人TNF-a ELISA試劑盒
　　　　
　　　　1試劑的準(zhǔn)備
　　按試劑盒說明書的要求準(zhǔn)備實驗中需用的試劑.ELISA中用的蒸餾水或去離子水,包括用于洗滌的,應(yīng)為新鮮的和高質(zhì)量的.自配的緩沖液應(yīng)用pH計測量較正.從冰箱中取出的試驗用試劑應(yīng)待溫度與室溫平衡后使用.試劑盒中本次試驗不需用的部分應(yīng)及時放回冰箱保存.
2試劑盒組成
    48孔配置 96孔配置 保存
　　說明書 1份 1份 
　　封板膜 2片（48） 2片（96） 
　　密封袋 1個 1個 
　　酶標(biāo)包被板 1×48 1×96 2-8℃保存
　　標(biāo)準(zhǔn)品：13.5U/L 0.5ml×1瓶 0.5ml×1瓶 2-8℃保存
　　標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 1.5ml×1瓶 1.5ml×1瓶 2-8℃保存
　　酶標(biāo)試劑 3ml×1瓶 6ml×1瓶 2-8℃保存
　　樣品稀釋液 3ml×1瓶 6ml×1瓶 2-8℃保存
　　顯色劑A液 3ml×1瓶 6ml×1瓶 2-8℃保存
　　顯色劑B液 3ml×1瓶 6ml×1瓶 2-8℃保存
　　終止液 3ml×1瓶 6ml×1瓶 2-8℃保存
　　20倍濃縮洗滌液 20ml×1瓶 30ml×1瓶 2-8℃保存
3樣本處理及要求：
　　1.血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。
　　2.血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)該再次離心。
　　3.尿液：用無菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。
　　4.細(xì)胞培養(yǎng)上清：檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
　　5.組織標(biāo)本：切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。
　　6.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實驗。若不能馬上進(jìn)行試驗，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融.
　　7.不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
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