目錄:上海帛科生物技術有限公司>>生化檢測試劑盒>>脂肪酸代謝系列>> ATP檸檬酸裂解酶（ACL）測試盒紫外分光光度
| 貨號 | BK-01S6664 |
|---|
實驗方法學：
一、肝素的配制：
市售肝素凍干粉140單位/mg，1克瓶裝，每瓶140，000單位，稱取0.1克肝素凍干粉，加生理鹽水5ml，配成2800單位/ml。取50～100μl濕潤管壁，可抗凝人血3～5ml，血液不會凝固。老鼠血易凝固，所以最好更濃一些?？梢匀?.1克肝素凍干粉，加3ml生理鹽水溶解后，取50～100μl,可抗凝鼠血2～4ml。
肝素抗凝管的制備：取0.1克肝素凍干粉，加2.5ml生理鹽水。取100μl～150μl滴入塑料或玻璃管中，濕潤管壁，低于80℃小烤箱中（可以用烤面包的小烤箱），橫向轉動，每隔5～10分鐘轉動一次，直至干燥后放入4℃保存，可使2～5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集：
全血根據(jù)收集的條件，分成不抗凝和抗凝兩種。同時，不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清；抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1～2小時，直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血，輕輕顛倒充分抗凝后，可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征，選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及。
選擇抗凝的注意點：
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致，同時所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒，充分抗凝，防止部分血液未接觸到抗凝劑而導致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多（1ml抗凝全血能分離出0.4～0.5ml血漿）;
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后，解凍時可能會出現(xiàn)絮狀渾濁，如有則需要離心去掉渾濁后
用于測定。
特別提醒：本產(chǎn)品僅供科研研究使用，不得用于人體臨床直接檢測。
產(chǎn)品名稱：ATP檸檬酸裂解酶（ACL）測試盒紫外分光光度法
產(chǎn)品規(guī)格：50管/48樣
檢測方法：紫外分光光度法
產(chǎn)品貨號：BK-01S6664
產(chǎn)品分類：脂肪酸代謝系列
商品介紹：
測定意義: ACL（EC4.1.3.8）是脂肪酸合成中的關鍵酶，其催化產(chǎn)生的乙?？捎糜谥舅岷铣珊吞兼溠娱L、黃酮類物質合成、氨基酸合成等。 測定原理： ACL在ATP和存在的情況下催化檸檬酸裂解為乙酰、草酰乙酸、腺苷二磷酸和磷酸鹽。蘋果酸脫氫酶進一步催化草酰乙酸和NADH生成蘋果酸和NAD+，在340nm測定NADH減少速率，計算ACL活性。 需自備的儀器和用品： 紫外分光光度計、臺式離心機、水浴鍋、移液器、1mL石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水 |
所需的儀器和用品：
可見分光光度計、1mL 玻璃比色皿（光徑 1cm）、低溫離心機、移液器、研缽、冰和蒸餾水
四、超氧化物歧化酶（SOD）的測定：
建議正式實驗前選取 2 個樣本做預測定，了解本批樣品情況，熟悉實驗流程，避免實驗
樣本和試劑浪費！
1、樣本制備
① 組織樣本： 取約 0.1g 組織（水分充足的樣本可取 0.25g），加入 1mL 提取液，在 4oC 或冰浴進行 勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min，取上清作為待測液。 【注】：若增加樣本量，可按照組織質量（g）：提取液體積(mL)為 1：5~10 的比例進行提取
| ② 細菌/細胞樣本： 先收集細菌或細胞到離心管內，離心后棄上清；取約 500 萬細菌或細胞加入 1mL 提取液，超聲波破碎細菌或細胞（冰浴，功率 200W，超聲 3s，間隔 10s，重復 30 次）； 12000rpm 4℃離心 10min，取上清，置冰上待測。 【注】：若增加樣本量，可按照細菌/細胞數(shù)量（10 4）：提取液（mL）為 500~1000：1 的比例進行提取。 ③ 液體樣本：直接檢測；若渾濁，離心后取上清檢測。 |
注意事項：
1、試劑二為酶，不可冷凍，使用時在冰上放置。
2、對照管只需要做一管。
3、若對照管吸光值大于2，建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用（10μl試劑二原液+60μl蒸餾水）。
4、SOD為什么有的樣本測定管大于對照管，對照管數(shù)值在什么范圍？
對照管的范圍是0.8-2。對照管吸光值過低可能是（1）試劑二或試劑四沒有現(xiàn)配現(xiàn)用；（2)沒有按順序加試劑；（3）反應時間不夠，可以延長反應時間（反應時間30min可以延長到40min）。對照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應倍數(shù)。
若出現(xiàn)測定管大于對照管，可能是樣本中雜質的影響太大，為了降低雜質的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測，通常可以使測定正常。計算公式中乘以相應稀釋倍數(shù)。
李斯特氏菌顯色培養(yǎng)基 Listera Chromogenic Medium 1000(ML)
10mL RNA洗脫液 RNA Elution Buffer 常溫
2 ug pDONR/Zeo pDONR/Zeo 低溫運輸，-20℃保存
NAC瓊脂培養(yǎng)基 NAC Agar Medium 250g
50mg 丙酮酸激 Pyruvate Kinase 4℃保存
50T 嗜水氣單胞菌PCR檢測試劑盒 低溫運輸，-20℃保存
2 mg PD 98059（MAPKK抑制劑） Cell Apoptosis Inducer and Inhibitor -20℃保存
250mL Formalin-Zinc Solution Formalin-Zinc Solution 常溫保存
5次 BCIP-NBT法辛雜交檢測試劑盒 BCIP-NBT DIG Detection Kit 10×封堵液和BCIP-NBT濃縮液需要-20℃保存，AP標記的抗DIG抗體需要4℃保存
250mL HEPES Lysis Buffer with Triton HEPES Lysis Buffer with Triton 常溫保存
60g/L氯化鈉蛋白胨肉湯 60g%/L NaCl Peptone Water 250g
ATP檸檬酸裂解酶（ACL）測試盒紫外分光光度法phospho-CTNNA1 (Ser641) 磷酸化α-連環(huán)蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml
Rabbit Anti-Goat IgM/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5標記的兔抗羊IgM 規(guī)格: 0.1ml
Listeria tropina 李斯特菌菌體蛋白抗體 規(guī)格: 1ml
phospho-STAT6(Tyr641) 磷酸化信號轉導和轉錄激活因子6抗體 規(guī)格: 0.1ml
BEND2/CXorf56 BEND2蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml
phospho-Eg5(Tyr92) 磷酸化驅動蛋白樣蛋白1抗體 規(guī)格: 0.1ml
NFAT1/NFATc2 核因子活化T細胞胞漿蛋白2抗體 規(guī)格: 0.1ml
PIBF 孕激素誘導阻斷因子抗體 規(guī)格: 0.2ml
APOL3 載脂蛋白L3抗體 規(guī)格: 0.2ml
CXCL13/BCA1 B-淋巴細胞趨化因子抗體 規(guī)格: 0.1ml
CEA 胚抗原抗體 規(guī)格: 0.1ml
Thymosin beta 4 胸素β4抗體 規(guī)格: 0.2ml
6
環(huán)保在線