注意：正式測定之前選擇 2-3個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測定。

磷脂酶C(PLC)檢測試劑盒測定意義

磷脂酶C（EC 3.1.4.3）是一種水解甘油磷酸酯C3位點(diǎn)甘油磷酸酯鍵的脂類水解酶，廣泛存在于微生物及動植物的組織和細(xì)胞中，在細(xì)胞代謝、細(xì)胞傳遞、生長發(fā)育等方面具有重要作用。

磷脂酶C(PLC)檢測試劑盒測定原理

磷脂酶C催化水解NPPC產(chǎn)生對硝基，在410nm處有特征吸收峰。

自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器

天平、研缽、超速冷凍離心機(jī)、可見分光光度計、1mL玻璃比色皿、恒溫水浴鍋。

酶液提取

1. 組織：按照質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為1：5~10 的比例（建議稱取約0.1g，加入1mL提取液）加入提取液，冰浴勻漿后于4℃，10000g 離心5min，取全部上清于4℃、100000g離心 30min，棄上清，取沉淀溶于1mL試劑一。

2. 細(xì)胞：按照細(xì)胞數(shù)量（10⁴個）：提取液體積（mL）為500~1000：1的比例（建議500萬細(xì)胞加入1mL提取液），冰浴超聲波破碎細(xì)胞（功率300w，超聲3秒，間隔7秒，總時間3min）；然后于4℃，10000g 離心5min，取全部上清于4℃、100000g 離心30min，棄上清，取沉淀溶于1mL 試劑一。

3. 血清：直接測定。