良好的儀器和準(zhǔn)確的操作是保證大鼠脂多糖結(jié)合蛋白(LBP)ELISA試劑盒準(zhǔn)確性和可靠性的條件。用于ELISA的蒸餾水或去離子水,包括洗滌,應(yīng)該是新鮮的和高質(zhì)量的。有些樣品可以直接測(cè)定,有些則需要預(yù)處理。一般試劑盒檢測(cè)結(jié)果好主要是因?yàn)檫@三個(gè)元素。

1、樣本因素
血清標(biāo)本可用常規(guī)方法采集,注意避免溶血。紅細(xì)胞溶解時(shí),會(huì)釋放出具有過(guò)氧化物酶活性的物質(zhì)。在以HRP為標(biāo)記的ELISA中,溶血性樣品可能會(huì)增加非特異性顯色。
如果放在冰箱里太久,可以聚合,間接ELISA可以加深背景。珠子、試管、磁性球體、ELSIA和外來(lái)試劑都與特殊儀器一起使用,如果嚴(yán)格遵循操作,將獲得正確的結(jié)果。加樣時(shí),添加劑應(yīng)加到雷薩板的孔底,避免加到孔壁上部,注意不要溢出或產(chǎn)生生氣的氣泡。對(duì)于這種測(cè)定,需要稀釋的血清,可以在加入樣品之前在試管中根據(jù)稀釋度稀釋。
2、ELISA樣品添加步驟
一般在大鼠脂多糖結(jié)合蛋白(LBP)ELISA試劑盒中,加樣有三個(gè)步驟,即加樣、加酶結(jié)合物、加底物。冷凍血清融化后,蛋白質(zhì)部分濃縮,分布不均勻,要充分?jǐn)嚢?,輕輕攪拌,避免產(chǎn)生氣泡??梢缘怪欤诨煲羝魃蠎?yīng)該不會(huì)強(qiáng)烈震蕩。血漿標(biāo)本的制備需要抗凝劑,而血清標(biāo)本只有在血清自然凝固、收縮后才能獲得。也可以在板孔中加入稀釋液,再加入血清樣本,然后在微型搖床上搖勻1分鐘,確保混合。
一般來(lái)說(shuō),5天以內(nèi)測(cè)定的血清標(biāo)本可以放在4℃下,超過(guò)一周測(cè)定的需要低溫保存。有各種各樣的樣品可用于elisa測(cè)定。體液、分泌物和排泄物都可以作為樣本來(lái)測(cè)定某些抗體或抗原成分。ELISA試劑盒不需要的部分要及時(shí)放回冰箱。
3、固體載體
大鼠脂多糖結(jié)合蛋白(LBP)ELISA試劑盒的操作因固相載體的形成而異,板斑一般用于海中醫(yī)療維護(hù)。除特殊情況外,血清用作醫(yī)療維護(hù)中的測(cè)試樣本。添加酶結(jié)合物應(yīng)用液和底物液時(shí),可使用定量多通道加液器快速完成加液過(guò)程。如果有細(xì)菌污染,細(xì)菌中可能含有內(nèi)源性HRP,也會(huì)產(chǎn)生假陽(yáng)性反應(yīng)。每次添加標(biāo)本時(shí),應(yīng)更換吸嘴,避免交叉污染,也可使用一次性定量塑料管進(jìn)行加樣。