圖1.時間分辨熒光能量轉(zhuǎn)移（TR-FRET）是時間分辨熒光法（TRF）與F?rster共振能量轉(zhuǎn)移（FRET）的實際結(jié)合，為藥物發(fā)現(xiàn)研究人員提供了強大的工具。 TR-FRET將TRF的低背景方面與FRET的均相測定形式結(jié)合在一起。除更高的通量和更少的假陽性/假陰性結(jié)果外，所得測定法還提高了靈活性，可靠性和靈敏性。 FRET涉及兩個熒光團，一個供體（例如trFluor Eu和trFluor Tb）和一個受體。如果能量源（例如閃光燈或激光器）對供體的激發(fā)，則如果兩者在給定的彼此鄰近范圍內(nèi)，則將能量轉(zhuǎn)移至受體。受體繼而以其特征波長發(fā)射光。該技術(shù)的FRET方面受多種因素驅(qū)動，包括光譜重疊和所涉及的熒光團的鄰近性，其中僅當施主與受主之間的距離足夠小時才發(fā)生能量轉(zhuǎn)移。實際上，F(xiàn)RET系統(tǒng)的特征在于F?rster半徑（R0）：FRET效率為50％時熒光團之間的距離。對于許多FRET配對，R0介于20至90?之間，具體取決于所使用的受體和檢測中熒光團的空間排列。通過測量這種能量轉(zhuǎn)移，可以通過將每個配偶與熒光標記偶聯(lián)并檢測能量轉(zhuǎn)移的水平來評估生物分子之間的相互作用?？梢詸z測受體發(fā)射作為能量轉(zhuǎn)移的量度，而無需將結(jié)合的與未結(jié)合的測定成分分開（例如過濾或洗滌步驟），從而減少了測定時間和成本。