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食欲素受體抗體,Anti-OXR

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本公司長期供應(yīng)免疫組化抗體、WB抗體、免疫組化試劑盒和抗體試驗所需全部相關(guān)試劑、熒光標(biāo)記抗體、elisa抗體、單克隆抗體、多克隆抗體、各種標(biāo)記的二抗IgG/IgM/IgD/IgA等科研實驗抗體。

食欲素受體抗體,Anti-OXR抗血清質(zhì)量的評價

  在免疫期間,不僅各個不同的動物,而且同一動物在不同的時間內(nèi)抗血清效價、特異性、親合力等都可能發(fā)生變化,因而必須經(jīng)常地采血測試。只有在對抗血清的效價、特異性、親合力等方面作*的評價后,才可使用所取得的抗血清。

  1.效價  抗血清的效價,就是指血清中所含抗體的濃度或含量。效價測定的方法常用的是放射免疫法,此法對所有的抗體均適用。某些由大分子(如蛋白類)抗原所產(chǎn)生的抗體,可用雙擴(kuò)散等方法測定。前者測定的效價極為。而后者則粗糙得多。

  (1)放射免疫法: 以不同稀釋度的抗血清與標(biāo)記抗原混合,孵育24h后,測定其結(jié)合率。通常以結(jié)合率為50%的血清稀度和為效價。如某抗血清的結(jié)合率為50%時的稀釋度為1:15000,則該血清的效價就是1:15000。抗血清的效價,除由抗血清本身的性質(zhì)決定外,還受標(biāo)記抗原的質(zhì)量、孵育時間,所用稀釋液的成分及其pH等因素的影響,在工作中必須引起注意。(測定方法見第8章?。?/p>

  (2)雙向擴(kuò)散法:利用大分子抗原和抗體在瓊脂平板上擴(kuò)散,兩者在相交處產(chǎn)生沉淀線,以觀察和判斷抗血清中是否有抗體及其濃度。

  球脂板的制備:100ml pH7.1 的磷酸鹽緩沖液加到15g的瓊脂內(nèi),于水浴中加溫,攪拌,使瓊脂*溶解,趁熱用紗布過濾,待溶液冷卻到65℃左右時,加入疊氮鈉(NaN3),使其在溶液中的濃度為0.1%。用移液管把瓊脂放在干凈平皿或玻片上,約3mm厚,待其冷卻,*凝固后,用打孔器打孔(圖2-4)。*孔內(nèi)加適量抗原(容量為50μl),周圍各孔內(nèi)分別加入50μl 1:2、1:4、1:8、1:16、1:32及不稀釋的抗血清,37℃下孵育24h,觀察有無沉淀線產(chǎn)生,以判斷血清的稀釋度

特異性測定   抗血清的特異性或稱專一性是指抗血清對相應(yīng)的抗原及近似的抗原物質(zhì)的識別能力。特異性好就是抗血清的識別能力強(qiáng)。通常,特異性是以交叉反應(yīng)率來表示的。交叉反應(yīng)率低,表示抗血清的特異性好,反之則特異性差。交叉反應(yīng)率一般是用競爭抑制曲線來判斷的。以不同濃度的抗原和近似抗原物質(zhì)分別做競爭抑制曲線,計算各自的結(jié)合率(B/T或B/B0),求出各自在IC50時的濃度,按下列公式計算交叉反應(yīng)率。

  S=y/Z×100%

  S:交叉反應(yīng)率,y:IC50時抗原濃度,Z:IC50時近似抗原物質(zhì)的濃度。

  如某抗原的IC50濃度為90Pg/管,而一些近似抗原物質(zhì)IC50濃度幾乎是無限大,可以說這一抗血清與其它抗原物質(zhì)的交叉反應(yīng)率近似零,即無交叉反應(yīng),該抗血清的特異性是好的。

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