腫瘤壞死因子-α是一種具有多種生物學(xué)活性的多效性細(xì)胞因子,來(lái)源極廣泛,主要包括脂肪細(xì)胞、激活的小膠質(zhì)細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、B細(xì)胞、T細(xì)胞。有活性的TNF-α分子量為17KD,以三聚體形式與細(xì)胞表面的TNF受體(TNFR)結(jié)合,介導(dǎo)多種生物學(xué)活性。已知TNF-α是迄今發(fā)現(xiàn)的抗腫瘤活性的細(xì)胞因子,但TNF-α在體內(nèi)的大量產(chǎn)生和釋放則會(huì)破壞機(jī)體的免疫平衡,與其他炎癥因子一起產(chǎn)生多種病理?yè)p傷。在許多疾病,如
人腫瘤壞死因子α(TNF-α)抗原純品說(shuō)明書(shū)
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名 稱:人腫瘤壞死因子α(TNF-α)抗原純品。
目 錄 號(hào):YP100009
濃 度:1mg/ml
緩 沖 液:0.01mol/L的PBS、pH:7.2、0.2%Procline-300、50%甘油。
制備方法: 大腸桿菌重組蛋白。
純化方法:親和純化。
應(yīng)用范圍:用于細(xì)胞培養(yǎng)的刺激劑;用于ELISA、CLIA、WB、IHC等免疫檢測(cè)。
產(chǎn)品純度:不低于總蛋白的90%。
儲(chǔ)存方法:存放在-20℃。
注意事項(xiàng):避免反復(fù)凍融。
有效期限:請(qǐng)您在管體注明有效期內(nèi)使用。
使用建議:本產(chǎn)品可以用于細(xì)胞水平、動(dòng)物水平、蛋白水平的免疫學(xué)反應(yīng)相關(guān)實(shí)驗(yàn)。
抗腫瘤壞死因子α(TNF-α)抗體能夠中和高濃度TNF-α在機(jī)體內(nèi)產(chǎn)生的各種有害效應(yīng),阻止其引起的如類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎等自身免疫性疾病的發(fā)生和發(fā)展,在治療多種相關(guān)疾病方面具有廣闊的臨床應(yīng)用前景。已有許多實(shí)驗(yàn)證據(jù)表明,具有中和作用的抗TNF-α單克隆抗體能夠預(yù)防和治療因TNF-α過(guò)量而導(dǎo)致的炎癥、感染性休克等相關(guān)疾病狀態(tài)。我們利用噬菌體表面展示技術(shù)制備基因工程抗TNF-α單鏈抗體(scFv),一方面建立了在體外大量制備抗體的簡(jiǎn)便的生產(chǎn)工藝,解決了目前TNF-α單抗制備工藝復(fù)雜、產(chǎn)量低的問(wèn)題;另一方面由于scFv只含有抗體的重鏈可變區(qū)(VH )和輕鏈可變區(qū)(VL)片段,具有分子量小、免疫原性低、穿透力強(qiáng)的優(yōu)點(diǎn),克服了鼠源性單抗免疫原性強(qiáng)、分子量大、不易穿過(guò)血管壁的缺陷,使得抗TNF-α scFv在臨床*中具有良好的應(yīng)用前景;第三,由于噬菌體展示技術(shù)實(shí)現(xiàn)了蛋白質(zhì)表型和基因型的統(tǒng)一,使得該體系成為探索和分析蛋白質(zhì)相互識(shí)別規(guī)律的一種極有價(jià)值的實(shí)驗(yàn)工具。 本研究?jī)?nèi)容包括抗TNF-α噬菌體scFv抗體文庫(kù)的構(gòu)建,從中篩選、鑒定抗TNF-α scFv,用基因工程方法提高其表達(dá)量并進(jìn)行人源化改造等工作,并對(duì)scFv重鏈可變區(qū)一級(jí)結(jié)構(gòu)的保守性進(jìn)行了初步分析。 I 構(gòu)建抗TNF-α噬菌體抗體scFv文庫(kù) 為了得到抗TNF-α scFv,我們首先構(gòu)建了小鼠噬菌體單鏈抗體庫(kù)。
抗腫瘤壞死因子α(TNF-α)抗體能夠中和高濃度TNF-α在機(jī)體內(nèi)產(chǎn)生的各種有害效應(yīng),阻止其引起的如類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎等自身免疫性疾病的發(fā)生和發(fā)展,在治療多種相關(guān)疾病方面具有廣闊的臨床應(yīng)用前景。已有許多實(shí)驗(yàn)證據(jù)表明,具有中和作用的抗TNF-α單克隆抗體能夠預(yù)防和治療因TNF-α過(guò)量而導(dǎo)致的炎癥、感染性休克等相關(guān)疾病狀態(tài)。我們利用噬菌體表面展示技術(shù)制備基因工程抗TNF-α單鏈抗體(scFv),一方面建立了在體外大量制備抗體的簡(jiǎn)便的生產(chǎn)工藝,解決了目前TNF-α單抗制備工藝復(fù)雜、產(chǎn)量低的問(wèn)題;另一方面由于scFv只含有抗體的重鏈可變區(qū)(VH )和輕鏈可變區(qū)(VL)片段,具有分子量小、免疫原性低、穿透力強(qiáng)的優(yōu)點(diǎn),克服了鼠源性單抗免疫原性強(qiáng)、分子量大、不易穿過(guò)血管壁的缺陷,使得抗TNF-α scFv在臨床*中具有良好的應(yīng)用前景;第三,由于噬菌體展示技術(shù)實(shí)現(xiàn)了蛋白質(zhì)表型和基因型的統(tǒng)一,使得該體系成為探索和分析蛋白質(zhì)相互識(shí)別規(guī)律的一種極有價(jià)值的實(shí)驗(yàn)工具。 本研究?jī)?nèi)容包括抗TNF-α噬菌體scFv抗體文庫(kù)的構(gòu)建,從中篩選、鑒定抗TNF-α scFv,用基因工程方法提高其表達(dá)量并進(jìn)行人源化改造等工作,并對(duì)scFv重鏈可變區(qū)一級(jí)結(jié)構(gòu)的保守性進(jìn)行了初步分析。 I 構(gòu)建抗TNF-α噬菌體抗體scFv文庫(kù) 為了得到抗TNF-α scFv,我們首先構(gòu)建了小鼠噬菌體單鏈抗體庫(kù)。