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蛋白酶純化

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更新時間：2017-01-01 04:51:57瀏覽次數(shù)：488次

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廣州健侖生物科技有限公司

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產(chǎn)品簡介

用于DNA和RNA制備過程中蛋白酶的消化

詳細介紹

酶的消化試劑盒

QIAGEN Proteinase K

（產(chǎn)品咨詢：/）

簡介：

用于DNA和RNA制備過程中蛋白酶的消化

QIAGEN Protease和QIAGEN Proteinase K在寬范圍反應(yīng)條件下有廣泛的底物特異性和高活性。兩種蛋白酶在大部分DNA和RNA純化流程使用的緩沖液中都有高活性，經(jīng)QIAGEN*。

詳細信息：

性能

QIAGEN Protease和QIAGEN Proteinase K在大部分DNA和RNA純化流程使用的緩沖液以及寬范圍的鹽、變性劑、洗滌劑、pH和溫度條件下都有高活性（見表“常用緩沖液中的蛋白酶活性"）。兩種酶都經(jīng)QIAGEN*。

常用緩沖液中的蛋白酶活性*

緩沖液	活性(%)
緩沖液	QIAGEN Protease	QIAGEN Proteinase K
30 mM Tris·Cl	100	100
30 mM Tris·Cl; 30 mM EDTA; 5% Tween 20; 0.5% Triton X-100; 800 mM GuHCl^?	210	313
36 mM Tris·Cl; 36 mM EDTA; 5% Tween 20; 0.36% Triton X-100; 735 mM GuHCl^?	205	301
10 mM Tris·Cl; 25 mM EDTA; 100 mM NaCl; 0.5% SDS	78	128
10 mM Tris·Cl; 100 mM EDTA; 20 mM NaCl; 1% Sarkosyl	101	74
10 mM Tris·Cl; 50 mM KCl; 1.5 mM MgCl2; 0.45% Tween 20; 0.5% Triton X-100	159	106
10 mM Tris·Cl; 100 mM EDTA; 0.5% SDS	98	120
30 mM Tris·Cl; 10 mM EDTA; 1% SDS	38	203

* pH 8.0, 50°C, 1.25 ?g/ml蛋白酶，孵育15 min。
^? QIAGEN Genomic-tip操作流程中使用的Buffer G2，用于從血液、細胞培養(yǎng)基和組織中純化DNA。
^? 用于細菌DNA純化的QIAGEN Genomic-tip實驗方案中*的蛋白酶消化緩沖液條件（Buffers B1+ B2）。

原理

技術(shù)規(guī)格

	QIAGEN Protease	QIAGEN Proteinase K
規(guī)格	凍干粉	即用型溶液
量	7.5 AU或4 x 7.5 AU	2 ml或10 ml (20 mg/ml)
活性	45 mAU/mg蛋白	>600 mAU/ml
單位定義	一個mAU是指每分鐘1 mol*釋放的斐林陽性的氨基酸和肽的活性

QIAGEN Proteinase K是從腐生菌Tritirachium album中提取的一種枯草桿菌蛋白酶，非常適合短時間消化。其特異性活性高，在很大的溫度和pH 值范圍內(nèi)可保持穩(wěn)定，并在高溫時具有更高活性。可溶性鈣在酶反應(yīng)中不是必須的。所以用于抑制核酸酶等Mg²⁺依賴性酶的EDTA將不會抑制Proteinase K的活性。以下QIAGEN試劑盒中包含有Proteinase K：

QIAamp DNA Mini Kit

QIAamp DNA Stool Mini Kit

QIAamp 96 DNA Swab BioRobot Kit

DNeasy Tissue Kit

DNeasy 96 Tissue Kit

QIAamp DNA Micro Kit

QIAamp MinElute Media Kit

QIAamp UltraSens Virus Kit

QIAamp Media MDx Kit

QIAGEN Protease是從重組Bacillus菌株中提取的一種*蛋白酶，可替代Proteinase K從多種樣本中提取DNA和RNA，且價格較低。QIAGEN Protease沒有DNase 和RNase活性。以下QIAGEN試劑盒中包含有QIAGEN Protease：

QIAamp DNA Blood Mini, Midi, and Maxi Kits

QIAamp 96 DNA Blood Kit

Blood & Cell Culture DNA Kits

QIAamp DNA Blood BioRobot 9604 Kit

QIAamp Virus BioRobot 9604 Kit

QIAamp DNA Blood BioRobot MDx Kit

QIAamp DSP 96 Virus MDx Kit

QIAamp DSP Virus Kit

QIAamp DSP DNA Blood Mini Kit

注意：使用手動QIAamp DNA Blood Kit和QIAGEN Blood & Cell Culture DNA Kit的用戶應(yīng)該用7 ml蒸餾水重懸每個瓶中的QIAGEN Protease。

注意：使用QIAamp DNA Blood BioRobot 9604 Kit的用戶應(yīng)該用10 ml蒸餾水重懸每個瓶中的QIAGEN Protease。
注意：QIAGEN蛋白酶不可與DNeasy Tissue、DNeasy 96 Tissue及QIAamp DNA Mini Kit中的ATL緩沖液同時使用。在SDS濃度大于0.5%、肌氨酰濃度大于1%、或有高濃度的其他去污劑時，EDTA的濃度必須小于8 mM，這樣才能在延長的孵育時間內(nèi)達到*活性。

操作流程

QIAGEN Protease或QIAGEN Proteinase K的使用指南在相應(yīng)的試劑盒手冊中提供。

應(yīng)用

QIAGEN Protease和QIAGEN Proteinase K用于DNA和RNA制備過程中蛋白酶的消化。在設(shè)計蛋白酶消化時，應(yīng)考慮兩種酶之間的細微差異。

【公司名稱】廣州健侖生物科技有限公司

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【聯(lián) 系人】全國東

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【電子郵件】 simon@jianlun.com

【騰訊】

【公司】http://www.jianlun.com/

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