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人胰島素原(PI)ELISA試劑盒使用說明書

時間:2013-7-19閱讀:422
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人胰島素原(PI)ELISA試劑盒使用說明書

Elisa kit規(guī)格:48孔配置/96孔配置

標準品稀釋液:1.5ml×1

酶標試劑:3 ml×1瓶(48/6 ml×1瓶(96

人胰島素原(PI)ELISA試劑盒本試劑僅供研究使用 

計算

以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。

試劑盒組成

封板膜:2片(48/2片(96

說明書:1

密封袋:1

標準品:   2700ng/L 0.5ml×1 0.5ml×1瓶  2-8℃保存

酶標包被板:  1×48     1×96         2-8℃保存

樣品稀釋液: 3ml×1瓶  6 ml×1     2-8℃保存

顯色劑A: 3ml×1 6 ml×1     2-8℃保存

顯色劑B: 3ml×1 6 ml×1     2-8℃保存

終止液:     3ml×1 6ml×1     2-8℃保存

濃縮洗滌液:20ml×20倍)×1 20ml×30倍)×1瓶   2-8℃保存

實驗原理

本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本人胰島素原(PI)水平。用純化的人胰島素原(PI)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入抗血小板抗體IgG/M/A(PA-IgG/M/A),再與HRP標記的抗血小板抗體IgG/M/A(PA-IgG/M/A)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經(jīng)過*洗滌后底物TMB顯色。TMBHRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的抗血小板抗體IgG/M/A(PA-IgG/M/A)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品人胰島素原(PI)濃度。

目的:本試劑盒用于測血清,血漿及相關液體樣本中抗血小板抗體IgG/M/A(PA-IgG/M/A)含量。

服務承諾: 

供貨期:款到發(fā)貨。
工作時間內(nèi)免費的技術(shù)咨詢和指導 。
為客戶提供來樣檢測服務,zui大限度實驗結(jié)果的有效性(免費代測)。

保存條件及有效期:

試劑盒保存:2-8有效期:6個月 

人胰島素原(PI)ELISA試劑盒樣本處理及要求

1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應再次離心。

2. 血漿:應根據(jù)標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應該再次離心。

3. 尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。

4. 細胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBSPH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100/ml左右。通過反復凍融,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。

5. 組織標本:切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBSPH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?/font>2-8℃的溫度。加入一定量的PBSPH7.4),用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。

6. 標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但避免反復凍融.

7. 不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

 

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