蛋白質(zhì)N-端測定技術服務
蛋白質(zhì)N-端測定技術服務服務簡介
幾乎所有的蛋白合成都起始于N-端，蛋白質(zhì)N-端的序列組成對于蛋白質(zhì)整體的生物學功能有著巨大的影響力。例如N-端序列影響蛋白質(zhì)的半衰期，同時關聯(lián)著蛋白亞細胞器定位等，這些與蛋白的功能和穩(wěn)定息息相關，重組蛋白表達純化產(chǎn)物的分析過程，特別是重組蛋白品的研發(fā)和工藝建立過程，需要對蛋白進行N-端測序分析，有利于幫助分析蛋白質(zhì)的高級結構，揭示蛋白質(zhì)的生物學功能。
目前對蛋白N端測序主要分類兩大類，其一為非質(zhì)譜技術，例如經(jīng)典的Edman降解法、利用反轉(zhuǎn)錄RT-PCR得到對應蛋白的cDNA，再來反推得到蛋白序列；其二為質(zhì)譜技術。各自都有其使用的長處和制約之處，目前，市面上采用的，依然是基于經(jīng)典的Edman降解法原理，利用美國ABI公司Procise491蛋白序列測序系統(tǒng)進行蛋白N-端測序。
蛋白質(zhì)和多肽N-端測序技術是以Edman化學降解法為基礎的，Edman化學降解，其基本原理是包括通過異硫氰酸苯脂與蛋白質(zhì)和多肽的N-端殘基的偶聯(lián)，苯氨基硫甲酰酞（PTC-肽）環(huán)化裂解，和噻唑呤酮苯氨（ATZ）轉(zhuǎn)化為苯異硫尿氨基酸（PTH-氨基酸）三個主要的化學步驟，每個循環(huán)從蛋白質(zhì)與多肽裂解一個氨基酸殘基，同時暴露出新的游離的氨基酸進行下一個Edman降解，通過轉(zhuǎn)移的PTH-氨基酸鑒定實現(xiàn)蛋白質(zhì)序列的測定。
樣品要求
1 蛋白凍干粉，蛋白溶液，固定在PVDF膜上的蛋白（NC膜不可以）。轉(zhuǎn)膜的蛋白質(zhì)，需去離子水充分洗滌干凈，同時保證每條膜上蛋白量大于1ug。
2、蛋白濃度>1mg/ml， 小量不得低于10Pmol，蛋白純度>90%，測序樣品不返還。
3、蛋白溶液不含鹽，緩沖液，變性劑（SDS）等雜質(zhì);標明樣品緩沖液的成分。
4、天然純化多肽樣品：HPLC純度>95%，提供約100ug
5、如果已知蛋白表觀分子量或理論的蛋白質(zhì)序列，請說明。
服務優(yōu)勢
一站式服務：樣品處理-上機分析-數(shù)據(jù)分析-項目報告
檢測能力： N 端連續(xù) 60 個以上的氨基酸
快速檢測：合格樣品，1 個工作日可以出結果
專業(yè)的技術服務團隊
