6
快速末端平齊化和快速連接試劑盒
#E0542S 20 次反應(yīng) . . . . . .￥1,809
#E0542L 100 次反應(yīng) . . . . . .￥7,199
特性
30 分鐘內(nèi)可完成限制性內(nèi)切酶消化后 DNA 的末端平齊化
即用型預(yù)混液在室溫即可進(jìn)行反應(yīng)
適用于限制性內(nèi)切酶消化后的 DNA，已剪切或霧化的 DNA 或 PCR 產(chǎn)物
適用于限制性內(nèi)切酶消化后的 DNA，已剪切或霧化的 DNA 或 PCR 產(chǎn)物
概述
快速末端平齊化試劑盒將不匹配的 DNA 5′ 或 3′ 突出末端轉(zhuǎn)變?yōu)閹в?5′ 磷酸的平末端，以便有效地與平末端 DNA 克隆載體連接。用 T4 DNA 聚合酶（NEB #M0203）使 DNA 末端平齊化，該酶同時具有 3′ →5′ 外切酶活性和 5′ →3′ 聚合酶活性。酶混合液中的另一成分是 T4 多聚核苷酸激酶（NEB #M0201），可將平末端 DNA 的 5′ 端磷酸化，以用于與克隆載體的連接反應(yīng)。本試劑盒經(jīng)過優(yōu)化，可在單次反應(yīng)中將 5 μg 的 DNA 末端平齊化。
應(yīng)用
• 對已剪切、霧化、或經(jīng)限制性內(nèi)切酶消化的 DNA 進(jìn)行末端平齊化，便于與質(zhì)粒、cosmid、fosmid 和 BAC 載體連接
• PCR 產(chǎn)物在進(jìn)行平末端克隆前進(jìn)行末端平齊化
• PCR 產(chǎn)物在進(jìn)行平末端克隆前進(jìn)行末端平齊化
快速末端平齊化TM試劑盒組份
- 平齊化酶混合液
- 10X 平齊化反應(yīng)緩沖液
- 1 mM dNTP 混合液
質(zhì)保聲明
快速末端平齊化試劑盒經(jīng)過嚴(yán)格的質(zhì)控檢測，確保該產(chǎn)品具有zuigao的活性和純度。
熱失活
70℃ 加熱 10 分鐘。
注意事項
PCR 產(chǎn)物在進(jìn)行末端平齊化之前必須純化，可采用商業(yè)純化試劑盒、酚抽提/乙醇沉淀法或者凝膠電泳的方法純化 DNA。經(jīng)限制性內(nèi)切酶消化的 DNA 無需純化可直接進(jìn)行末端平齊化反應(yīng)。
