. MRM 技術(shù)在生物標(biāo)志物檢測中的應(yīng)用運(yùn)用蛋白組學(xué)的方法進(jìn)行生物標(biāo)志物的發(fā)現(xiàn)和檢測是目前蛋白質(zhì)組研究的熱點(diǎn)。隨著蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)的發(fā)展，采用二維凝膠電泳或槍法（shotgun）技術(shù)尋找上調(diào)或下調(diào)蛋白質(zhì)以發(fā)現(xiàn)生物標(biāo)志物的研究策略已得到很大的豐富和完善。目前，標(biāo)志物發(fā)現(xiàn)- 驗(yàn)證- 臨床確證的研究模式已得到研究者們的廣泛認(rèn)可[5,6]。桂林市藥物結(jié)構(gòu)確認(rèn)及雜質(zhì)分析-CMA資質(zhì)
. 桂林市藥物結(jié)構(gòu)確認(rèn)及雜質(zhì)分析-CMA資質(zhì)
MRM 技術(shù)在生物標(biāo)志物檢測中的應(yīng)用運(yùn)用蛋白組學(xué)的方法進(jìn)行生物標(biāo)志物的發(fā)現(xiàn)和檢測是目前蛋白質(zhì)組研究的熱點(diǎn)。隨著蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)的發(fā)展，采用二維凝膠電泳或槍法(shotgun)技術(shù)尋找上調(diào)或下調(diào)蛋白質(zhì)以發(fā)現(xiàn)生物標(biāo)志物的研究策略已得到很大的豐富和完善。目前，標(biāo)志物發(fā)現(xiàn)- 驗(yàn)證- 臨床確證的研究模式已得到研究者們的廣泛認(rèn)可[5,6]。即在發(fā)現(xiàn)階段從疾病組織中尋找與正常組織有差異的蛋白質(zhì)，到驗(yàn)證階段使用M R M 技術(shù)于組織周邊體液或血漿中檢測該差異蛋白質(zhì)，利用子離子譜進(jìn)行定性，后用M R M 技術(shù)和同位素稀釋或質(zhì)量標(biāo)簽標(biāo)記(mTRAQ)的方法對(duì)篩選出來的標(biāo)記物定量，進(jìn)行臨床確證。這種研究模式使體液中生物標(biāo)志物的發(fā)現(xiàn)和驗(yàn)證更為有效、科學(xué)和合理。MRM 技術(shù)與金標(biāo)準(zhǔn)ELISA 相比，周期更短、成本更低，更重要的是能進(jìn)行與同一疾病相關(guān)的多個(gè)標(biāo)記物同時(shí)測定且不需制備其相應(yīng)的抗體，具有*的應(yīng)用*性。M R M 技術(shù)在驗(yàn)證和確證階段都有極其重要的應(yīng)用，充分體現(xiàn)了該技術(shù)在生物標(biāo)志物檢測領(lǐng)域的價(jià)值。例如，在Whiteaker 等[7]的研究中，以小鼠為模型研究乳腺癌的生物標(biāo)志物；用液相色譜串連質(zhì)譜(LC-MS/MS)對(duì)腫瘤和正常乳房組織的蛋白質(zhì)進(jìn)行檢測，篩查出700 個(gè)以上差異蛋白質(zhì)；再聯(lián)合抗體和MRM 技術(shù)后鑒定了fubulin-2 作為血漿中的生物標(biāo)志物。實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)一步驗(yàn)證了M R M 技術(shù)驗(yàn)證生物標(biāo)志物的方法，在發(fā)現(xiàn)新型生物標(biāo)志物研究中的可行性。Kuhn 等研究[8]表明，MRM 技術(shù)與同位素標(biāo)記相結(jié)合進(jìn)行定量分析，可以節(jié)省分析時(shí)間，并且能得到與抗體和免疫分析等經(jīng)典驗(yàn)證方法具良好相關(guān)性的檢測結(jié)果。他們采用同位素標(biāo)記合成肽段和MRM 技術(shù)相結(jié)合，檢測來自類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎患者血漿樣本中診斷標(biāo)記物C- 反應(yīng)蛋白的濃度，并對(duì)方法的回收率、線性等進(jìn)行了考察，結(jié)果能達(dá)到高達(dá)66%的回收率和3 個(gè)數(shù)量級(jí)以上的線性范圍。
二、IR（紅外）測試
儀器：北京瑞麗光譜儀器公司 WQF-520A傅里葉變換紅外光譜儀
測試條件：KBr壓片法
測試結(jié)果：各個(gè)樣品的吸收峰等列表如下：
吸收峰cm-1 | 基團(tuán) | 強(qiáng)度 |
（藥品結(jié)構(gòu)分析）樣品 批號(hào)：B20151001 |
3444 | -OH | S |
3218、3149 | N-H | M |
2971、2939 | C-H | M |
1450、1371 | CH3、CH2 | M |
1621 | CH3CH2OCOO- | S |
解析：1、3444cm-1，為結(jié)晶水-OH伸縮振動(dòng)吸收峰，屬強(qiáng)吸收峰
2、3218、3149cm-1，為伯胺N-H伸縮振動(dòng)吸收峰，屬中等強(qiáng)度吸收峰；
3、2971、2939 cm-1，為甲基、亞甲基C-H伸縮振動(dòng)吸收峰，屬中等強(qiáng)度吸收峰；
4、1450 、1371cm-1，為甲基、環(huán)烷烴CH2變形振動(dòng)吸收峰，屬中等強(qiáng)度吸收峰；
5、1621 cm-1，為乳酸絡(luò)合成鹽振動(dòng)吸收峰，屬強(qiáng)吸收峰；
可見，樣品（批號(hào)為：B20151001）的紅外光譜圖的特征吸收峰符合（藥品結(jié)構(gòu)分析）的特征官能團(tuán)的吸收峰。
桂林市藥物結(jié)構(gòu)確認(rèn)及雜質(zhì)分析-CMA資質(zhì)
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