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BLOCK-iT™ 慢病毒 RNAi Gateway™ 載體試劑盒

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產(chǎn)品型號Invitrogen

品       牌

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更新時間:2023-05-12 09:18:36瀏覽次數(shù):122次

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產(chǎn)品簡介

BLOCK-iT™ 慢病毒 RNAi Gateway™ 載體試劑盒

詳細介紹

在 BLOCK-iT™ 慢病毒 RNAi 表達系統(tǒng)中提供的 pLenti6/BLOCK-iT™-DEST 表達載體可用于從慢病毒載體中高效引入和體內(nèi)穩(wěn)定表達短發(fā)夾 RNA (shRNA)。一種新型克隆方法使 ~50-bp DNA 寡核苷酸緊接著 U6 pol III 啟動子進入 BLOCK-iT™ U6 入門載體。寡核苷酸設計用于表達可形成莖環(huán)結構的 RNA,該結構包含目的靶基因的正義區(qū)和反義區(qū)。然后將該 shRNA 重組到 pLenti6/BLOCK-iT™-DEST 載體中。病毒產(chǎn)生和轉導后,U6 啟動子驅(qū)動的 shRNA 作為 RNAi 盒穩(wěn)定整合。產(chǎn)生的 shRNA 避免了宿主防御機制,并將有效地產(chǎn)生 RNAi 基因敲低反應(圖 1)。

pLenti6/BLOCK-iT™-DEST 載體(圖 2)可提供:

?與包含 RNAi 盒的 attL-flanked U6 Gateway™ 入門載體進行有效重組的 attR 位點
?高效慢病毒包裝和目標 shRNA 遞送所需的所有組分
?用于快速、有效篩選表達 shRNA 的穩(wěn)定細胞系的殺稻瘟菌素選擇標記 利用 BLOCK-iT™ 慢病毒 RNAi 表達系統(tǒng),可實現(xiàn)分裂和非分裂哺乳動物細胞類型和動物模型中基因阻斷的長期分析。

BLOCK-iT™ RNAi U6 入門載體試劑盒允許進行 shRNA 靶序列的簡化克隆以在瞬時實驗中驗證效果。通過標準 Gateway™ LR 重組反應,將選定的 RNAi 表達盒從 BLOCK-iT™ RNAi U6 入門載體快速有效地重組到 pLenti6/BLOCK-iT™-DEST 載體中(圖 3)。
For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.


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