本試劑盒采用酶聯(lián)免疫方法（ELISA）檢測犬血清中的特異性抗狂犬病毒抗體，用于犬只免疫后抗體監(jiān)測。
【試劑組成】
| 1.預(yù)包被板 | 48T/96T; | | 8. 終止液（6號(hào)液） | 1支; |
| 2.酶結(jié)合物原液 | 2支; | | 9. 臨界對(duì)照品 | 1支; |
| 3.酶結(jié)合物稀釋液 | 2支; | | 10.陰性對(duì)照品 | 1支; |
| 4.洗滌液（PBST干粉） | 1/2包; | | 10.不干膠膜 | 1/2片; |
| 5.底物（3號(hào)液） | 1支; | | 11.自封袋 | 1個(gè); |
| 6.顯色液（4號(hào)液） | 1支; | | 12.使用說明書 | 1份; |
| 7.*（5號(hào)液） | 1支; | | | |
【操作程序】
1. 酶結(jié)合物工作液配制：取1支酶結(jié)合物原液全部加入到1支酶結(jié)合物稀釋液中，充分混勻即可使用。
2. 洗滌液配制：每袋PBST干粉用蒸餾水500ml溶解混勻，即為洗滌液。
3. 加樣反應(yīng)：每孔滴加樣品稀釋液2滴，加待檢樣品各5ul。每次試驗(yàn)需設(shè)陰性對(duì)照、臨界對(duì)照各2孔，空白孔1孔（陰性對(duì)照、臨界對(duì)照已稀釋，試驗(yàn)時(shí)可直接取100ul加入孔內(nèi)，空白孔僅加2滴樣品稀釋液）。放置37℃20分鐘。傾去孔內(nèi)液體，將已配制好的洗滌液加滿每孔并靜置30秒鐘，傾去，甩干；共洗滌5次，拍干。
4. 加酶反應(yīng)：除空白對(duì)照孔外，其余每孔加已稀釋的酶結(jié)合物2滴，置37℃ 20分鐘。然后如上洗滌。
5. 顯色反應(yīng)：加底物（3號(hào)液）和顯色劑（4號(hào)液）各1滴，混勻，37℃下避光顯色10分鐘。加終止液（6號(hào)液）1滴，混勻，終止反應(yīng)后判讀結(jié)果。
【結(jié)果判斷】
以空白對(duì)照調(diào)零，用酶標(biāo)儀于450nm（630nm作參比波長）讀取吸光度（A值）。A值≥臨界對(duì)照均值為陽性，說明待檢樣品的抗體濃度≥0.5IU/ ml；低于者說明待檢樣品的抗體濃度<0.5IU/ml。。
【注意事項(xiàng)】
1.試劑盒于2-8℃保存，有效期6個(gè)月。每次使用前應(yīng)先平衡至室溫。
2.未使用完的板條應(yīng)密封保存。已稀釋的酶結(jié)合物工作液應(yīng)盡快使用。
3.試劑盒中終止液具有腐蝕性，要小心使用。
4.瓶蓋每次使用后要擰緊，各瓶蓋之間不可混用。不同批號(hào)試劑盒的試劑組份不可混用。
5.試驗(yàn)樣本應(yīng)為無染菌、無血脂、無溶血的血清。任何樣本都應(yīng)視為傳染源妥善處理。
6. 37℃孵育時(shí)，建議使用水浴箱。如無條件，可在溫箱中放置濕盒進(jìn)行反應(yīng)并同時(shí)用不干膠膜封蓋板孔。
特別提示：在使用酶結(jié)合物工作液之前，應(yīng)確保酶結(jié)合物原液已加入酶結(jié)合物稀釋液中并混勻！請(qǐng)?jiān)诠ぷ饕浩亢炆献⒚髋渲脮r(shí)間。
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