樣品實(shí)驗(yàn)方案

溶液配制

工作溶液

Cyber Orange 工作溶液（1X）：
通過將10,000X儲(chǔ)備試劑稀釋到pH 7.5-8緩沖液（例如TAE，TBE或TE，最好是pH 8.0）中來制成1X Cyber Orange 工作溶液。 注意：  在水中配制的染色溶液比在緩沖液中配制的溶液不穩(wěn)定，必須在24小時(shí)內(nèi)使用以確保Z大的染色敏感性。 注意：  此外，在pH低于7.5或高于8.0的緩沖液中制備的染色溶液穩(wěn)定性較差，并且染色效果降低。

操作步驟

1.染色后方案

1.1根據(jù)您的標(biāo)準(zhǔn)方案運(yùn)行凝膠。

1.2將凝膠放在合適的聚丙烯容器中。輕輕加入足量的1X Cyber Orange 工作溶液以浸沒凝膠。 注意：  請勿使用玻璃容器，因?yàn)樗鼤?huì)吸收染色溶液中的許多染料。

1.3避開光線，在室溫下輕輕攪拌凝膠約30分鐘。 注意：  染色溶液可以在黑暗中（冷藏）保存一周，并可以重復(fù)使用2-3次。

1.4使用長路徑綠色濾光片（例如SYBR®濾光片或GelStar®濾光片），使用254 nm透照器或基于激光的凝膠掃描儀對染色的凝膠成像。

2.預(yù)染方案

2.1使用標(biāo)準(zhǔn)方案準(zhǔn)備瓊脂糖凝膠溶液。

2.2在凝膠中添加1X Cyber Orange™工作溶液并充分混合。

2.3根據(jù)您的標(biāo)準(zhǔn)方案運(yùn)行凝膠。

2.4使用長路徑綠色濾光片（例如SYBR®濾光片或GelStar®濾光片），使用254 nm透照器或基于激光的凝膠掃描儀對染色的凝膠成像。

3.電泳前的DNA染色

3.1電泳前，將DNA與染料的1：1000至1：3000稀釋液（在TE，TBE或TAE中）孵育至少15分鐘。

3.2根據(jù)您的標(biāo)準(zhǔn)方案運(yùn)行凝膠。

3.3使用254 nm透照器或使用長距離綠色濾光片（例如SYBR®濾光片或GelStar®濾光片）的基于激光的凝膠掃描儀對染色的凝膠成像。