目錄:上海帛科生物技術(shù)有限公司>>生化檢測(cè)試劑盒>>糖代謝系列>> 纖維素含量（CLL）測(cè)試盒可見(jiàn)分光光度法
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更新時(shí)間：2023-12-25 16:53:46瀏覽次數(shù)：867評(píng)價(jià)
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| 貨號(hào) | BK-01S6772 |
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注意事項(xiàng)：
1、試劑二為酶，不可冷凍，使用時(shí)在冰上放置。
2、對(duì)照管只需要做一管。
3、若對(duì)照管吸光值大于2，建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用（10μl試劑二原液+60μl蒸餾水）。
4、SOD為什么有的樣本測(cè)定管大于對(duì)照管，對(duì)照管數(shù)值在什么范圍？
對(duì)照管的范圍是0.8-2。對(duì)照管吸光值過(guò)低可能是（1）試劑二或試劑四沒(méi)有現(xiàn)配現(xiàn)用；（2)沒(méi)有按順序加試劑；（3）反應(yīng)時(shí)間不夠，可以延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間（反應(yīng)時(shí)間30min可以延長(zhǎng)到40min）。對(duì)照管吸光值過(guò)高可能是試劑二未按操作說(shuō)明書(shū)稀釋相應(yīng)倍數(shù)。
若出現(xiàn)測(cè)定管大于對(duì)照管，可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大，為了降低雜質(zhì)的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測(cè)，通?？梢允箿y(cè)定正常。計(jì)算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)。
特別提醒：本產(chǎn)品僅供科研研究使用，不得用于人體臨床直接檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱：纖維素含量（CLL）測(cè)試盒可見(jiàn)分光光度法
產(chǎn)品規(guī)格：50管/48樣
檢測(cè)方法：可見(jiàn)分光光度法
產(chǎn)品貨號(hào)：BK-01S6772
產(chǎn)品分類：糖代謝系列
商品介紹：
測(cè)定意義: 纖維素是由葡萄糖組成的大分子多糖，通常與半纖維素、果膠和木質(zhì)素結(jié)合在一起，是植物細(xì)胞壁的主要結(jié)構(gòu)成分。纖維素是一種重要的膳食纖維，是自然界中分布*、含量最多的一種多糖。 測(cè)定原理： 纖維素為β－葡萄糖殘基組成的多糖，在酸性條件下加熱能分解成β－葡萄糖。β－葡萄糖在強(qiáng)酸作用下，可脫水生成β－糠醛類化合物。β－糠醛類化合物與蒽酮脫水縮合，生成糠醛衍生物。顏色的深淺可間接定量測(cè)定纖維素含量。 需自備的儀器和用品： 可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1 mL玻璃比色皿/96孔板、80％乙醇、丙酮、濃硫酸（不允許快遞）、研缽和蒸餾水。 |
所需的儀器和用品：
可見(jiàn)分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿（光徑 1cm）、低溫離心機(jī)、移液器、研缽、冰和蒸餾水
四、超氧化物歧化酶（SOD）的測(cè)定：
建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本做預(yù)測(cè)定，了解本批樣品情況，熟悉實(shí)驗(yàn)流程，避免實(shí)驗(yàn)
樣本和試劑浪費(fèi)！
1、樣本制備
① 組織樣本： 取約 0.1g 組織（水分充足的樣本可取 0.25g），加入 1mL 提取液，在 4oC 或冰浴進(jìn)行 勻漿(或使用各類常見(jiàn)勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min，取上清作為待測(cè)液。 【注】：若增加樣本量，可按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為 1：5~10 的比例進(jìn)行提取
| ② 細(xì)菌/細(xì)胞樣本： 先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；取約 500 萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL 提取液，超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞（冰浴，功率 200W，超聲 3s，間隔 10s，重復(fù) 30 次）； 12000rpm 4℃離心 10min，取上清，置冰上待測(cè)。 【注】：若增加樣本量，可按照細(xì)菌/細(xì)胞數(shù)量（10 4）：提取液（mL）為 500~1000：1 的比例進(jìn)行提取。 ③ 液體樣本：直接檢測(cè)；若渾濁，離心后取上清檢測(cè)。 |
實(shí)驗(yàn)方法學(xué)：
一、肝素的配制：
市售肝素凍干粉140單位/mg，1克瓶裝，每瓶140，000單位，稱取0.1克肝素凍干粉，加生理鹽水5ml，配成2800單位/ml。取50～100μl濕潤(rùn)管壁，可抗凝人血3～5ml，血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固，所以最好更濃一些?？梢匀?.1克肝素凍干粉，加3ml生理鹽水溶解后，取50～100μl,可抗凝鼠血2～4ml。
肝素抗凝管的制備：取0.1克肝素凍干粉，加2.5ml生理鹽水。取100μl～150μl滴入塑料或玻璃管中，濕潤(rùn)管壁，低于80℃小烤箱中（可以用烤面包的小烤箱），橫向轉(zhuǎn)動(dòng)，每隔5～10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次，直至干燥后放入4℃保存，可使2～5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集：
全血根據(jù)收集的條件，分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí)，不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清；抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1～2小時(shí)，直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血，輕輕顛倒充分抗凝后，可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征，選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及。
選擇抗凝的注意點(diǎn)：
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致，同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒，充分抗凝，防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多（1ml抗凝全血能分離出0.4～0.5ml血漿）;
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后，解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁，如有則需要離心去掉渾濁后
用于測(cè)定。
500mL Mcilvaine Buffer (Citrate Phosphate Buffer),0.2M,pH3.0 Mcilvaine Buffer (Citrate Phosphate Buffer),0.2M,pH3.0 常溫保存
0.25mL UTP溶液，100mM UTP Solution -20℃保存
2 ug pLVX-mCherry-C1 pLVX-mCherry-C1 低溫運(yùn)輸，-20℃保存
PEA瓊脂 HB7035 250g
1瓶 PC-3M-IE8細(xì)胞株 PC-3M-IE8 低溫運(yùn)輸和保存
萘啶酮酸 Nalidixic Acid 1.5mg/支*5
10g 幾丁質(zhì) Chitin 室溫干燥保存
500mL Zymogram Renaturation Buffer,10X Zymogram Renaturation Buffer,10X 常溫保存
5g DTT，蛋白級(jí) DTT，Protein Grade -20℃保存
2 ug pBBR1-MCS4 pBBR1-MCS4 低溫運(yùn)輸，-20℃保存
20次 一站式GST標(biāo)記蛋白質(zhì)微量純化套裝（溶破細(xì)胞） One-Stop GST-Tagged Protein Miniprep Pack 介質(zhì)需4℃保存，、Benzonase和PMSF需-20℃保存
纖維素含量（CLL）測(cè)試盒可見(jiàn)分光光度法ACOT8 酰基輔A硫酯8 0.2ml
ZNF185 鋅指蛋白185抗體 規(guī)格: 0.2ml
phospho-ATG4A(Ser100) 磷酸化自噬相關(guān)蛋白4A抗體 規(guī)格: 0.1ml
Rabbit Anti-Guinea pig IgG/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標(biāo)記的兔抗豚鼠IgG 規(guī)格: 0.1mlRabbit Anti-Bovine IgM/Cy3 Cy3標(biāo)記的兔抗牛IgM 規(guī)格: 0.1ml
Profilin 1 前纖維蛋白1抗體 規(guī)格: 0.1mlGMRP1/BTBD10 糖代謝相關(guān)蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2ml
Angiotensin II 管緊張素Ⅱ抗體 規(guī)格: 0.2mlSCN8A/Nav1.6 鈉通道蛋白8α抗體 規(guī)格: 0.1ml
Brs3/Bombesin Receptor 3 蛙皮素受體3抗體 規(guī)格: 0.1mlphospho-EGFR (Tyr869) 磷酸化表皮生因子受體抗體 規(guī)格: 0.1ml
NTAL B淋巴細(xì)胞鏈接激活蛋白抗體 規(guī)格: 0.2mlDonkey Anti-human IgG/APC APC標(biāo)記的驢抗人IgG 規(guī)格: 0.1ml
Phospho-Stat4 (Tyr693) 磷酸化信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子4抗體 規(guī)格: 0.1mlRabbit Anti-mouse IgM/Gold 膠體金標(biāo)記的兔抗小鼠IgM 規(guī)格: 0.5ml
FAIM2 FAS凋亡抑制分子2 規(guī)格: 0.2mlUCP-2 線粒體脫偶連蛋白2抗體 規(guī)格: 0.1ml
Phospho-Histone H3 (Thr11) 磷酸化組蛋白H3抗體 規(guī)格: 0.1mlUBE1/E1 Ubiquitin Activating Enzyme 泛素激活E1抗體 規(guī)格: 0.2ml
DHPS1 短鏈脫還原1抗體 規(guī)格: 0.2mlLRRC62 富含亮重復(fù)蛋白62抗體 規(guī)格: 0.2ml
(空格分隔,最多3個(gè),單個(gè)標(biāo)簽最多10個(gè)字符)
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