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廣州健侖生物科技有限公司


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雞傳染性支氣管炎抗體檢測試劑盒

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產(chǎn)品型號

品       牌

廠商性質(zhì)生產(chǎn)商

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所  在  地廣州市

聯(lián)系方式:全國東查看聯(lián)系方式

更新時(shí)間:2016-08-22 05:35:27瀏覽次數(shù):314次

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經(jīng)營模式:生產(chǎn)廠家

商鋪產(chǎn)品:1563條

所在地區(qū):廣東廣州市

聯(lián)系人:全國東 (市場總監(jiān))

產(chǎn)品簡介

雞傳染性支氣管炎抗體檢測試劑盒

詳細(xì)介紹

 傳染性支氣管炎抗體檢測試劑盒

                                        使用說明書

【用途】
用來檢測雞血清中的禽傳染性支氣管炎病毒(IBV)抗體

【試驗(yàn)原理】
臨床上,傳染性支氣管炎是一種急性、高度傳染的病毒性疾病,任何日齡的雞都可以感染。IBV的潛伏期為24-72小時(shí)。疾病侵害雞的呼吸系統(tǒng)和泌尿系統(tǒng)。青年雞表現(xiàn)為急性呼吸道癥狀及氣管損傷。死亡率可高達(dá)*。血清中的病毒抗體可通過酶聯(lián)免疫的方法檢測。血清中的IBV抗體水平及整個(gè)雞群的免疫狀況可用ELISA方法進(jìn)行監(jiān)測。
將滅活的抗原包被在微孔板上,加入稀釋后的血清并孵育,血清中的抗IBV抗體將與包被在微孔板上的IBV結(jié)合,形成IBV抗原-抗體復(fù)合物。然后洗掉未結(jié)合的物質(zhì),加堿性磷酸酶標(biāo)記的抗雞IgG的酶標(biāo)結(jié)合物至微孔板中,酶標(biāo)物將與IBV抗原-抗體復(fù)合物結(jié)合。孵育后洗掉未結(jié)合的結(jié)合物,然后加入底物溶液。底物與堿性磷酸酶反應(yīng)并生成一種黃色的產(chǎn)物,zui后終止反應(yīng),將顏色固定。顏色的深淺可用酶標(biāo)儀(405-410nm)測定。

【一個(gè)微孔板所需的試劑的量】

抗原包被微孔板

12×8條(板)

樣品稀釋液(

120ml

洗滌液(

500ml

陽性對照

2μl

陰性對照

2μl

結(jié)合物

12ml

底物液

12ml

終止液

12ml


【所需物品】
1. 
能夠吸取2μl、100μl800μl的精確移液器
2. 
zui大吸取100μl的多通道移液器
3. 
計(jì)時(shí)器
4. 
量筒
5. 
蒸餾水
6. 
洗板機(jī)
7. 
稀釋用容器
8. 
能夠讀雙波(405-410nm630-650nm)的酶標(biāo)儀,OD值讀數(shù)zui大可達(dá)到3.0

【樣品收集】
采集至少0.5ml全血,分離血清并放在冰箱里,2-7用于短期儲(chǔ)存,如果*儲(chǔ)存,應(yīng)冷凍,且避免反復(fù)凍溶。如果樣品含有可見的顆粒物質(zhì),應(yīng)在檢測之前將其離心除去,嚴(yán)重污染的樣品不允許使用(如高度渾濁、細(xì)菌污染等)


【結(jié)果計(jì)算】
將陽性對照吸光度值和樣品吸光度值分別減去陰性對照吸光度值,注意:對照品及樣品吸光度值都應(yīng)該是2個(gè)重復(fù)孔的平均值。每個(gè)樣品的計(jì)算式如下:

樣品平均吸光度值 陰性對照吸平均吸光度值

=樣品與陽性對照比值(Sp

陽性對照平均吸光度值 陰性對照平均吸光度值

Sp ×100)= ELISA Unit (EU)              陽性對照值設(shè)為100 EU

【結(jié)果判定及EU單位說明】
IBV ELISA
                          說明
小于10EUs                            IBV抗體為陰性
10-15 EUs                             IBV
抗體為弱陽性,應(yīng)被認(rèn)為經(jīng)過免疫或暴露于IBV,油乳狀疫苗也可能引起非特異性低水平抗體。
15-75 EUs                             IBV
抗體適度陽性
75 EUs                              IBV抗體強(qiáng)陽性

【操作步驟】
1. 
將試劑回溫至室溫,通過顛倒和渦旋將試劑混勻。
2. 
1樣品稀釋液加入到含3份去離子水的容器中,充分混勻,例如,30ml 4×樣品稀釋液加入到90ml去離子水中。
3. 
120×洗滌液加入到含19份去離子水的容器中,充分混勻,例如,25ml 20×洗滌液加入到475ml去離子水中。
4. 
稀釋前將陽性對照、陰性對照和樣品震蕩均勻。
5. 
陽性對照、陰性對照和樣品均需要用樣品稀釋液稀釋后使用。稀釋比例為2μl 800μl。將移液器調(diào)到100μl,反復(fù)吹打4次使之充分混勻。
6. 
將稀釋后的陰性對照、陽性對照分別加入微孔中,每種做兩個(gè)平行,每孔100μl;將稀釋后的樣品100μl分別加入孔中,室溫下靜置30分鐘。
7. 
棄去微孔板中溶液,每孔加入300μl洗滌液洗滌,重復(fù)洗滌2次,在洗滌過程中防止酶標(biāo)板變干。
8. 
每孔立即加入100μl結(jié)合物,室溫靜置30分鐘。
9. 
重復(fù)步驟7進(jìn)行洗板。
10. 
每孔立即加入100μl底物,室溫靜置30分鐘。
11. 
不要倒掉板內(nèi)液體,每孔立即加入100μl終止液。
12. 
用酶標(biāo)儀雙波讀數(shù)(405nm410nm作為主要波長,630nm650nm為參考波長),計(jì)算結(jié)果。

【生產(chǎn)企業(yè)】 廣州健侖生物科技有限公司

 

 


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