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上海通蔚生物有限公司

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技術(shù)文章

閱讀：281發(fā)布時間：2020-7-1

ELISA試劑盒在實際應用的過程中，得通過不同的設(shè)計，不好走和方法都是有很多種類的，像是接法、競爭法、雙位點一步法、捕獲法測IgM抗體、應用親和素和*的ELISA。

今天我司就跟大家講講ELISA方法設(shè)計都有哪些原理？

1、ELISA試劑盒以免疫學反應為基礎(chǔ)，將抗原、抗體的特異性反應與酶對底物的高效催化作用相結(jié)合起來的一種敏感性很高的試驗技術(shù)。

2、由于抗原、抗體的反應在一種固相載體-聚苯乙烯微量滴定板的孔中進行，每加入一種試劑孵育后，可通過洗滌除去多余的游離反應物，從而保證試驗結(jié)果的特異性與穩(wěn)定性。

3、應用雙抗體夾心法測定標本水平，用純化的抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入，再與HRP標記的抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。

4、ELISA試劑盒TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品的濃度。

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