固相萃取法(SPE):又叫液固提取法。它是指液體樣品中的分析物通過(guò)吸附(吸附和吸收)作用被保留在吸附劑上,然后用一定的溶劑洗脫的過(guò)程。
固相萃取法是一項(xiàng)結(jié)合了選擇性保留、選擇性洗脫等過(guò)程的分離技術(shù)。主要用于樣品的分離、純化和濃縮,與傳統(tǒng)的液液萃取法相比較可以提高分析物的回收率,更有效的將分析物和干擾組分分離,減少樣品預(yù)處理過(guò)程,操作簡(jiǎn)單,省時(shí)、省力。
根據(jù)吸附機(jī)理,固相萃取主要分為正相保留模式、反相保留模式、離子交換作用模式。
正相保留模式
我們所使用的溶劑多為非極性的有機(jī)溶劑,pH對(duì)正相保留的影響并不是很大。
反相保留模式
調(diào)節(jié)pH的主要目的是使目標(biāo)化合物或者雜質(zhì)充分質(zhì)子化,保持分子狀態(tài)。以硅膠鍵合十八烷基碳鏈(C18小柱)為例,對(duì)于現(xiàn)在的商品化鍵合硅膠固相萃取小柱,其封尾率最多在70%左右,還有30%的硅羥基存在。當(dāng)化合物處于離子狀態(tài)時(shí),C18對(duì)化合物的容量因子會(huì)大大降低。
固相萃取填料種類(lèi)及萃取機(jī)制
SPE技術(shù)的核心是填料,填料種類(lèi)繁多,可分成親脂型、親水型和離子交換型3類(lèi)。根據(jù)所采用固相萃取劑的種類(lèi),可將固相萃取法分為3類(lèi):正相、反相和離子交換固相萃取。在生物藥物分析中,常用的是反相和離子交換固相萃取。固相萃取的作用機(jī)制主要包括非極性作用(色散作用) 、極性作用(氫鍵作用、偶極矩和誘導(dǎo)偶極作用等) 、離子作用和共價(jià)作用等。目前隨著新固相萃取劑的應(yīng)用,由于可以綜合應(yīng)用多種作用機(jī)制,從而提高了各種固相萃取方法的應(yīng)用范圍。