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伊萊博生物科技（上海）有限公司
主營(yíng)產(chǎn)品： 動(dòng)物行為學(xué)檢測(cè),大中小型動(dòng)物實(shí)驗(yàn),細(xì)胞培養(yǎng)服務(wù) |
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| 參考價(jià) | ￥ 2000 |
| 訂貨量 | 1 臺(tái) |
- 型號(hào)
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- 所在地 上海市
更新時(shí)間：2023-10-30 14:51:58瀏覽次數(shù)：2713
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線粒體膜電位(MMP)檢測(cè)實(shí)驗(yàn)原理
線粒體在產(chǎn)生能量時(shí)會(huì)將電化學(xué)勢(shì)能儲(chǔ)存于線粒體內(nèi)膜，在內(nèi)膜兩側(cè)，若質(zhì)子及其他離子濃度的不對(duì)稱分布就會(huì)形成線粒體膜電位。
線粒體膜電位(MMP)檢測(cè)服務(wù)介紹
大量的研究表明線粒體與細(xì)胞凋亡密切相關(guān)，其中線粒體跨膜電位（MMP）的下降，被認(rèn)為是細(xì)胞凋亡級(jí)聯(lián)反應(yīng)過(guò)程中早發(fā)生的事件之一。它發(fā)生在細(xì)胞核凋亡特征（染色質(zhì)濃縮、DNA斷裂）出現(xiàn)之前,一旦線粒體跨膜電位崩潰，則細(xì)胞凋亡不可逆轉(zhuǎn)。
實(shí)驗(yàn)流程
1.細(xì)胞培養(yǎng)；
2.用適當(dāng)?shù)姆椒ㄕT導(dǎo)細(xì)胞凋亡，同時(shí)設(shè)立陰性依照組合陽(yáng)性對(duì)照組，收集細(xì)胞；
3.用PBS洗滌細(xì)胞三次，收集不多于1×106的細(xì)胞；
4.取100μL10×Incubation Buffer加900μL滅菌去離子水稀釋成1×Incubation Buffer，混勻并預(yù)熱至37℃；
5.吸取500μL 1×Incubation Buffer，加入1μL JC-1，渦旋混勻配成JC-1工作液；
6.取500μL JC-1工作液將細(xì)胞均勻懸浮，37℃，5% CO2的培養(yǎng)箱中孵育15~20min；
7.室溫離心（2000rpm,5min）收集細(xì)胞，用1×Incubation Buffer洗兩次；
8.吸取500 μL 10×Incubation Buffer重新懸浮細(xì)胞；
9.流式細(xì)胞儀檢測(cè)，分析。
