3/FITC 熒光素標記轉(zhuǎn)移生長因子–β受體3抗體IgG |
Anti-TGM3/FITC 熒光素標記轉(zhuǎn)谷氨酰酶3抗體IgG |
Anti-Thioredoxin 1/FITC 熒光素標記硫氧還蛋白抗體IgG |
Anti-Thymosin α-1/FITC 熒光素標記* α-1抗體IgG |
Anti-Tie1/FITC 熒光素標記血管生成素-1受體抗體IgG |
Anti-Tie2/FITC 熒光素標記上皮生長因子樣域*激酶2IgG |
Anti-TIEG1/KLF10/FITC 熒光素標記TGF-β誘導(dǎo)早期應(yīng)答基因1抗體IgG |
anti-RARRES1/TIG1/FITC 熒光素標記*受體應(yīng)答蛋白1抗體IgG |
Anti-TIGAR humen/FITC 熒光素標記兔抗人TIGAR蛋白抗體IgG |
anti-Rarres2/TIG2/FITC 熒光素標記*受體應(yīng)答蛋白2抗體IgG |
Anti-Rarres3/TIG3/Chemerin/FITC 熒光素標記*受體應(yīng)答蛋白3抗體IgG |
Anti-TIMP-1/FITC 熒光素標記金屬蛋白酶組織抑制因子-1抗體IgG |
Anti-TIMP-2/FITC 熒光素標記金屬蛋白酶組織抑制因子-2抗體IgG |
取材的特殊要求及注意事項(續(xù))
*避免擠壓:取材時組織受擠壓可使邊緣部細胞形態(tài)改變并加深非特異著色,因而取材時應(yīng)使用鋒利的刀刃;
-鑷取組織動作要輕;
-經(jīng)窺鏡直接鉗取的組織往往有過度擠壓,觀察結(jié)果時應(yīng)有所考慮。
固定及常用的固定液
*取材后的組織需立刻投于固定劑中
-固定使組織和細胞的蛋白質(zhì)凝固,終止內(nèi)源性或外源性酶反應(yīng),防止組織自溶或異溶,以保持原有結(jié)構(gòu)和形態(tài);
-對免疫組化而言更有原位保存抗原的作用,避免抗原失活或彌散。
*常用固定液:固定劑品種很多,但大多屬于醛類和醇類。其固定原理不同,各有優(yōu)缺點。
-醛類(常用甲醛、戊二醛和多聚甲醛)
-醇類(常用乙醇)
-其它 (丙酮)
(1) 醛類
*甲醛(福爾馬林)應(yīng)用zui廣
-原理:形成分子間的交聯(lián),影響蛋白構(gòu)型而使之固定。
-優(yōu)點:形態(tài)結(jié)構(gòu)保存好,且穿透性強,組織收縮少。
-缺點:
*甲醛放置過久可氧化為甲酸,使溶液pH降低,影響染色;
*醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基,使抗原決定簇的三維構(gòu)象出現(xiàn)空間障礙;
*分子間交聯(lián)形成的網(wǎng)格結(jié)構(gòu)可能部分或*掩蓋某些抗原決定簇,使之不能充分暴露??稍斐杉訇幮缘娜旧Y(jié)果。
-注意事項:
C),為此組織塊不宜過厚。°*縮短固定時間,降低固定溫度(4
*改用中性緩沖福爾馬林,以pH值7.2~7.4 0.01mol/L的磷酸鹽緩沖液配制成10%甲醛固定液,減少固定液pH的變化。
*固定后充分水洗以減少分子間交聯(lián)。
*切片在作免疫組化染色前,先經(jīng)預(yù)處理使抗原再現(xiàn)(抗原修復(fù))。
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