以下程序適用于大多數(shù)細(xì)胞類型。生長(zhǎng)培養(yǎng)基，細(xì)胞密度，其他細(xì)胞類型的存在和其他因素可能影響染色。玻璃器皿上的殘留洗滌劑也可能影響許多生物的真實(shí)或明顯染色，導(dǎo)致在有或沒有細(xì)胞存在的溶液中出現(xiàn)明亮染色的物質(zhì)。

1）制備1-10mM DMSO儲(chǔ)備溶液。如果儲(chǔ)存在-20°C，DMSO儲(chǔ)備液可以保存6個(gè)月。

2）使用適合您樣品的固定方案。

3）通過離心沉淀細(xì)胞，并將細(xì)胞重懸于緩沖鹽溶液或培養(yǎng)基中，在pH 7.4下進(jìn)行佳染料染色。培養(yǎng)物中的貼壁細(xì)胞可以在蓋玻片上或細(xì)胞培養(yǎng)孔中原位染色。

4）使用1和10μM之間的濃度添加AO染色并孵育15至60分鐘作為指導(dǎo)。

注意：在初的實(shí)驗(yàn)中，好在整個(gè)建議的范圍內(nèi)嘗試幾種染料濃度，以確定產(chǎn)生佳染色的濃度。