口蹄疫（Foot-and-mouth disease,FMD）是由口蹄疫病毒（Foot-and-mouth disease virus）引起的一種偶蹄動(dòng)物共患的急性、熱性、高度接觸性傳染病,主要侵害豬、牛、羊等偶蹄類動(dòng)物。該病傳播速度快、宿主范圍廣、發(fā)病率高,被世界動(dòng)物衛(wèi)生組織（OIE）列為A類傳染病。FMDV有七種血清型、七十多種亞型,變異性強(qiáng),給病毒的防治造成很大困難。它可導(dǎo)致國(guó)家的畜產(chǎn)品進(jìn)出口貿(mào)易受限,造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失和政治影響。因此,建立準(zhǔn)確、快捷的區(qū)分感染活病毒（發(fā)病或注射弱毒疫苗）和注射滅活疫苗動(dòng)物的診斷方法,在檢測(cè)和防止FMD的發(fā)生、活畜檢疫等方面都是十分迫切需要的。

 

FMDV感染動(dòng)物既能產(chǎn)生結(jié)構(gòu)蛋白（SP）抗體也能產(chǎn)生非結(jié)構(gòu)蛋白（NSP）抗體,而現(xiàn)行滅活疫苗在生產(chǎn)過程中大多數(shù)去除了非結(jié)構(gòu)蛋白,因此,動(dòng)物在接種FMDV滅活疫苗后,主要產(chǎn)生結(jié)構(gòu)蛋白抗體,很少或者不產(chǎn)生NSP抗體。所以,以NSP為抗原,檢測(cè)動(dòng)物體內(nèi)NSP抗體是一種很好的區(qū)分自然感染動(dòng)物和疫苗免疫動(dòng)物的診斷方法（NSP口蹄疫3ABC檢測(cè)試劑盒主要用于檢測(cè)自然感染的動(dòng)物）

 

【原    理】

本品系由包被豬口蹄疫病毒非結(jié)構(gòu)蛋白3ABC基因工程表達(dá)產(chǎn)物包被微孔板和酶標(biāo)記抗豬IgG及其他試劑組成，應(yīng)用酶免間接法原理（ELISA）檢測(cè)豬血清或血漿中豬口蹄疫病毒非結(jié)構(gòu)蛋白3ABC IgG抗體。實(shí)驗(yàn)時(shí)，加入稀釋的對(duì)照血清和待檢血清，經(jīng)溫育后，若樣品中含有豬口蹄疫病毒非結(jié)構(gòu)蛋白3ABC的特異性抗體，則將與檢測(cè)板上抗原結(jié)合，經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的抗體和其他成分后；再加入酶標(biāo)二抗，與檢測(cè)板上抗原抗體復(fù)合物發(fā)生特異性結(jié)合；再經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的酶結(jié)合物，在孔中加TMB底物液，與酶反應(yīng)形成藍(lán)色產(chǎn)物，加入終止液反應(yīng)后，用酶標(biāo)儀450nm波長(zhǎng)測(cè)定各反應(yīng)孔中的OD值

【使用意義】

口蹄疫是由口蹄疫病毒（Foot-and-mouth disease virus, FMDV）感染引起的偶蹄動(dòng)物共患的急性、熱性、接觸性傳染病。在豬的預(yù)防免疫工作中,zui值得關(guān)注的就是強(qiáng)化免疫的接種時(shí)機(jī)問題。在過高的抗體水平進(jìn)行免疫,過高的抗體水平還會(huì)中和疫苗,影響疫苗的免疫效果,導(dǎo)致免疫失敗；在較低的抗體水平進(jìn)行免疫,又會(huì)出現(xiàn)抗體保護(hù)真空期,威脅豬的健康。

該試劑盒檢測(cè)豬血清中口蹄疫病毒非結(jié)構(gòu)蛋白3ABC的抗體。用于區(qū)別口蹄疫野毒感染豬和用滅活疫苗免疫豬。

【試劑盒組成】 

1.	豬口蹄疫3ABC抗原包被微孔板條	96T×2
2.	酶標(biāo)記物	22ml×1
3.	樣品稀釋液	50ml×1
4.	洗滌液（用前1：20稀釋）	40 ml×1
5.	顯色劑A	7 ml×2
6.	顯色劑B	7 ml×2
7.	終止液	7 ml×2
8.	豬口蹄疫3ABC 抗體陽性對(duì)照血清（已滅活）	1 ml×1
9.	豬口蹄疫3ABC 抗體陰性對(duì)照血清（已滅活）	1 ml×1
10.	說明書	1份

【規(guī)格】192頭份/盒

【樣品制備】
取動(dòng)物全血，按常規(guī)方法制備血清，要求血清清亮，無溶血。

【結(jié)果判定】

1. 陰性對(duì)照：正常情況下，陰性對(duì)照孔A值≤0.15；

2. 陽性對(duì)照：正常情況下，陽性對(duì)照孔A值≥0.5；

3. 結(jié)果判定：樣品A450值大于0.38，判為陽性；樣品A450值在0.2到0.38之間，判為可疑；樣品A450值小于0.2，判為陰性。

【試驗(yàn)方法的局限性】

 該試驗(yàn)僅作為定性檢測(cè)豬口蹄疫病毒非結(jié)構(gòu)蛋白3ABC的抗體。