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目錄:上海帛科生物技術(shù)有限公司>>生化檢測(cè)試劑盒>>三羧酸循環(huán)系列>> 丙酮酸(PA)含量測(cè)試盒微量法

丙酮酸(PA)含量測(cè)試盒微量法
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參考價(jià) 面議
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
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更新時(shí)間:2023-12-27 13:53:33瀏覽次數(shù):1019評(píng)價(jià)

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貨號(hào) BK-01S6589
丙酮酸(PA)含量測(cè)試盒微量法公司正在出售的產(chǎn)品:Fraser培養(yǎng)基 英文名稱:Fraser Medium 產(chǎn)品規(guī)格:250g PALCAM添加劑1 英文名稱: 產(chǎn)品規(guī)格:1ml/支*5 LPM瓊脂 英文名稱:LPM Agar 產(chǎn)品規(guī)格:250g 改良緩沖蛋白胨水(MBP) 英文名稱:Modified Buffered Peptone Water 產(chǎn)品規(guī)格:250g

實(shí)驗(yàn)結(jié)果判斷我有妙招:

1、定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。

2、以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2~3SD,作為陽(yáng)性結(jié)果的閾值。

3、以P/N值(陽(yáng)性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽(yáng)性,P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑,P/N小于1.5為陰性。

4、ELISA試劑盒目測(cè)定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽(yáng)性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照,與陰性對(duì)照的顏色接近者,判定為陰性。

與您分享常用不穩(wěn)定試劑的分類及要求:

① 易揮發(fā)、低燃點(diǎn)的試劑要密封,放于陰涼、通風(fēng)、遠(yuǎn)離火源處保存。

② 與水蒸氣,水發(fā)生反應(yīng)的物質(zhì)要密封,并遠(yuǎn)離水源保存。

③ 易與氧氣作用的試劑,應(yīng)將其固體或晶體密封保存,不宜長(zhǎng)期存放其水溶液,亞硫酸,氫硫酸溶液要密封存放,鉀,鈉,白磷更要采用液封形式。

④ 與二氧化碳反應(yīng)的物質(zhì)要密封保存,其相應(yīng)的溶液較固體更易反應(yīng),所以更要注意密封保存。

⑤ 易揮發(fā)或自身分解的試劑要密封,放于陰涼通風(fēng)處保存。

本試劑盒僅供研究使用公司實(shí)驗(yàn)室提供免費(fèi)代測(cè),7個(gè)工作日出結(jié)果,提供原始數(shù)據(jù)!

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

檢測(cè)方法

貨號(hào)

丙酮酸(PA)含量測(cè)試盒微量法

100管/96樣

微量法

BK-01S6589

商品介紹:

測(cè)定意義:

丙酮酸通過乙酰CoA連接葡萄糖、脂肪酸和氨基酸三大代謝,起著重要的樞紐作用。

測(cè)定原理:

丙酮酸與2,肼作用,生成丙酮酸-2,腙,在堿性溶液中呈櫻紅色。

需自備的儀器和用品:

可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰、蒸餾水。

試劑組成和配制:

提取液:液體 100 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑一:液體 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。

試劑二:液體 15 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑三:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑四:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。
11.png

操作步驟:

1. 樣品的準(zhǔn)備:

a. 細(xì)胞樣品的準(zhǔn)備:收集細(xì)胞,用4 ℃或冰浴預(yù)冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預(yù)冷組織細(xì)胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動(dòng)勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心,取上清作為待測(cè)樣品。

b. 組織樣品的準(zhǔn)備:動(dòng)物用生理鹽水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細(xì)胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動(dòng)勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心,取上清作為待測(cè)樣品。

d. 使用BCA蛋白濃度測(cè)定試劑盒(P1511)測(cè)定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細(xì)胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個(gè)活力單位左右(不同細(xì)胞和組織的差異會(huì)比較大,該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準(zhǔn)備20-100 ug蛋白量通常已經(jīng)足夠用于后續(xù)檢測(cè)。

e. 根據(jù)蛋白濃度和預(yù)計(jì)的蛋白使用量,用試劑盒提供的SOD檢測(cè)緩沖液適當(dāng)稀釋樣品。例如,小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準(zhǔn)備好的樣品如果當(dāng)天測(cè)定,可以冰浴保存;如果當(dāng)天不能完成測(cè)定,可以-70 ℃凍存,但建議盡量當(dāng)天完成測(cè)定。

2. 試劑盒的準(zhǔn)備工作:

a. WST-8酶工作液的配制: 參照下表,根據(jù)待檢測(cè)樣品(包括標(biāo)準(zhǔn)品) 數(shù)量,配制適量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可當(dāng)天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。

注意:由于酶溶液的用量較少且易沉降,必須注意在使用前先輕輕離心一下,然后適當(dāng)混勻后再使用。

b. 反應(yīng)啟動(dòng)工作液配制:將試劑盒提供的反應(yīng)啟動(dòng)液 (40X) 溶解后混勻,按1μl 反應(yīng)啟動(dòng)液(40X) 加入39μl SOD 檢測(cè)緩沖液的比例進(jìn)行稀釋,即為反應(yīng)啟動(dòng)工作液。4℃或冰浴保存,可當(dāng)天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。

c. (可選做) SOD 標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)備:需自備SOD標(biāo)準(zhǔn)品,用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標(biāo)準(zhǔn)品稀釋至如下系列濃度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在隨后的檢測(cè)中可以各取20微升,參考樣品進(jìn)行檢測(cè)。說明:為避免稀釋后SOD酶活性的下降, SOD標(biāo)準(zhǔn)品宜現(xiàn)稀釋現(xiàn)使用;本試劑盒對(duì)于SOD的檢測(cè)并不需要SOD作為標(biāo)準(zhǔn)品,但可以使用SOD標(biāo)準(zhǔn)品作為陽(yáng)性對(duì)照或作為對(duì)SOD活性定量的參考。

25mL IEF Sample Buffer,4X,pH 3-7  IEF Sample Buffer,4X,pH 3-7  常溫保存

1mL Real-Time PCR稀釋液 Diluent for Real-Time PCR  -20℃保存

2 ug pLV-CMV-EGFP pLV-CMV-EGFP 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

布氏桿菌種子培養(yǎng)基  250g

1瓶 NCI-H446/VP細(xì)胞株 NCI-H446/VP 低溫運(yùn)輸和保存

50次 DNA電泳分子量標(biāo)準(zhǔn)(100-600bp) DNAMETER 4℃保存

1g  Bacitracin 室溫避光保存

500mL Tris-HCl Buffer,1.0M,pH7.2   Tris-HCl Buffer,1.0M,pH7.2   常溫保存

1mg 重組蛋白L Recombinant Protein L -20℃保存

2 ug pUB6/V5 His lacZ pUB6/V5 His lacZ 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

50次 柱式昆蟲DNAout Column Insect DNAOUT 常溫

丙酮酸(PA)含量測(cè)試盒微量法Phospho-Jak1 (Tyr1022/1023)  磷酸化蛋白質(zhì)酪激JAK-1抗體 規(guī)格: 0.1mlRNF157  環(huán)指蛋白157抗體 規(guī)格: 0.2ml

KNL2/C14orf106  14號(hào)染色體開放閱讀框106抗體 規(guī)格: 0.2mlRabbit Anti-rat IgM/Cy7  Cy7標(biāo)記的兔抗大鼠IgM 規(guī)格: 0.1ml

phospho-Alpha synuclein (Tyr136)  磷酸化核突觸蛋白α抗體 規(guī)格: 0.1mlPTPN11  蛋白酪磷酸2抗體 規(guī)格: 0.1ml

NGX6  鼻咽細(xì)胞相關(guān)基因6抗體 規(guī)格: 0.1mlCKAP2  細(xì)胞骨架相關(guān)蛋白2/瘤和微管相關(guān)蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

Acetyl-Histone H1b(K53)  乙?;M蛋白H1b抗體 規(guī)格: 0.2mlRASGAP  RAS的GTP激活蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

CD158a/KIR2DL1  NK細(xì)胞抑制性受體2DL1抗體 規(guī)格: 0.2mlRabbit Anti-Guinea pig IgG/Cy3  Cy3標(biāo)記的兔抗豚鼠IgG 規(guī)格: 0.1ml

Goat Anti-Guinea pig IgG/Alexa Fluor 488  Alexa Fluor 488標(biāo)記的羊抗豚鼠IgG 規(guī)格: 0.1mlAlpha s1 Casein  α-s1酪蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

CNTN4/AXCAM  軸突相關(guān)粘附分子抗體 規(guī)格: 0.2mlSalmonella enteritidis H  傷鞭毛抗原H抗體 規(guī)格: 0.2ml

Rabbit Anti-horse IgM/Cy5  Cy5標(biāo)記的兔抗馬IgM 規(guī)格: 0.1mlMRGX1/MRGPRC/SNSR  G蛋白偶聯(lián)受體MRGX1抗體 規(guī)格: 0.1ml

X protein/HB-X (middle)  抗乙肝毒X蛋白抗體 規(guī)格: 0.2mlTRAILR1/DR4/APO2  死亡受體4抗體 規(guī)格: 0.1ml

Urocortin  尿皮質(zhì)素抗體 規(guī)格: 0.2mlRNF43  環(huán)指蛋白43抗體 規(guī)格: 0.2ml

MeCP2  甲基化CpG結(jié)合蛋白2抗體 規(guī)格: 0.1mlPectinesterase  果膠抗體 1ml

 


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