產(chǎn)品名稱:消化液Trypsin-EDTA0.25%
產(chǎn)品貨號:C0160-711
產(chǎn)品規(guī)格:500ML
運(yùn)輸溫度:-20攝氏度
效 期:12個(gè)月
使用Trypsin-EDTA0.25%消化液的基本步驟如下:
1.準(zhǔn)備階段:
- 吸去細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的舊培養(yǎng)基。
- 使用PBS(磷酸鹽緩沖液)、Hank's液或其他無血清的緩沖液清洗細(xì)胞一次,以去除殘留的血清和其他可能影響Trypsin-EDTA活性的物質(zhì)。
2. 消化階段:
- 加入適量的Trypsin-EDTA0.25%消化液,確保液體覆蓋所有細(xì)胞。
- 室溫下孵育,時(shí)間根據(jù)細(xì)胞類型而定,一般從幾十秒到幾分鐘不等。消化時(shí)間過長可能會損傷細(xì)胞。
3. 終止消化:
- 當(dāng)細(xì)胞開始從表面松動時(shí),立即吸去Trypsin-EDTA0.25%消化液。
- 加入含有血清的新鮮培養(yǎng)基,因?yàn)檠逯械牡鞍踪|(zhì)能中和Trypsin-EDTA0.25%的活性,終止消化過程。
4. 離心與重懸:
- 將細(xì)胞混合物轉(zhuǎn)移到離心管中,進(jìn)行低速離心(約1000~2000 g)1分鐘,收集細(xì)胞沉淀。
- 去除上清液,使用新鮮的wan全培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞,然后可將細(xì)胞分種到新的培養(yǎng)瓶或進(jìn)行進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)操作。
注意事項(xiàng):
- 不同類型的細(xì)胞對Trypsin-EDTA0.25%的敏感度不同,消化時(shí)間需要根據(jù)經(jīng)驗(yàn)或文獻(xiàn)指導(dǎo)調(diào)整。
- 消化過程中應(yīng)密切觀察細(xì)胞狀態(tài),避免過度消化導(dǎo)致細(xì)胞損傷。
- 一些細(xì)胞類型可能需要不含EDTA的Trypsin消化液,尤其是用于原代細(xì)胞分離時(shí),因?yàn)?/span>EDTA可能會影響某些細(xì)胞的功能或存活率。
- 在處理Trypsin-EDTA0.25%消化液時(shí),要遵循實(shí)驗(yàn)室安全規(guī)范,因?yàn)?span style="text-wrap: wrap;">Trypsin-EDTA0.25%和EDTA都是潛在的刺激性化學(xué)物質(zhì)。
這些步驟和注意事項(xiàng)適用于大多數(shù)細(xì)胞系,但在具體操作時(shí),應(yīng)參考特定產(chǎn)品的說明書以及細(xì)胞系的特性來進(jìn)行適當(dāng)?shù)恼{(diào)整。