影響細(xì)胞轉(zhuǎn)染的因素,你知道嗎?
血清：血清影響復(fù)合物的形成，降低轉(zhuǎn)染效率
陽(yáng)離子脂質(zhì)體和 DNA 的量在使用血清時(shí)會(huì)有所不同，因此想在轉(zhuǎn)染培養(yǎng)基中加入血清時(shí)要進(jìn)行條件優(yōu)化。大部分細(xì)胞可以在無(wú)血清培養(yǎng)基中幾個(gè)小時(shí)內(nèi)保持健康，對(duì)于對(duì)血清缺乏比較敏感的細(xì)胞，可以使用 OPTI-MEM I 培養(yǎng)基。對(duì)于對(duì)血清缺乏比較敏感的貼壁細(xì)胞，建議使用 LIPOFECTAMINE 2000。
抗生素：
比如*和*，是影響轉(zhuǎn)染的培養(yǎng)基添加物。這些抗生素一般對(duì)于真核細(xì)胞無(wú)毒，但陽(yáng)離子脂質(zhì)體試劑增加了細(xì)胞的通透性，使抗生素可以進(jìn)入細(xì)胞。這降低了細(xì)胞的活性，導(dǎo)致轉(zhuǎn)染效率低。
細(xì)胞代數(shù)：
轉(zhuǎn)染前細(xì)胞經(jīng)過(guò) 1-2 次傳代保證細(xì)胞生長(zhǎng)旺盛容易轉(zhuǎn)染，注意貼壁細(xì)胞一旦長(zhǎng)滿就不好轉(zhuǎn)染。
細(xì)胞鋪板密度：
一般轉(zhuǎn)染時(shí)，貼壁細(xì)胞密度為 70%-90%，懸浮細(xì)胞密度為 2*10^6--4*10^6 細(xì)胞/ml 時(shí)效果較好。確保轉(zhuǎn)染時(shí)細(xì)胞沒(méi)有長(zhǎng)滿或處于靜止期。鋪板細(xì)胞數(shù)目的增加可以增加轉(zhuǎn)染活性和細(xì)胞產(chǎn)量。
DNA質(zhì)量：
DNA 質(zhì)量對(duì)轉(zhuǎn)染效率影響非常大。一般的轉(zhuǎn)染技術(shù)基于電荷吸引原理，如果 DNA 不純，如帶少量的鹽離子，蛋白，代謝物污染都會(huì)顯著影響轉(zhuǎn)染復(fù)合物的有效形成和轉(zhuǎn)染的進(jìn)行。
酶聯(lián)免疫試劑盒（ELISA試劑盒）：內(nèi)分泌系列、肝纖維化系列、傳染病系列、優(yōu)生優(yōu)育系列、腫瘤系列、細(xì)胞因子系列、自身免疫系列等系列酶聯(lián)免疫試劑盒生化試劑：氨基酸類(lèi)、蛋白質(zhì)類(lèi)、抗生素類(lèi)、酶類(lèi)、植物激素及核酸類(lèi)、碳水化合物類(lèi)、色素類(lèi)、維生素類(lèi)、分離材料及耗材類(lèi)、表面活性劑類(lèi)、緩沖劑類(lèi)、其它試劑類(lèi)、培養(yǎng)基類(lèi)等試劑類(lèi)產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)品：中藥化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品、西藥標(biāo)準(zhǔn)品、抗生素標(biāo)準(zhǔn)品、生化標(biāo)準(zhǔn)品等類(lèi)別標(biāo)準(zhǔn)品公司不斷開(kāi)發(fā)新產(chǎn)品，誠(chéng)信服務(wù)，以質(zhì)量及信用為本，與眾多顧客加強(qiáng)合作，建立良好關(guān)系。我們長(zhǎng)期深受廣大客戶的支持與厚愛(ài)，我們用專(zhuān)業(yè)的眼光，的質(zhì)量，服務(wù)于國(guó)內(nèi)外廣大客戶。
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