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目錄:上海帛科生物技術(shù)有限公司>>生化檢測試劑盒>>脂肪酸代謝系列>> 肝脂酶(HL)測試盒可見分光光度法

肝脂酶(HL)測試盒可見分光光度法
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更新時間:2023-12-26 19:14:00瀏覽次數(shù):515評價

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貨號 BK-01S6646
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實驗方法學(xué):

一、肝素的配制:

市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。

肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動,每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。

二、血液樣本的收集:

全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時,不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。

1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時,直接低速離心分離出血清待用或保存。

2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及。

選擇抗凝的注意點:

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后

用于測定。

特別提醒:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。

產(chǎn)品名稱:肝脂酶(HL)測試盒可見分光光度法

產(chǎn)品規(guī)格:50管/24樣

檢測方法:可見分光光度法

產(chǎn)品貨號:BK-01S6646

產(chǎn)品分類:脂肪酸代謝系列
商品介紹:

測定意義:

肝酯酶是脂肪分解酶,在肝實質(zhì)細(xì)胞中合成,存在于肝臟竇周間隙內(nèi)皮細(xì)胞表面和竇周間隙腔面的肝細(xì)胞微絨毛表面,可促進(jìn)脂蛋白中的向類固醇激素轉(zhuǎn)化,血漿中的HL活性增高時,血漿中小顆??蓪?dǎo)致LDL水平升高,加速動脈粥樣硬化的發(fā)生。

測定原理

肝酯酶水解α-乙酸萘酯產(chǎn)生α-萘酚,可與固藍(lán)B鹽形成紫紅色偶氮化合物,在595nm有特征吸收峰,顏色深淺在一定范圍內(nèi)與肝酯酶活性成正相關(guān)。

自備實驗用品及儀器

天平、冷凍離心機(jī)、研缽、水浴鍋、可見分光光度計、1 mL玻璃比色皿。

所需的儀器和用品:

可見分光光度計、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機(jī)、移液器、研缽、冰和蒸餾水

四、超氧化物歧化酶(SOD)的測定:

建議正式實驗前選取 2 個樣本做預(yù)測定,了解本批樣品情況,熟悉實驗流程,避免實驗

樣本和試劑浪費!

1、樣本制備

組織樣本:

取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進(jìn)行

勻漿(或使用各類常見勻漿器)4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測液。

【注】:若增加樣本量,可按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)15~10 的比例進(jìn)行提取

 

細(xì)菌/細(xì)胞樣本:

先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;取約 500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL

提取液,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次);

12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。

【注】:若增加樣本量,可按照細(xì)菌/細(xì)胞數(shù)量(10

4):提取液(mL)為 500~10001 的比例進(jìn)行提取。 液體樣本:直接檢測;若渾濁,離心后取上清檢測。

QQ截圖20220307153537.png 

注意事項:

1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時在冰上放置。

2、對照管只需要做一管。

3、若對照管吸光值大于2,建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用(10μl試劑二原液+60μl蒸餾水)。

4、SOD為什么有的樣本測定管大于對照管,對照管數(shù)值在什么范圍?

對照管的范圍是0.8-2。對照管吸光值過低可能是(1)試劑二或試劑四沒有現(xiàn)配現(xiàn)用;(2)沒有按順序加試劑;(3)反應(yīng)時間不夠,可以延長反應(yīng)時間(反應(yīng)時間30min可以延長到40min)。對照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應(yīng)倍數(shù)。

若出現(xiàn)測定管大于對照管,可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大,為了降低雜質(zhì)的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測,通??梢允箿y定正常。計算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)。

50T 人線粒體DNA11778位點突變PCR測定試劑盒  低溫運輸,-20℃保存

5 mg H-89 . 2HCL(PKA抑制劑) Cell Apoptosis Inducer and Inhibitor -20℃保存

250mL Dialysis Tubing Wash Buffer(透析袋洗滌液),5X Dialysis Tubing Wash Buffer,5X 常溫保存

100mL 超級雜交液A(不含甲酰胺) SuperHyb Solution -20℃保存

2 ug PiggyBac 5’LTR PiggyBac 5’LTR 低溫運輸,-20℃保存

100mL Western印跡膜封膜液(尼龍膜) Western Blot Blocking Buffer 4℃保存

1瓶 Ketr-3細(xì)胞株 Ketr-3 低溫運輸和保存

2×YT肉湯 2×YT Broth 250g

100mg 醛縮 Aldolase  4℃保存

100mL TABS Buffer,0.2M,pH9.0   TABS Buffer,0.2M,pH9.0   常溫保存

1 管 1A75枯草桿菌     1A75 Bacillus subtilis Strain -80℃保存

肝脂酶(HL)測試盒可見分光光度法Rho C  RhoC抗體 規(guī)格: 0.1mlBTBD1/HCV NS5A transactivated protein 8  丙肝毒NS5A反轉(zhuǎn)錄蛋白8抗體 規(guī)格: 0.2ml

Goat anti-Bovine IgG whole serum  羊抗牛IgG抗清 規(guī)格: 1mlTransglutaminase  轉(zhuǎn)谷1抗體 規(guī)格: 0.1ml

MyoD1/Myf3  肌原調(diào)節(jié)蛋白抗體 規(guī)格: 0.1mlCadherin 9  鈣粘附蛋白9抗體 規(guī)格: 0.2ml

EP3  前列素E受體3抗體 規(guī)格: 0.1mlCCDC75  卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白75抗體 規(guī)格: 0.2ml

SBP1/Selenium Binding Protein 1  結(jié)合蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2mlCD83/HB15  CD83抗體 規(guī)格: 0.2ml

Rabbit Anti-mouse IgG-Fc/Cy7  Cy7標(biāo)記的兔抗小鼠IgG-Fc 規(guī)格: 0.1mlMouse Anti-human IgM/PE-Cy7  PE-Cy7標(biāo)記的小鼠抗人IgM 規(guī)格: 0.1ml

Tubulin-alpha  微管蛋白α抗體 Tubulin α 規(guī)格: 0.1mlCCDC37  卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白37抗體 規(guī)格: 0.2ml

FMNL1  成蛋白相關(guān)蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2mlMFAP1  微原纖維膠原相關(guān)蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2ml

ESM1  內(nèi)皮細(xì)胞特異性分子1抗體 規(guī)格: 0.1mlFerritin Light Chain  鐵蛋白輕鏈抗體 規(guī)格: 0.1ml

MMP9  基質(zhì)金屬蛋白9抗體 0.1mlC1orf129  1號染色體開放閱讀框129抗體 規(guī)格: 0.2ml

CYP11A1/P450SCC  細(xì)胞色素P450 11A1抗體 規(guī)格: 0.1mlCCDC148  卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白148抗體 規(guī)格: 0.2ml

ATG8/GABARAPL2  G1氨基丁酸A型受體相似蛋白2抗體 規(guī)格: 0.2mlSLC40A1/FPN1  細(xì)胞膜鐵轉(zhuǎn)運蛋白FP1抗體 規(guī)格: 0.1ml 

 


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