傅經(jīng)理
產(chǎn)品品牌:ZCIBIO(茁彩生物)
產(chǎn)品名稱:大鼠趨化因子2(CXCL2)ELISA試劑盒
英文名稱:Rat CXCL2 ELISA kit
產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T
實(shí)驗(yàn)樣本:血清、血漿、組織、細(xì)胞上清或其他生物樣本
應(yīng)用領(lǐng)域:大鼠趨化因子2(CXCL2)ELISA試劑盒僅供科研實(shí)驗(yàn)使用,不得用于臨床診斷
我的標(biāo)準(zhǔn)曲線是平的或者是非線性的,這可能是由于什么原因引起的?
引起不理想的標(biāo)準(zhǔn)曲線的原因有很多,常見的原因例舉如下:
◆ 確定稀釋是否得當(dāng)。
◆ 確定波長是否正確。
◆ 標(biāo)準(zhǔn)品和樣品必需在15-20分鐘內(nèi)滴加入板內(nèi)。(除非試劑盒內(nèi)說明書特別說明)
◆ 檢查背景是否過高。
◆ 確定酶標(biāo)板是否正確洗滌。 不恰當(dāng)?shù)南礈炜赡軙?huì)引起具有高背景的平直曲線。
◆ 在測定過程中重復(fù)讀板。在超過建議時(shí)間后讀板會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。
◆ 如果高的標(biāo)準(zhǔn)品的讀數(shù)超過了酶標(biāo)儀的范圍,確定標(biāo)準(zhǔn)品是否正確溶解,孵育時(shí)間和溫度是否準(zhǔn)確。
◆ 為保證實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)確性請重復(fù)測定。
◆ 如果使用對照,對照的濃度必須在測定范圍內(nèi)。
◆ 在檢測和孵育過程中確定試劑沒有被污染。
◆ 沒有任何信號的平直標(biāo)準(zhǔn)曲線可能是由于酶結(jié)合物或者底物沒有反應(yīng)。 檢查各個(gè)操作過程
◆ 由于許多酶標(biāo)儀的限制,因此建議標(biāo)準(zhǔn)品檢測由高向低做復(fù)孔。
我的電腦軟件不支持推薦的數(shù)據(jù)歸納方式,我是否可以用其它的?
◆ 可以,然而,每次測定好使用說明書中推薦的數(shù)據(jù)歸納方式。使用不同的數(shù)據(jù)歸納方式會(huì)導(dǎo)致結(jié)果的浮動(dòng)。
◆ 對于不同的計(jì)算機(jī)軟件,將標(biāo)準(zhǔn)品的吸光度設(shè)定為Y軸,濃度設(shè)定為X軸。用對數(shù)紙作出的數(shù)據(jù)應(yīng)該是線性的,回歸分析被應(yīng)用于對數(shù)變換。如果不能使用對數(shù)紙,則將濃度的對數(shù)和OD值的對數(shù)進(jìn)行線性作圖。適曲線由回歸分析決定。
測定多個(gè)酶標(biāo)板時(shí)是否可以使用同一條標(biāo)準(zhǔn)曲線?
◆ 在測定不同板中的樣品時(shí),每一個(gè)板都對應(yīng)一條標(biāo)準(zhǔn)曲線。技術(shù)錯(cuò)誤或者不同的孵育情況,環(huán)境條件都會(huì)引起酶標(biāo)板之間產(chǎn)生不同結(jié)果。一條標(biāo)準(zhǔn)曲線測定的樣品值必需是在相同環(huán)境下產(chǎn)生的,否則就是無效值。
底物有可能被污染嗎?
◆ 是的。如果測定時(shí)使用的是堿性磷酸酶或者辣根過氧化物酶標(biāo)記的結(jié)合物,在測定時(shí)要注意避免污染。污染可能會(huì)導(dǎo)致產(chǎn)生超過酶標(biāo)儀范圍的值。避免與金屬或氧化試劑接觸。使用新容器。
底物是否需要在黑暗環(huán)境中進(jìn)行孵育?
◆ 不需要。不過在孵育過程中應(yīng)避免陽光直射。
從今日起,凡購買上海茁彩生物品牌的Elisa試劑盒,均可提供免費(fèi)待測服務(wù),為您提供專業(yè)的指導(dǎo),在Elisa實(shí)際操作過程中,如遇到任何問題均可咨詢。