目錄:上海帛科生物技術(shù)有限公司>>生化檢測試劑盒>>光合作用系列>> 多聚半乳糖醛酸酶(PG)測試盒微量法
| 貨號 | BK-01S7018 |
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注意事項(xiàng)：
1、試劑二為酶，不可冷凍，使用時(shí)在冰上放置。
2、對照管只需要做一管。
3、若對照管吸光值大于2，建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用（10μl試劑二原液+60μl蒸餾水）。
4、SOD為什么有的樣本測定管大于對照管，對照管數(shù)值在什么范圍？
對照管的范圍是0.8-2。對照管吸光值過低可能是（1）試劑二或試劑四沒有現(xiàn)配現(xiàn)用；（2)沒有按順序加試劑；（3）反應(yīng)時(shí)間不夠，可以延長反應(yīng)時(shí)間（反應(yīng)時(shí)間30min可以延長到40min）。對照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應(yīng)倍數(shù)。
若出現(xiàn)測定管大于對照管，可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大，為了降低雜質(zhì)的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測，通常可以使測定正常。計(jì)算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)。
特別提醒：本產(chǎn)品僅供科研研究使用，不得用于人體臨床直接檢測。
產(chǎn)品名稱：多聚半乳糖醛酸酶(PG)測試盒微量法
產(chǎn)品規(guī)格：100管/48樣
檢測方法：微量法
產(chǎn)品貨號：BK-01S7018
產(chǎn)品分類：光合作用系列
商品介紹：
測定意義: 多聚半乳糖醛酸酶（EC3.2.1.15）是一種細(xì)胞壁結(jié)合蛋白，可以催化果膠分子中α-(1,4)-聚半乳糖醛酸的裂解，參與果膠的降解，使細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)解體，導(dǎo)致果實(shí)軟化，與果實(shí)成熟、葉和花的脫落、病原物防御，細(xì)胞伸展發(fā)育以及木質(zhì)化有關(guān)，在植物抗病性和食品貯藏保鮮領(lǐng)域具有較高的研究價(jià)值。 測定原理： 多聚半乳糖醛酸酶水解果膠酸生成半乳糖醛酸，具有還原性醛基，與DNS試劑反應(yīng)生成紅棕色物質(zhì)，在540nm有特征吸收峰，測定540nm處吸光值變化可計(jì)算得多聚半乳糖醛酸酶活性。 自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器： 天平、低溫離心機(jī)、可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、恒溫水浴鍋。 |
所需的儀器和用品：
可見分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿（光徑 1cm）、低溫離心機(jī)、移液器、研缽、冰和蒸餾水
四、超氧化物歧化酶（SOD）的測定：
建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本做預(yù)測定，了解本批樣品情況，熟悉實(shí)驗(yàn)流程，避免實(shí)驗(yàn)
樣本和試劑浪費(fèi)！
1、樣本制備
① 組織樣本： 取約 0.1g 組織（水分充足的樣本可取 0.25g），加入 1mL 提取液，在 4oC 或冰浴進(jìn)行 勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min，取上清作為待測液。 【注】：若增加樣本量，可按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為 1：5~10 的比例進(jìn)行提取
| ② 細(xì)菌/細(xì)胞樣本： 先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；取約 500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL 提取液，超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞（冰浴，功率 200W，超聲 3s，間隔 10s，重復(fù) 30 次）； 12000rpm 4℃離心 10min，取上清，置冰上待測。 【注】：若增加樣本量，可按照細(xì)菌/細(xì)胞數(shù)量（10 4）：提取液（mL）為 500~1000：1 的比例進(jìn)行提取。 ③ 液體樣本：直接檢測；若渾濁，離心后取上清檢測。 |
實(shí)驗(yàn)方法學(xué)：
一、肝素的配制：
市售肝素凍干粉140單位/mg，1克瓶裝，每瓶140，000單位，稱取0.1克肝素凍干粉，加生理鹽水5ml，配成2800單位/ml。取50～100μl濕潤管壁，可抗凝人血3～5ml，血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固，所以最好更濃一些。可以取0.1克肝素凍干粉，加3ml生理鹽水溶解后，取50～100μl,可抗凝鼠血2～4ml。
肝素抗凝管的制備：取0.1克肝素凍干粉，加2.5ml生理鹽水。取100μl～150μl滴入塑料或玻璃管中，濕潤管壁，低于80℃小烤箱中（可以用烤面包的小烤箱），橫向轉(zhuǎn)動(dòng)，每隔5～10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次，直至干燥后放入4℃保存，可使2～5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集：
全血根據(jù)收集的條件，分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí)，不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清；抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1～2小時(shí)，直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血，輕輕顛倒充分抗凝后，可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征，選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及。
選擇抗凝的注意點(diǎn)：
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致，同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒，充分抗凝，防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多（1ml抗凝全血能分離出0.4～0.5ml血漿）;
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后，解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁，如有則需要離心去掉渾濁后
用于測定。
5g 1- 萘胺 1-Naphthylamine -20℃保存
50T 氣單胞菌PCR檢測試劑盒 低溫運(yùn)輸，-20℃保存
250 μg Fluo-3 AM（鈣離子熒光探針） Fluorescent Probe and Tracer -20℃保存
25mL Bovine Gamma Globulin Solution，1mg/mL Bovine Gamma Globulin Solution，1mg/mL 常溫保存
50次 柱式DNA膠回收試劑盒 Column DNABACK 常溫保存
2 ug PGL2-enhancer PGL2-enhancer 低溫運(yùn)輸，-20℃保存
9號 250g
1瓶 Hela-GFP細(xì)胞株 Hela-GFP 低溫運(yùn)輸和保存
改良鹽緩沖液（PSB） Phosphate Buffered Saline 10ml*20支/包
50U Cre 重組 Cre Recombinase -20℃保存
250mL Sodium Phosphate Buffer（鈉緩沖液）,0.5M,pH7.6 Sodium Phosphate Buffer,0.5M,pH7.6 常溫保存
多聚半乳糖醛酸酶(PG)測試盒微量法ENaCg/γENaC 上皮鈉離子通道蛋白γ抗體 規(guī)格: 0.2mlLFABP/FABP-1 肝臟型脂肪酸結(jié)合蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml
Rabbit Anti-mouse IgG-Fc/HRP 辣根過氧化物標(biāo)記的兔抗小鼠IgG-Fc 規(guī)格: 0.1mlAMFR/Gp78/RNF45 環(huán)指蛋白45/自分泌運(yùn)動(dòng)因子受體抗體 規(guī)格: 0.2ml
ATGL 脂肪甘油三酯脂抗體 規(guī)格: 0.1mlRabbit Anti-rat IgM/PE PE標(biāo)記的兔抗大鼠IgM 規(guī)格: 0.1ml
CRLF2 胸基質(zhì)淋巴細(xì)胞生成素受體抗體 規(guī)格: 0.2mlCathepsin S 組織蛋白S抗體 規(guī)格: 0.2ml
FMRP/FMR1 脆性X智力低下蛋白抗體 規(guī)格: 0.2mlMCP1/CCL2 單核細(xì)胞趨化蛋白1抗體 規(guī)格: 0.1ml
phospho-HDAC8(Ser39) 磷酸化組蛋白去乙?；?抗體 規(guī)格: 0.1mlDAP-5/p97 死亡相關(guān)蛋白5抗體 規(guī)格: 0.1ml
Cyclin E2 周期素E2抗體 規(guī)格: 0.2mlRabbit Anti-human IgG F(ab')2/HRP 辣根過氧化物標(biāo)記的兔抗人IgG F(ab')2 規(guī)格: 0.1ml
SARS putative orflab polyprotein 抗體 規(guī)格: 0.2mlTIP30 TIP30蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml
phospho-IKK gamma (Ser85) 磷酸化KB抑制蛋白激γ抗體 規(guī)格: 0.1mlNCKAP1 膜相關(guān)的蛋白質(zhì)HEM2抗體 規(guī)格: 0.2ml
BMP5 骨形態(tài)發(fā)生蛋白5抗體 規(guī)格: 0.1mlATH III 抗凝3抗體 規(guī)格: 0.2ml
APC5 細(xì)胞分裂周期蛋白5抗體 規(guī)格: 0.2mlFAM98B FAM98B蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml
Endothelial lipase 內(nèi)皮脂肪抗體 規(guī)格: 0.2mlSAMD7 SAMD7蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml
(空格分隔,最多3個(gè),單個(gè)標(biāo)簽最多10個(gè)字符)
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環(huán)保在線