鈉離子熒光探針SoNa 520 AM是 SoNa™ 520 的細胞滲透版本，用于監(jiān)測活細胞中的鈉離子。 SoNa™ 520 是一種新型鈉敏感熒光指示劑染料，用于檢測生物樣品中的鈉含量。它是一種熒光染料，與鈉離子結合后熒光強度大大增強。通過測量發(fā)射的熒光強度，研究人員可以評估生物樣品中的鈉離子濃度或研究鈉離子在生物刺激下如何變化。與其他的熒光鈉離子指示劑（例如 SBFI 和Corona Red）相比，它可能具有Z高的檢測靈敏度。它可用于測量活細胞和其他生物樣品中鈉濃度的變化。與Z常見的 SBFI 相比，SoNa™ 520 更加靈敏，在相同條件下具有更大的熒光響應。此外，SoNa™ 520 可以用可見 488 nm 激光或類似的可見光很好地激發(fā)，以避免激發(fā) SBFI 所需的紫外線激發(fā)。一般來說，紫外線激發(fā)會對細胞和其他生物樣品造成巨大損害，并且比可見光更快地光漂白染料探針。鈉離子指示劑的使用使科學家能夠研究與鈉相關的各種生理過程，例如鈉離子通道活性、細胞信號傳導和鈉穩(wěn)態(tài)。 百螢生物是AAT Bioquest的中國代理商，為您提供優(yōu)質的鈉離子熒光探針SoNa 520 AM。

溶液配制

儲備溶液配制

SoNa™ 520 AM 儲備溶液配制

在高質量無水 DMSO 中制備 2 至 5 mM SoNa™ 520 AM 儲備溶液。

工作溶液配制

SoNa™ 520 AM 工作溶液配制

實驗當天，將 SoNa™ 520 AM 溶解在 DMSO 中，或將等份指示劑儲備溶液解凍至室溫。在您選擇的緩沖液（例如 Hanks 和 Hepes 緩沖液）中用 0.04% Pluronic® F-127 制備 2 至 20 µM 的染料工作溶液。對于大多數(shù)細胞系，建議終濃度為 5-10 μM 的 SoNa™ 520。細胞加載所需指示劑的準確濃度必須根據(jù)經(jīng)驗確定。

注意：非離子洗滌劑 Pluronic® F-127 有時用于增加 SoNa™ 520 AM 的水溶性?？梢詮陌傥炠徺I各種 Pluronic® F-127 溶液。

注意：如果您的細胞含有有機陰離子轉運蛋白，可將丙H舒 (1-2 mM) 添加到染料工作溶液中（孔中的最終濃度為 0.5-1 mM），以減少脫酯指示劑的泄漏。各種 ReadiUse™ 丙H舒產(chǎn)品，包括水溶性、鈉鹽和穩(wěn)定溶液，均可從百螢購買。

操作步驟

以下是我們推薦的將 AM 酯加載到活細胞中的方案。該步驟僅提供指導，實際應根據(jù)您的具體需求進行修改。

1.在生長培養(yǎng)基中培養(yǎng)細胞過夜。

2.第二天，將 1X SoNa™ 520 AM 工作溶液添加到細胞板中。

注意：如果您的化合物干擾血清，請在上樣前用新鮮的 HHBS 緩沖液替換生長培養(yǎng)基。

3.將載有染料的孔板/培養(yǎng)板在細胞培養(yǎng)箱中于 37°C 下孵育 1 至 2 小時。

注意：孵育染料超過 2 小時可以提高某些細胞系的信號強度。

4.用 HHBS 或您選擇的緩沖液（包含陰離子轉運蛋白抑制劑，例如 1 mM 丙H舒，如果適用）替換染料工作溶液，以去除任何多余的探針。

5.根據(jù)需要添加刺激劑，同時使用配備 FITC 濾光片組的熒光顯微鏡或包含可編程液體處理系統(tǒng)（例如 FDSS、FLIPR 或 FlexStation）的熒光酶標儀在 Ex/Em = 490/525 nm 處測量熒光。