制備特異性高的抗人Ig G和抗人Ig M單克隆抗體,并應用于臨床血清學檢測試劑盒,為其提供優(yōu)質的二抗.方法:以人Ig G和Ig M為抗原,免疫BALB/c小鼠,通過傳統(tǒng)雜交瘤融合和篩選技術制備抗人Ig G和抗人Ig M單克隆抗體;經(jīng)體內誘生法制備腹水并純化;采用酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）和Western印跡進行交叉篩選和特異性鑒定,并對篩選出的單抗進行辣根過氧化物酶（HRP）標記,再與市售的檢
抗大鼠免疫球蛋白M（IgM）抗體說明書
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名 稱：抗大鼠免疫球蛋白M（IgM）抗體。
克 隆 號：YIG232。
目 錄 號：YP826512。
亞 型：IgG。
緩 沖 液：0.01mol/L的PBS、pH：7.2、0.2%Procline-300。
免 疫 原：大鼠免疫球蛋白M 。
制備方法：取健康BALB/C小鼠單抗腹水。
純化方法：親和純化。
應用范圍：抗體針對的是大鼠免疫球蛋白M表位，適用于ELISA、CLIA、 WB、IHC等免疫實驗。
產品純度：不低于總蛋白的95%。
儲存方法：存放在-20℃。
注意事項：避免反復凍融。
有效期限：請您在管體注明有效期內使用。
使用建議：本產品可以用于大鼠免疫球蛋白M的免疫學反應相關實驗。
應用細胞工程技術研制大菱鲆免疫球蛋白M(immunoglobulin M,IgM)的單克隆抗體并分析其免疫學特性。小鼠骨髓瘤細胞NS0與經(jīng)IgM免疫的BALB/C小鼠脾細胞融合,經(jīng)過反復有限稀釋法克隆,篩選獲得4株抗大菱鲆IgM的單克隆抗體雜交瘤細胞株,分別為B1D1、D5C2、E1B2和F4A1。經(jīng)小鼠腹水擴大生產后,單抗效價為1∶1.024×106檢測靈敏度為32 ng/mL。Western blot分析表明,獲得的單抗與IgM重鏈區(qū)特異性結合。交叉結果顯示,單抗與大菱鲆血清呈強陽性反應,與褐牙鲆、紅鰭東方鲀、許氏平鲉、六線魚、鱸魚均呈微弱陽性反應,而與半滑舌鰨、鯉魚、鯽魚、草魚、鳙魚的血清無交叉反應。本研究制備的大菱鲆IgM單克隆抗體效價高、靈敏度高、特異性強,適合用于大菱鲆免疫學相關研究和生產實際應用。制備特異性高的抗人Ig G和抗人Ig M單克隆抗體,并應用于臨床血清學檢測試劑盒,為其提供優(yōu)質的二抗.方法:以人Ig G和Ig M為抗原,免疫BALB/c小鼠,通過傳統(tǒng)雜交瘤融合和篩選技術制備抗人Ig G和抗人Ig M單克隆抗體;經(jīng)體內誘生法制備腹水并純化;采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)和Western印跡進行交叉篩選和特異性鑒定,并對篩選出的單抗進行辣根過氧化物酶(HRP)標記,再與市售的檢測病原微生物抗體試劑盒中對應的HRP標記的二抗(抗人Ig G和抗人Ig M)做對比分析.結果:篩選到2株可穩(wěn)定分泌抗人Ig G單抗和2株抗人Ig M單抗,經(jīng)交叉反應,Western印跡及對比實驗分析,證明這4株單抗效價高,特異性好,比臨床試劑盒中的酶標二抗特異性強,敏感度高.結論:獲得4株特異性強,敏感度高的抗人Ig G和抗人Ig M單克隆抗體,可為各種病原微生物血清學的檢測提供二抗試劑,具有良好的應用價值.
