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絲裂原活化蛋白激酶4抗體,Anti-MAPK4

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本公司長期供應(yīng)免疫組化抗體、WB抗體、免疫組化試劑盒和抗體試驗(yàn)所需全部相關(guān)試劑、熒光標(biāo)記抗體、elisa抗體、單克隆抗體、多克隆抗體、各種標(biāo)記的二抗IgG/IgM/IgD/IgA等科研實(shí)驗(yàn)抗體。

絲裂原活化蛋白激酶4抗體,Anti-MAPK4免疫失敗的可能原因及應(yīng)采取的措施

  有時不能獲得滿意的抗血清,可從下列幾方面找原因,并改進(jìn)之。

 

 ?。?)免疫動物的種屬及品系是否合適,可考慮改變動物的種屬或品系,或擴(kuò)大免疫動物的數(shù)量。

 

 ?。?)抗原質(zhì)量是否良好,可改用其它廠家的產(chǎn)品或改用同一廠家的其它批號,也可考慮改變抗原分子的部分結(jié)構(gòu),或改進(jìn)提取方法。

(3)制備的免疫原是否符合要求,可從偶聯(lián)劑,比例、反應(yīng)時間等多方面去考慮,并加以改進(jìn)。

(4)所用的佐劑是否合適,乳化是否*,可改用其它佐劑,或加強(qiáng)乳化。

 

 ?。?)免疫的方法、劑量,加強(qiáng)免疫的間隔時間和次數(shù),免疫的途徑是否合適。

 

 ?。?)動物的飼養(yǎng)是否得當(dāng),如營養(yǎng)(飼料、飲水)、環(huán)境衛(wèi)生(通風(fēng)、采光、溫度)是否符合要求,動物的健康情況是否良好等

親合力   在免疫學(xué)中, 親合力是指抗體與結(jié)合抗原體的活度或牢固度。抗體與抗原結(jié)合疏松,結(jié)合后會迅速解離,稱為親合力低,反之,親合力高。親合力的高低是由抗原分子的大小,抗體分子的結(jié)合位點(diǎn)與抗原的決定基之間的立體結(jié)構(gòu)型的合適程度決定的。親合力常以親合常數(shù)K表示。K的單位是升/摩爾(L/mol)。在RIA中,K是該抗血清能達(dá)到的zui小檢出量(靈敏度)的倒數(shù),K=1/[H],[H]是zui小檢出量,通常,K的范圍在108~1012L/mol之間,也有高達(dá)1014L/mol的。

  計(jì)算親合常數(shù)的方法20余種,計(jì)算出的K都不能真實(shí)反映實(shí)驗(yàn)情況,只能作為參考。

特異性測定   抗血清的特異性或稱專一性是指抗血清對相應(yīng)的抗原及近似的抗原物質(zhì)的識別能力。特異性好就是抗血清的識別能力強(qiáng)。通常,特異性是以交叉反應(yīng)率來表示的。交叉反應(yīng)率低,表示抗血清的特異性好,反之則特異性差。交叉反應(yīng)率一般是用競爭抑制曲線來判斷的。以不同濃度的抗原和近似抗原物質(zhì)分別做競爭抑制曲線,計(jì)算各自的結(jié)合率(B/T或B/B0),求出各自在IC50時的濃度,按下列公式計(jì)算交叉反應(yīng)率。

  S=y/Z×100%

  S:交叉反應(yīng)率,y:IC50時抗原濃度,Z:IC50時近似抗原物質(zhì)的濃度。

  如某抗原的IC50濃度為90Pg/管,而一些近似抗原物質(zhì)IC50濃度幾乎是無限大,可以說這一抗血清與其它抗原物質(zhì)的交叉反應(yīng)率近似零,即無交叉反應(yīng),該抗血清的特異性是好的。

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