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伊萊博生物科技(上海)有限公司

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瑞氏-吉姆薩染色
瑞氏-吉姆薩染色
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更新時(shí)間:2024-11-06 14:32:08瀏覽次數(shù):3885

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【簡(jiǎn)單介紹】
瑞氏-吉姆薩染色實(shí)驗(yàn)經(jīng)常用于血液和細(xì)胞涂片、骨髓細(xì)胞涂片、細(xì)菌染色。細(xì)胞質(zhì)呈紅色,細(xì)胞核及細(xì)菌呈藍(lán)色,嗜酸性顆粒呈橘紅色。染液中加中性甘油,防止甲醇揮發(fā)或氧化,同時(shí)也可使血細(xì)胞染色較清晰。

瑞氏-吉姆薩染


瑞氏色素是酸性染料伊紅(Eosin)和堿性染料yajialan(Methylene Blue)組成的復(fù)合染料, 對(duì)原生質(zhì)的染色有很好的區(qū)別作用。吉姆薩染液由天青2與伊紅混合而成,染色原理和結(jié)果與瑞氏染色法基本相同,姬姆薩染色液對(duì)胞漿著色力較強(qiáng),能較好的顯示胞漿的嗜堿性程度,特別是對(duì)血液和骨髓細(xì)胞中的嗜天青、嗜酸性、嗜堿性顆粒,著色清晰,但是對(duì)胞核著色偏深,核結(jié)構(gòu)顯色不佳,常與故姬姆薩染液常與瑞氏染液聯(lián)合使用。


實(shí)驗(yàn)步驟

  1. ?涂片制備?

取細(xì)胞懸液進(jìn)行離心,棄去上清液。

加入適量PBS緩沖液,混勻后取適量滴于載玻片前端。

用推片呈30-40°角均勻用力向另一端平穩(wěn)地推出,制備成細(xì)胞涂片。

將涂片放置自然晾干。

  1. ?染色?

對(duì)于血涂片,可用組化筆沿著載玻片的邊緣畫一個(gè)大的長(zhǎng)方形,以便后續(xù)觀察。其他細(xì)胞涂片則無(wú)需此步驟。

滴加適量瑞氏染液,完quan覆蓋細(xì)胞,染色1分鐘。

用純水沖洗組織上的染液,直至玻片流水呈無(wú)色。

滴加吉姆薩染色液,染色30秒(可用洗耳球輕輕吹打至染液完quan覆蓋細(xì)胞)。

滴加瑞氏-吉姆薩C溶液(或D溶液),染色一定時(shí)間(根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要調(diào)整)。

再次用純水沖洗組織上的染液,直至玻片上流水呈無(wú)色。

  1. ?觀察與封片?

稍微甩下載玻片上多余的水份,用顯微鏡快速觀察染色效果。

染色完成后,將涂片置于65℃烤箱烘烤4小時(shí)以上進(jìn)行固定。

使用二甲苯進(jìn)行透明處理,然后用中性樹膠封片。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果判讀

在顯微鏡下觀察,不同類型的細(xì)胞會(huì)呈現(xiàn)出不同的染色特征。例如:

紅細(xì)胞數(shù)量多,體積小,無(wú)核,呈粉色或肉粉色。

嗜中性粒細(xì)胞體積略大于紅細(xì)胞,細(xì)胞核呈紫藍(lán)色分葉狀,細(xì)胞質(zhì)幾乎無(wú)色。

嗜酸性粒細(xì)胞體積略大于嗜中性粒細(xì)胞,細(xì)胞核呈紫色,通常為2葉,細(xì)胞質(zhì)充嗜酸性顆粒呈紅色。

嗜堿性粒細(xì)胞體積略小于嗜酸性粒細(xì)胞,細(xì)胞質(zhì)內(nèi)有大小不等被染成紫色的嗜堿顆粒,核1-2葉,胞質(zhì)染成淡藍(lán)色。

淋巴細(xì)胞圓形,體積與紅細(xì)胞相似,核致密染成深紫色。

單核細(xì)胞體積大,細(xì)胞質(zhì)染成灰藍(lán)色,核呈腎型或馬蹄型染成紫藍(lán)色。

注意事項(xiàng)

制作良好的涂片要求厚薄適宜,分布均勻,邊沿整齊。

制作的涂片需要充分干燥以防脫片。

染色時(shí)間可根據(jù)染液濃度、室溫高低、細(xì)胞多少來(lái)進(jìn)行調(diào)節(jié)。


瑞氏-吉姆薩染經(jīng)常用于血液和細(xì)胞涂片、骨髓細(xì)胞涂片、細(xì)菌染色。細(xì)胞質(zhì)呈紅色,細(xì)胞核及細(xì)菌呈藍(lán)色,嗜酸性顆粒呈橘紅色。染液中加中性甘油,防止甲醇揮發(fā)或氧化,同時(shí)也可使血細(xì)胞染色較清晰。





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